汪善锋,史 俊,杨剑波
(江苏农林职业技术学院,江苏 句容 212400)
α-硫辛酸作为一种非常强的抗氧化剂,近年来在医药保健领域受到广泛关注。我们之前的研究发现,日粮中添加硫辛酸能改善育肥猪胴体性状和肉质[1],对育肥猪氧化应激下的血清抗氧化酶活力降低和自由基含量升高有较好的干预作用。α-硫辛酸可增加年老大鼠IgM、IgA、IgG的含量[2],从而增强其机体免疫力。α-硫辛酸可显著减弱小鼠慢性氧化应激造成的免疫力下降[3]。但硫辛酸对猪的免疫功能影响的研究鲜有报道。本试验在育肥猪饲料中添加硫辛酸,研究其对育肥猪免疫功能的影响,为硫辛酸在育肥猪饲粮中的应用及相关研究提供参考。
α-硫辛酸(LA),纯度为99%以上,江苏同禾药业有限公司。
基础日粮参考NRC(1998)猪饲养标准和我国猪饲养标准(2004)进行配制,基础日粮组成及营养水平见表1。
表1 日粮组成及营养水平(风干基础)
采用单因子完全随机化试验设计,选择96头体况良好体重(79.55±4.62)kg的杜×长×大三元杂交猪,随机分为4个处理组(0、300、600、900 mg/kg α-硫辛酸),每组4个重复,每个重复6头,预试期7 d,试验期28 d。
试验猪饲养在设备相同的同栋圈舍中,每个重复的猪饲养于同一栏内,自由采食和饮水,试验期间每日定时清扫猪舍,记录每栏饲料消耗等。
试验结束时从每个重复中各随机选取2头,前腔静脉采血10 ml,静置冰盒中30 min后,在转速4 000 r/min条件下离心10 min,制备血清,于-20℃冰箱中保存备测。
放射免疫法测定IL-2、IL-6和TNF-α浓度,免疫比浊法测定免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白M ( IgM)、免疫球蛋白G(IgG)含量,测定试剂盒均由美国R&D公司提供,具体测定方法严格按试剂盒操作说明进行。
数据统计分析采用SPSS16.0软件单因素方差分析方法(ANOVA)进行,均值采用Duncan法进行多重比较,P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著,结果以“平均值±标准差”表示。
育肥猪日粮中添加α-硫辛酸对血清中IgA、IgM和IgG含量的影响见表2。
表2 α-硫辛酸对育肥猪血清中免疫球蛋白含量的影响
由表2可知,日粮中添加硫辛酸对血清中IgA和IgM无显著影响(P>0.05)。硫辛酸添加组育肥猪血清中IgG均显著高于对照组(P<0.05),而硫辛酸添加组之间差异均不显著(P>0.05)。
IgG在人和动物血清免疫球蛋白中含量最高,占血清免疫球蛋白总量75%~80%,在体内发挥抗菌、抗病毒、抗毒素、抗肿瘤等免疫学活性[4]。本试验中,α-硫辛酸添加组血清IgG含量显著提高,表明α-硫辛酸增强了机体的免疫力。
α-硫辛酸对育肥猪血清中IL-2、IL-6和TNF-α含量的影响见表3。
表3 α-硫辛酸对育肥猪血清中炎性细胞因子含量的影响
由表3可知,α-硫辛酸添加组育肥猪血清中IL-2含量均显著高于对照组(P<0.05),而硫辛酸添加组之间差异均不显著(P>0.05)。血清中IL-6和TNF-α随着α-硫辛酸添加水平增加而降低,其中600和900 mg/kg α-硫辛酸添加组的IL-6和TNF-α浓度与对照组相比下降显著,900 mg/kg组的IL-6浓度与300 mg/kg组差异达到显著水平。
IL-2是动物体内重要的广谱免疫增强因子,能增强自然杀伤细胞的活性,诱导T淋巴细胞产生干扰素[5]。IL-6是一种重要的促炎因子,其可反映机体损伤的程度[6]。TNF-α是启动抗菌炎症反应的关键细胞因子[7]。本试验中添加硫辛酸显著升高育肥猪血清IL-2的浓度(P< 0.05),显著降低IL-6和TNF-α浓度(P<0.05),表明硫辛酸可通过影响炎症因子的表达进而提高动物的免疫功能。
本试验初步探讨了α-硫辛酸对育肥猪免疫功能的影响,结果表明,日粮中添加α-硫辛酸,可显著提高育肥猪血清中IgG和IL-2含量,降低IL-6和TNF-α浓度,提示硫辛酸可以调节免疫球蛋白和细胞因子水平,提高育肥猪体液免疫水平,进而改善其免疫功能。α-硫辛酸在育肥猪日粮中的适宜添加量为600~900 mg/kg。