强直性脊柱炎患者血清软骨寡聚基质蛋白水平及意义研究

陈佳丽， 高锦团， 梅永红

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis，AS)是累及中轴骨、骶髂关节/外周关节，可伴关节外表现的自身免疫性炎症性疾病，其主要病理改变为滑膜炎及软骨变性、破坏。该病好发于青年男性，早期症状不典型，病程持续时间长，病情难以控制，常因疼痛、脊柱关节畸形、功能受限而就诊，可造成严重的社会经济负担，故早期诊断并监测疾病的炎症和疾病活动至关重要[1]。血清软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein，COMP)是1992年在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)、反应性关节炎(reactive arthritis，ReA)、青少年慢性关节炎和骨关节炎(osteoarthritis，OA)患者的血清和滑膜液中首次检测到的一种组织特异性非胶原蛋白，主要在软骨中表达，其次也可表达于肌腱、半月板、滑膜等组织中[2]。学者在RA和OA的研究中证明血清COMP水平可以反应软骨损伤和滑膜炎症。笔者采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked-immuno-sorbent assay，ELISA)检测AS患者血清COMP水平及其他相关指标，探讨COMP的水平与疾病活动性的相关性。

1 对象与方法

1.1对象 采用前瞻性队列研究方法，收集2016年11月-2018年8月在风湿免疫科门诊及住院确诊的AS患者60例，活动组和非活动组各30例。入组标准：(1)符合1984年修订的AS纽约标准[3]；(2)Bath强直性脊柱炎疾病活动性指数(BASDAI)评分≥4分纳入活动组，评分<4分纳入非活动组；(3)年龄16～60岁，男女不限；(4)近3月未使用相关药物治疗；(5)同意在研究期间规则服用治疗药物；(6)自愿参加此项目研究并经过伦理委员会同意，遵守研究规定，自愿签署书面知情同意书。排除标准：(1)合并其他风湿性疾病如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等患者；(2)有心血管、肺、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病或病史者；(3)目前或过去有恶性肿瘤病史者；(4)免疫缺陷、未控制的感染或活动性胃肠道疾病患者；(5)近期或过去有骨折等外伤史者；(6)严重骨质疏松者；(7)孕妇、哺乳期妇女及近期有生育要求的男性或女性；(8)因其他情况研究者认为不宜参加本研究者。同时，收集年龄和性别相匹配的同期健康体检人员30例作为对照组，均无风湿性疾病及相关疾病。

1.2方法 于8:00～10:00在安静状态下采集空腹静脉血5 mL，2 000 r/min离心分离血清，用EP管分装后-80 ℃冷冻保存，集中采用Human COMP ELISA Kit试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)进行检测。收集AS患者同时期红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate，ESR)、C反应蛋白(C reactive protein，CRP)、血小板(platelet，PLT)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、球蛋白(globulin，GLB)、人白细胞抗原B27(human leukocyte antigen，HLA-B27)等检测资料，并进行骶髂关节CT摄片和分级。12例活动期AS患者于治疗24周前后检测血清COMP水平及其他相关实验室指标。详细记录受试者的性别、年龄、病程、健康状况。

2 结 果

2.1一般资料 3组患者的性别、年龄等比较，差别无统计学意义(P>0.05)，活动组的BASDAI、脊柱痛VAS高于非活动组(P<0.05)，其他一般资料比较，差别无统计学意义(表1)。

2.2血清COMP及其他实验室指标比较 活动组和非活动组的COMP高于对照组(P<0.05)。活动组的CRP，ESR及GLB平均水平高于非活动组(P<0.05)，活动组与非活动组的PLT比较，差别无统计学意义(表2)。

2.3COMP与其他指标的相关性 血清COMP水平与BASDAI、脊柱痛VAS呈正相关(P<0.05)，与年龄、病程及CRP，ESR，PLT，GLB，CT等级无明显相关(表3)。

表1 3组患者的一般资料比较

2.412例AS活动期患者治疗前后COMP及实验室指标比较 治疗前COMP,CRP,ESR及GLB均高于治疗后(P<0.05)，但PLT及TNF-α治疗前后比较差别无统计学意义(表4)。

表2 3组患者血清COMP及其他实验室指标比较

表3 COMP与其他指标的相关性分析

表4 12例AS活动期患者治疗前后相关实验室指标比较

3 讨 论

AS的主要特征为中轴脊柱的炎症和新骨形成，骨形成和骨吸收并存，当这些过程中出现不平衡，则导致患者的骨侵蚀，且通常导致进行性、不可逆的结构损伤，从而造成残疾、功能受限以及生活质量的降低[4-5]，并带来巨大的经济负担。因此，评估AS患者对于了解患者病情、指导治疗、评估疗效有非常重要的意义。

