清创生液体敷料抑菌活性的研究

马敏，杨朝雪，张春阳，侯法利，范建立

（河南承东生物科技有限公司，河南 郑州）

0 引言

清创生产品为本公司自主研发的一款针对表面创伤的液体敷料。创伤主要包括皮肤和黏膜创面损伤，常见的人体皮肤损伤有烧烫伤、急慢性溃疡、机械划伤、手术伤口等。清创生含有阳离子表面活性剂-奥替尼啶，已被多个欧洲国家批准作为皮肤、粘膜和伤口的抗菌剂，其不会对人体上皮和伤口组织产生不利影响[1]，使用起来更安全，扩大了清创生的应用范围，在口腔科、皮肤科、外科等多个科室均可使用。本研究对清创生的抑菌活性进行了研究，报告如下。

1 仪器与材料

1.1 仪器

FA2004 电子天平，上海津平设备仪器有限公司；XFH-30CA 电热式压力蒸汽灭菌锅，浙江新丰医疗器械有限公司；BCC-1100112-X 生物安全柜，济南鑫贝西生物技术有限公司；SHP-80 生化培养箱，北京中兴伟业仪器有限公司；XK96-A 快速混匀器，江苏新康医疗器械有限公司。

1.2 材料

胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）、沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA）均购自北京奥博星生物技术有限责任公司。

大 肠 埃 希 菌（Escherichia Coli）[CMCC（B）44102]、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus Aureus）[CMCC（B）26003]、白色念珠菌（Candida Albicans）[CMCC（F）98001] 来源于北纳创联生物技术有限公司；铜绿假单胞菌（Pseudomonas Seruginosa）[CMCC（B）10104]、枯 草 芽 孢 杆 菌（Bacillus Subtilis）[CMCC（B）63501]来源于上海鲁微科技有限公司。

2 方法

2.1 菌液的制备

取适量经34 ℃培养24 h 的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌培养物接入1 mL 0.9% 无菌NaCl 溶液（以下简称溶剂）中，用溶剂继续稀释100 倍，制成5105～4.5106 cfu/mL 的菌液，备用。

2.2 菌液与样品作用

取样品5 mL 和对照液（无菌水）5 mL 各5 瓶，取上述制备好的菌液，分别在每个样品和对照液中滴加100 μL，均匀混合，开始计时，作用20 min。

2.3 作用后菌液的稀释与涂布

将作用后的菌液用无菌水进行稀释，分别取稀释后的菌液0.25 mL，均匀涂布在TSA（大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌）或SDA（白色念珠菌）平板上。TSA 平板置于34 ℃培养2 d，SDA 平板置于25 ℃培养3 d，对菌落计数并计算抑菌率。

2.4 计算抑菌率

抑菌率为50%～90%，产品有抑菌作用；抑菌率≥90%，产品有较强的抑菌作用。

3 结果

表1 显示，清创生组与对照组相比较，清创生对大肠埃希菌的抑菌率＞99.9%，对金黄色葡萄球菌的抑菌率＞99.9%，对铜绿假单胞菌的抑菌率＞99.9%，对枯草芽孢杆菌的抑菌率＞99.9%，对白色念珠菌＞99.9%，说明清创生对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌均有较强的抑菌作用。

表1 清创生抑菌活性测试结果（n, %）

3 讨论

清创生通过在创面表面形成保护层，起物理屏障作用，对创面有直接的表面性作用。清创生含有一种新型的阳离子表面活性剂-奥替尼啶，是用于皮肤、粘膜和伤口的特殊净化剂。研究表明，奥替尼啶对细胞壁和细胞膜结构具有较强的吸附和相互作用，从而对G+菌、G-菌、衣原体、支原体和真菌均有较强的抗菌作用[2-5]。Assadian O 等在伤口护理杂志：奥替尼啶的生物学特性和临床功效中研究表明，奥替尼啶在pH 值1.6～12.2，分子结构稳定，抗菌效果不受伤口pH变化影响[6]。本研究结果表明清创生对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌均有较强的抑菌性活性。

综上所述，清创生具有广谱的抗菌活性，其作用机理：吸附微生物细胞过程中能够和细胞壁多糖结构及细胞膜的生物酶系统发生作用，从而导致细胞死亡。