迈瑞CAL 8000 血液分析流水线联合血涂片镜检在血常规检验中的应用价值

姚丽 李恭鹏 张恒丽 程珊 刘文文 李朋

血液分析仪具有准确性高、重复性好、检测速度快等优点，是现阶段国内各级医院临床实验室血常规检测的常用仪器，而由血液分析仪和自动制片染色机组成的全自动血液分析流水线也在临床检验工作中逐渐普及。在血常规检验中，血液分析仪有一定局限性，如不能反映细胞内部的微细变化、对细胞形态和结构不具备识别功能等，因此只能作为筛选试验［1］。目前尚无仪器能够代替显微镜血液形态学检查。由于筛选目的不同，2005年国际血液学专家组推荐的41 条全自动血细胞分析仪复检规则对不同仪器和不同实验室并无针对性和特异性，实际执行时发现复检率高，国内多个实验室均有报告［2-3］。为制定符合实验室自身特点的复检规则，许多学者都对此问题进行了深入的研究［4-7］。基层医院由于样本量大、镜检人员相对缺乏等原因，外周血涂片检查的重要性易被忽视，工作中存在血常规检验“零复检”的问题，导致漏诊、误诊的出现，尤其是白血病的漏检对患者造成的损失巨大。如何充分利用血液分析仪提供的结果和报警信息以及先进的流水线设备，结合基层医院服务人群的特点和实验室实际情况，在不过度增加检验工作强度的情况下，尽量在要求的样本周转时间（turn-around time，TAT）内为临床提供准确可靠的检验报告，是检验科面临的重要问题［8］。

1 材料与方法

1.1 样本来源 收集2017年3月本院门诊、住院患者及体检人员的3 775 份乙二胺四乙酸（EDTA）-K2抗凝全血标本用于本室复检规则的制定；另选同期1 080 份标本用于本室复检规则的验证。收集2017年4 — 9月本院门诊、住院患者及体检人员的样本，使用本室制定的复检规则进行检测。

1.2 伦理学 本研究符合医学伦理学标准，经本院伦理委员会批准（审批号：20200622），所有对患者的检测均获得过患者或家属的知情同意。

1.3 仪器与试剂 迈瑞CAL 8000 血液分析流水线包括BC-6800、BC-6900 2 台血细胞分析仪和1 台SC-1200 全自动制片染色机，质量控制（质控）品、校准品、试剂均为深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供；每日开机后进行室内质控，仪器均在控。Olympus 双筒显微镜用于血涂片显微镜检查。

1.4 检测方法

1.4.1 迈瑞CAL 8000 血液分析流水线的工作流程 BC-6800、BC-6900 血液分析仪进行标本检测时，结果由患者信息管理系统显示、储存和判断，仪器根据复检标准对相关标本通过SC-120 制片染色仪进行制片和染色。BC-6800、BC-6900 血细胞分析仪由厂家进行校准，每日开机后用2个浓度全血质控品进行严格的室内质控，保证结果的准确性和稳定性。

1.4.2 上机检测 用EDTA-K2抗凝真空管采集患者静脉血标本，2h 内上机测定，同时每份标本由SC-120 制片染色仪推片染色，由本实验室2 名有经验的中级及以上技术职称人员进行显微镜镜检。

1.4.3 观察内容及阳性标准［9］依据全国血液学复检专家小组释义的国际涂片镜检阳性规则进行镜检［10］，观察内容及阳性标准包括以下内容。

1.4.3.1 白细胞计数（white blood cell count，WBC）和血小板计数（platelet count，PLT） 通过涂片观察评估WBC、红细胞、PLT 与仪器分析结果的相关性。1.4.3.2 原始、幼稚细胞 此项为涂片观察的重要内容，原始、幼稚细胞比例≥1%。

1.4.3.3 白细胞分类计数和形态 早幼和中幼粒细胞比例≥1%，晚幼粒细胞比例＞2%,中毒颗粒或空泡变性的中性粒细胞比例＞10%，有Dohle 小体的粒细胞比例＞10%，异型淋巴细胞比例＞5%。

1.4.3.4 红细胞大小和形态 红细胞明显大小不一（同一视野直径相差1 倍以上），中心淡染区扩大（淡染区大于红细胞直径的1/2）的红细胞比例＞30%，畸形红细胞比例＞10%,可见有核红细胞。

1.4.3.5 血小板大小和形态 巨大血小板比例＞15%，出现血小板聚集。

1.4.3.6 其他异常 可见疟原虫、浆细胞等。

1.4.4 血涂片复检规则的制定及采取的措施 参考国际血液学专家组制定的自动血细胞计数和白细胞分类计数的41 条复检规则，根据主要针对问题及本院实际情况制定复检规则。见表1。

1.4.5 复检规则的验证 以镜检结果为“金标准”，对1 080份标本运用本室制定的复检规则进行分析，计算复检率、假阴性率。假阴性定义为未触及复检规则但镜检结果为阳性。

2 结果

2.1 复检规则有效性的实验结果验证 对1 080 份标本按照本室制定的复检规则进行复检，结果显示复检率为10.4%（112/1 080），假阴性率为3.9%（42/1 080），低于国际血液专家组确定的可接受阈值（5%），未发现白血病漏检。

表1 迈瑞CAL 8000 血液流水线复检标准

2.2 复检结果分析 对2017年4—9月本院门诊、住院患者的血液标本采用本室复检规则进行复检，经CAL 8000 血液分析流水线筛选出具有临床意义的异常结果共389例，其中红细胞大小、形态异常最多（128例，占32.90%），其次为中性粒细胞形态异常（68例，占17.48%）和可见早、中、晚幼粒细胞（52例，占13.37%），见表2。共检出血液病14例〔主要为急性粒细胞白血病、急性早幼粒细胞白血病、急性粒-单核细胞白血病、急性单核细胞白血病、慢性粒细胞白血病（chronic myelogenous leukemia，CML）、骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）〕，追踪到的病例均经骨髓穿刺细胞学检查确诊。

表2 389例复检标本染色镜检结果

3 讨论

显微镜检查不仅能补充仪器形态学鉴别能力的不足，而且可直观评估和验证血细胞分析仪结果的可靠性，是判断血细胞形态和病理变化的“金标准”。本研究结果显示，本实验室制定的血液复检标准可在不过大增加工作量的情况下，尽量避免白血病的漏检，在实际工作中较易完成。2017年4 — 9月，本室通过血涂片复检及时发现急性白血病6例，CML 1例，CML 转化为急性白血病1例，MDS 5例，MDS 转化为急性白血病1例，追踪到的病例均已确诊，患者得到及时治疗；通过红细胞呈缗钱状改变（外周血未发现浆细胞）怀疑多发性骨髓瘤1例，患者在转诊途中病危，到达上级医院后经抢救无效死亡；纠正血小板聚集导致的血小板假性减少24例，避免了误诊的发生。

综上所述，迈瑞CAL 8000 血液流水线可通过信息管理系统设置复检规则，对于符合复检规则的标本，由SC-120 自动推片染色机进行推片染色，且仅需8 min 可完全独立实现推片的标准化和自动化，提高工作效率。通过显微镜涂片复检不仅可以筛查白血病，还能检出血小板聚集引起的血小板假性减少，避免误诊；对于各种贫血可提示临床进行相关检查，查明贫血原因，及时对症治疗；显微镜复检还可区分病毒性感染和细菌性感染的病情程度。CAL 8000 血液流水线与血涂片复检联合应用可有效弥补两种检验方法的不足，提高工作效率和检验质量，为临床提供准确的检验报告。

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