COMP是软骨细胞外基质的重要结构和功能成分，在细胞增殖和凋亡以及软骨组织中细胞运动和附着的调控中起着一定的作用。关节损伤时，COMP以碎片的形式分泌，先进入滑膜液，然后进入血清。血清COMP水平在炎症的早期即可检测到，远早于X线关节退变和不可逆损害。将COMP作为软骨代谢生物标志物，可以很好地反映关节退行性炎症变化，有风险的患者和早期炎症的患者可以通过血清COMP评估得到有效的识别[6]。本研究对AS患者和健康体检者的血清COMP水平进行比较，结果显示活动组、非活动组血清COMP水平均高于对照组(P<0.05)，说明存在关节损害的患者血清COMP水平会升高。活动组血清COMP水平高于非活动组(P<0.05)，进一步说明疾病活动期有更高的血清COMP水平。非活动组AS患者血清COMP水平高于对照组(P<0.05)，说明即使在AS缓解期，软骨也在一定程度上存在持续性损伤。这与国内学者刘坚、马英淳等的研究结果相似[7]。Saghafi等的研究显示，COMP不仅在进展期RA患者中具有高水平，对晚期RA患者的诊断也具有较高的敏感性和特异性，COMP的产生与RA患者关节持续损伤有关[8]。黄阔的研究认为，COMP是软骨代谢标志物中唯一可持续表达，并可推测关节炎进程的最佳生物学标志物[9]。AS患者外周关节滑膜炎的病理改变在光镜下与RA患者的滑膜炎病理变化完全相同，仅在滑膜浸润的细胞数量上有微小差别[10]。推测COMP水平升高亦可作为AS患者炎症反应的指标，在一定程度上反应软骨损伤和疾病活动性。

CRP和ESR是两个经典的急性时相反应的炎症指标，可以反映机体的炎症状态。AS活动组患者血清CRP和ESR平均水平高于非活动组(P<0.05)，这与血清COMP水平在2组中的检测结果相似，可进一步支持COMP作为AS患者炎症指标和反应疾病活动的这一观点。活动组GLB水平高于非活动组，考虑与AS疾病活动时B淋巴细胞产生免疫球蛋白升高有关。GLB包括多种免疫球蛋白，而AS疾病活动时主要升高的是免疫球蛋白A(immunoglobulin A，IgA)[1]，因此，有待进一步分析AS患者的免疫球蛋白水平。

本研究的结果显示，血清COMP水平与BASDAI、脊柱痛VAS呈正相关(P<0.05)，这与有关脊柱关节炎(spondyloarthritis，SpA)患者血清COMP水平的研究结果相近[11]。BASDAI评分是临床上常用的一个AS疾病活动评分指标，血清COMP水平与BASDAI评分、脊柱痛VAS呈正相关，说明血清COMP浓度越高，AS患者急性炎症反应和疼痛越明显。本研究结果还显示，血清COMP水平与CRP及ESR无明显相关性(P<0.05)，而有学者对SpA患者的研究显示血清COMP水平与CRP及ESR呈正相关[12-14]。Sakthiswary等对61例RA患者的血清COMP水平研究显示，CRP和ESR与血清COMP水平无显著相关性[11]；一些研究也表明血清COMP水平与血清CRP及ESR或其他急性炎症指标没有相关性[12-14]。推测COMP似乎具有独立于炎症调节过程的致病机制。AS患者中有很大一部分CRP及ESR不升高或者仅轻微升高，CRP的基因位点多态性会影响其表达水平，从而影响其与AS病情活动度的相关性[15]；而且ESR也会受血浆白蛋白浓度、α-球蛋白以及红细胞的大小、形状和数量等多种因素的影响，因此对炎症反应的敏感性和特异性都不高[16]。虽然国内外对于血清COMP与CRP和ESR的相关性研究结果不一致，但是作为两种经典的全身炎症反应标志物，CRP和ESR在AS患者疾病活动性和疗效评价方面仍有非常重要的作用[17-21]。因此，结合血清COMP，CRP和ESR可以更好地评价AS患者的炎症反应、疾病活动性并指导治疗。

本研究还对12例活动期患者治疗前后的血清COMP水平及相关实验室指标进行了分析，结果显示，治疗后血清的COMP，CRP，ESR及GLB均较治疗前明显下降(P<0.05)，提示COMP可以作为AS患者疗效的参考指标。Skoumal等的研究证明，经激素治疗后RA患者血清的COMP水平及CRP明显下降，COMP可以作为监测RA患者治疗反应的标志物[22]。Crnkic等的研究显示，接受依那西普治疗的RA患者，治疗3月后血清COMP水平下降，治疗6月时血清COMP仍维持在低水平[13]。Morozzi等的研究得出，与基线水平较高的RA患者相比，血清COMP基线水平较低的患者有较高的ACR70反应率，而与全身性炎症的状态无关，并且得出结论，COMP似乎具有独立于调节炎症机制的致病作用[23]。结合12例AS活动期患者治疗前后血清COMP水平和学者们的研究结果，说明血清COMP水平可以作为监测AS治疗效果的参考指标，了解COMP水平有助于医师考虑继续观察或修改当前的治疗方案。本研究结果显示，治疗前后TNF-α水平无明显改变，考虑可能是样本量不足，同时也不排除检测方法所导致的误差可能。

本研究认为，血清COMP是一种新的可以反映AS患者炎症的血清学标志物，可在一定程度上反映软骨损伤和疾病活动性，结合血清CRP及ESR结果可以更好地评价AS患者的炎症反应、疾病活动性并指导治疗。由于样本量少，缺少外周关节影像学检查，本研究具有局限性，有待进一步扩大样本量，完善外周关节彩超、骨密度、TNF-α和免疫球蛋白资料，观察骶髂关节影像学的变化，进一步了解血清COMP在AS患者发病过程中的机制和临床意义。