宫颈癌患者HPV感染及EGFR、Sox2水平与预后的关系

陈粉合 邓 祎 王恩栋 王 琰

有研究报道[1]HPV感染是宫颈癌主要的致病因素，且EGFR作为HPV感染过程中的协同因子[2]，通过调节Sox2基因表达、转录水平、翻译水平等蛋白质表达的多方面参与宫颈癌的发病机制[3]。寻找敏感的检测方便的生化标志物对宫颈癌的诊治至关重要。本研究选取宫颈癌患者96例，通过对比与癌旁组织EGFR蛋白表达水平、Sox2水平差异及与HPV感染阳性率、预后和临床病理分期的相关性，旨在为宫颈癌的诊治和预后评估提供科学依据。现将报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集本院2017年1月至2019年1月宫颈癌患者的宫颈癌组织样本91例，同时收集癌旁正常组织样本96例。患者平均年龄(57.46±8.73)岁，Ⅰ期26例、Ⅱ期45例、Ⅲ期20例，高分化26例、中分化42例、低分化23例。纳入标准：治疗前未进行放、化疗，无严重免疫性疾病，无肝肾功能损伤，无其他严重疾病。

1.2 实验方法

PCR-DNA反向杂交：取石蜡包埋组织标本按照试剂盒说明书依次进行HPV-DNA提取、PCR扩增、杂交、洗膜和显色，结果判读：阳性质控品杂交膜条出现在HPV基因型位点或IC位点呈蓝色，其它位点均不显色；阴性结果：IC位点显色外，其它均不显色。

1.3 治疗及随访方法

建立随访档案，门诊随访或电话随访。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 宫颈HPV感染率及宫颈癌组织样本内的EGFR、Sox2阳性表达情况

91例宫颈癌组织样本中有71例检测出HPV感染，感染率为78.0%。同时对所有患者组织样本的EGFR、Sox2表达情况进行比较发现，宫颈癌组织样本内的EGFR、Sox2阳性表达情况明显高于癌旁正常组织样本，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 不同组织样本EGFR、Sox2阳性表达比较(例，%)

2.2 EGFR、Sox2阳性表达与肿瘤分化程度的关系

EGFR、Sox2阳性表达与肿瘤分化程度有密切关系，肿瘤分化越低其EGFR阳性表达率越高(P<0.05)，而Sox2阳性表达率在中分化组最高(P<0.05)，见表2。

2.3 治疗后复发患者的HPV感染、EGFR、Sox2阳性表达情况

对宫颈癌患者进行手术随访发现有20例患者出现复发，其中复发患者HPV阳性率明显高于未复发患者(P<0.05)，EGFR、Sox2阳性表达率也较未复发患者高(P<0.05)，见表3。

表2 不同分化程度肿瘤组织中EGFR、Sox2阳性表达率比较(例，%)

表3 预后与HPV感染率及EGFR、Sox2阳性表达率的关系(例，%)

3 讨论

宫颈癌致死率在妇科恶性肿瘤中占第4位，且发病率呈逐年上升趋势，据统计，全球每年约52.9万宫颈癌新发病例，其中27.5万死亡病例。我国宫颈癌新发病例约13万/年，死亡病例2万/年[4-6]。寻找宫颈癌诊断的敏感的生化指标，尤其是对中晚期特殊类型的宫颈癌的诊断具有重要的临床意义，有利于为宫颈癌患者接受放化疗后是否存在残留癌灶、转移灶、复发的评估提供科学依据。

人类乳头瘤病毒(HPV)是乳头瘤空泡病毒A属，主要有HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型，其中HPV16或18型长期感染可能与女性宫颈癌的发生发展有关。有文献报道[7]HPV病毒感染宫颈黏膜组织后，病毒基因可整合到宿主细胞基因组中，引起宿主细胞染色体畸变诱发肿瘤。此外，HPV-DNA还可以整合原癌基因附近，促进原癌基因激活和抑癌基因的抑制，从而使原癌、抑癌基因水平失衡诱发肿瘤的发生和进展。有研究报道[8]宫颈癌的发生机制中有与促进细胞增殖、生长、分化，抑制细胞凋亡进而影响肿瘤发生发展进程的信号传导途径络氨酸激酶途径有关，该过程中的络氨酸激酶受体(EFGR)被多项研究报道参与宫颈癌的发生发展。有研究报道[9]宫颈癌的EGFR途径中，EGFR蛋白过表达，但该研究并未报道EGFR与宫颈癌临床病理分期的关系。另有研究[10]通过检测78例宫颈鳞状细胞癌标本时发现，所有宫颈癌患者EGFR蛋白阳性表达率为100%，其中72%患者呈强阳性且EGFR阳性表达水平和程度与患者的病理分期有关。Ⅲ、Ⅳ期患者EGFR蛋白表达水平显著高于Ⅰ、Ⅱ期，且Ⅳ期EGFR蛋白表达率显著高于Ⅲ期患者。同时，有研究报道[11]EGFR阳性强度与宫颈癌患者的预后密切相关，EGFR蛋白高表达，预后差。本研究结果显示，宫颈癌患者病灶组织与癌旁组织相比，EGFR蛋白表达水平显著升高且预后较差，差异具有统计学意义(P<0.05)，与既往研究报道一致。本研究还发现，EGFR蛋白表达阳性率与HPV感染率具有一致性。提示，宫颈癌患者应考虑HPV抗感染治疗，且EGFR蛋白表达水平可能与HPV感染阳性率所致的复发具有密切关系，以此可作为宫颈癌病理分期和预后的评估指标。Sox2是Sox家族中的主要成员，在多种肿瘤细胞组织如肺癌、胰腺癌、乳腺癌、神经内分泌癌等中广泛表达。有研究报道[12]Sox表达水平与卵巢癌细胞株的侵袭转移能力密切相关，高表达Sox2基因的组织中，恶性肿瘤的转移和复发率较高。说明，Sox2基因参与恶性肿瘤的基因表达过程，影响肿瘤细胞的生长繁殖、侵袭转移等，可将Sox2作为恶性肿瘤细胞病情发展程度的评估指标。本研究从宫颈癌患者组织中检测到Sox2基因且发现其表达水平与HPV感染阳性率、宫颈癌患者预后等密切相关。Sox2基因可作为转录因子同时参与转录水平、翻译水平、翻译后水平等蛋白表达多水平过程，参与宫颈癌的发生发展过程。

综上所述，宫颈癌患者HPV感染率较高，同时应特别注意EGFR、Sox2阳性表达患者治疗后的定期随访。本研究创新处，从蛋白质表达水平和基因表达水平两方面确定宫颈癌分化程度和预后的影响因素，为宫颈癌的临床诊治提供科学依据。