羊伪狂犬病的诊治与防控

赵 琳，王庆云，邹秋萍

（安阳市动物疫病预防控制中心，河南 安阳455000）

伪狂犬病（PR）是由伪狂犬病病毒引起家畜和多种野生动物的一种急性传染病。PR 最早发生于1813 年美国的牛群，病牛极度瘙痒，最后死亡。因此该病也被称为“疯痒病”。瑞士于1849年首次采用“伪狂犬病”这一名词，这是因为病牛的临床诊断症状与狂犬病相似。1902年匈牙利学者Aujeszky证明由病毒引起，故命名为奥耶斯基病。目前，猪、牛及绵羊等动物的发病率逐年增加，山羊感染伪狂犬病比较少见。除猪以外的其他动物发病后通常具有发热、奇痒及脑脊髓炎等典型症状，均为致死性感染，给养殖户带来巨大的经济损失。病猪、带毒猪以及带毒鼠类为该病重要传染源，伪狂犬病毒对外界抵抗力较强，在污染的猪舍能存活1个多月。2020年3月，安阳市某养殖户饲养的158只山羊中有4只山羊发病，均为母羊，且有3只处于怀孕期间，其中已有2 只先后死亡，潜伏期短，病程短，病死率高，疑似为山羊伪狂犬病。

1 临床诊断

1.1 临床症状

该养殖户饲养波尔山羊共158只，当日，有4只母山羊发病，且有3 只处于怀孕期间；发病羊体温升高至42 ℃，头部摇晃，食欲减退，神志不清，出现磨牙等神经症状，头颈、尾部因奇痒出现蹭墙，撕咬，呈犬坐姿势使劲在地上摩擦，奇痒部位因强烈搔痒而引发脱毛、水肿，轻微出血；后期，羊只站立不安，最终卧地不起。次日，2只发病母羊先后死亡，死前口吐白沫。

1.2 病理剖检

剖检病死羊，可见心内外膜出血，心耳大理石花纹，心脏瓣膜出血，冠状沟明显出血，心肌坏死，心包积液；胸腔外膜出血；肺出血坏死，片状水肿；肝脏点状坏死灶；小肠轻度胀气；肾斑状出血，片状出血，水肿；肠系膜淋巴出血；脾脏水肿，肌肉水肿。组织变化可见中枢神经系统呈弥漫性非化脓性脑膜炎和神经节炎，出现明显胶质细胞坏死，病变部位周围细胞可见与神经细胞一样的核内包涵体。

2 实验室诊断

2.1 细菌学检查

在无菌条件下采集病羊脑、肝、脾、肾等组织样品涂片进行革兰氏染色然后镜检，并接种营养肉汤蛋白胨培养基、血平板培养基在37℃条件下进行有氧和厌氧两种方式培养，48 h后观察结果，均未发现病原菌。

2.2 血清学检测

对发病羊只进行采血，获得全血后，于37℃培养箱静置2 h，再放置4℃冰箱过夜，次日2 500 r/min 离心5 min，取上清备用。采用伪狂犬病病毒gE抗体检测试剂盒对采集血清进行抗体检测，结果样品为PRV gE抗体阳性。gE抗体的存在表明猪曾感染PRV 的野毒株和/或接种过含gpI抗原的疫苗。而此养殖户未给饲养羊只接种过伪狂犬疫苗，从而判断受检羊只为PRV野毒株感染羊只。

表1 伪狂犬gE抗体检测结果

2.3 分子病原学检测

采集病羊扁桃体、淋巴结等组织病变部与健康部交界处组织，共3份组织，每份组织分别从3个不同位置剪取样品1 g左右，放入2 ml离心管内，加入研磨专用不锈钢珠2粒，生理盐水1.5 ml，放入自动研磨仪进行研磨，1 min后取出，放入4℃高速冷冻离心机8 000 r/min 离心2 min，取上清备用。采用核酸提取试剂盒对样本进行处理后放入核酸自动提取仪进行核酸提取，提取物按试剂盒方法处理后置于荧光定量PCR 仪反应槽内进行扩增。结果显示3 份样品均为伪狂犬核酸阳性。

表2 伪狂犬病毒核酸荧光定量PCR检测结果

3 防控

将发病羊只全部扑杀，病死羊只全部焚烧进行无害化处理，其余羊只隔离圈养，密切观察。

用1%～2%氢氧化钠、10%～20%生石灰对羊舍及周边环境进行全方位喷洒消毒，水槽等用具及饲料也进行相应消毒。

对暂无症状的羊只使用猪伪狂犬双基因缺失疫苗按照2头份/只进行伪狂犬疫苗紧急接种，电解多维饮水，提高羊只免疫力。羊群在免疫1 w 内禁用其他抗病毒和激素类药物，确保疫苗抗体的有效产生。

4 讨论

该养殖户的山羊和猪混养，其饲养的猪只和山羊均未免疫过伪狂犬疫苗，猪只也未见发病，分析其原因，该养殖户饲养的山羊可能被携带病毒却未发病的猪只、老鼠或其排泄物经多种途径感染而发病。猪只对该病毒具有一定的抵抗力，部分猪只感染后隐性带毒成为重要的传染源，建议山羊与猪分别饲养，猪只和山羊同时做好伪狂犬疫苗的接种，山羊饲料要定期检查，避免病毒污染。

此次发病山羊的病原学检测使用全自动核酸提取仪和普通荧光定量PCR仪，仪器操作时间为2.5 h，快速地诊断了发病病种，如果使用快速荧光定量PCR仪，1 h内就可读取试验结果。近年来，荧光定量PCR技术已非常成熟，各县区动物疫病防控机构都已经配备荧光定量PCR 仪，相比传统的PCR，荧光定量PCR 灵敏性特异性有了显著提高，并且速度快、安全无污染。这使得我们在较短时间内可以安全准确地确定动物发病原因，快速高效地分析病毒在动物体内的增殖情况。荧光定量PCR技术是较为推荐的病原学检测手段。

养殖场户可定期对饲养羊只进行抗体水平检测，确保羊只免疫具有较高的保护力。采集羊血清，首先使用伪狂犬病毒gE 抗体检测试剂盒进行检测，如果伪狂犬病毒gE 抗体阳性，则说明羊只遭受野毒感染，可予以淘汰；如果伪狂犬病毒gE 抗体阴性，则使用伪狂犬病毒gB抗体检测试剂盒进行检测，如若使用IDEXX 伪狂犬病毒gB 抗体检测试剂盒，检测值小于等于0.6，则证明羊只体内产生了疫苗免疫抗体，但通过长期试验证明，当gB 抗体检测值小于等于0.2 时，疫苗免疫保护力较高，建议gB抗体检测值大于0.2时，对饲养羊只及时进行补免。