腋淋巴结阴性乳腺癌患者中采取定量病理技术对预后效果的影响

谭翠松，侯昕

（吉化总医院 病理科，吉林 吉林 132021）

0 引言

乳腺癌是发生在腺上皮的恶性肿瘤疾病，属于女性常见肿瘤病症，50-54岁是女性高发年龄段，严重影响患者的身心健康。目前医学界就乳腺癌的发病机制尚未达成统一共识，患者发病与家族乳腺癌病史、晚婚晚育、基因突变等因素关联密切。乳腺癌患者早期无典型体征及症状，随着病情的发展，常规体检时可见乳腺肿块、乳头溢液、腋窝淋巴结肿、乳腺皮肤变化等，可利用超声、磁共振检查、乳腺X线鉴别病例[1]。临床中约有1/3的乳腺癌患者伴发腋窝转移情况，初期主要表现为同侧腋窝淋巴结肿大，随着病情的进展，肿大淋巴结会逐渐与周围组织融合、粘连和固定，部分晚期病例可转移到对侧和锁骨上淋巴结，严重威胁患者的生命安全。因此早期筛查存在转移危险性患者，及时对症处理，是改善预后的关键环节[2]。为了探讨评估腋淋巴结阴性乳腺癌患者预后的可靠手段，本文就腋淋巴结阴性乳腺癌患者中采取定量病理技术对预后效果的影响展开了如下研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料。选取2012年6月至2014年6月医院收治的腋淋巴结阴性乳腺癌患者93例。根据术后5年随访结果将其分为对照组（无复发转移，n=76）和观察组（复发转移，n=17）。对照组患者年龄29-67岁，平均（45.21±5.19）岁。观察组患者年龄27-65岁，平均（45.28±5.26）岁。上述数据对比同质性优良。纳入标准：①组织活检证实为腋淋巴结阴性乳腺癌；②TNM分期Ⅰ-Ⅱ[3]；③肿瘤直径＜3 cm，均行手术治疗。排除标准：①手术禁忌症；②合并其他肿瘤；③心血管严重疾病；④精神异常。

1.2 方法。使用苏木精-伊红染色法处理全部参与研究患者的病理切片，使用Feulgen染色法在放大400倍后行核细胞检测，随机选取无重叠肿瘤细胞（100-200个）与淋巴细胞（＞50个），测定细胞形态结构参数，包括核最大直径、最小直径、核面积、核周长和核形状因子；DNA指数（DI）计算方式如下，记录平均积分吸光度A值，肿瘤细胞核DNA A值与淋巴细胞核DNA A值的比值即为DI[4]。

1.3 观察指标。①结合定量病理技术检验结果，比较两组的细胞核形态定量分析结果和DI。②利用logistic回归法完成多因素分析。

1.4 统计学分析。用SPSS 23.0处理数据，以χ2检验定性资料（%、n），以t检验定量资料（±s）；多因素分析运用Logistic回归法，P＜0.05，提示有差异。

2 结果

2.1 两组的细胞核形态定量参数与DI对比。两组患者在形状因子方面比较无明显差异（P＞0.05），两组患者在核最小直径、核最大直径、核周长、核面积、DI方面比较比较存在明显差异（P＜0.05），详见表1。

表1 两组的细胞核形态定量参数与DI对比（±s）

表1 两组的细胞核形态定量参数与DI对比（±s）

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2.2 多因素分析。经过多因素分析可知，预后因素的标准误差、回归系数（β）、P值分别如下，核最小直径：0.083、0.237、0.008；核最大直径：0.084、0.176、0.035；核周长：0.036、0.068、0.046；核面积：0.004、0.013、0.030；DI：0.094、0.253、0.009。由此可知，核最小直径、核最大直径、核周长、核面积、DI是影响乳腺癌患者预后的独立性危险因素（P＜0.05）。

3 讨论

近年来，随着国民生活方式的转变和生活节奏的加快，国内乳腺癌发病率呈不断上升趋势，乳腺癌的临床诊疗已成为医学领域关注的重点问题。大多数乳腺癌患者在确诊时已出现区域淋巴结转移，贻误了最佳治疗时机，增加了治疗难度，预后较差，病死率约为50%。早期检出乳腺癌病例，患者经过治疗后的远期治愈率达到了90%以上，因此早期准确判断患者病情对预后产生着深远的影响[5-6]。临床中腋淋巴结阴性乳腺癌患者的检出率较低，容易延误患者病情，加剧了患者复发风险，影响预后。传统的手术病理组织检查作为诊断乳腺癌的金标准，尽管准确性较好，但属于有创检查，限制了临床的应用和推广。因此有必要探讨评估腋淋巴结阴性乳腺癌预后的有效路径。

随着医学影像技术的不断发展，超声、CT、MRI等影像学检查手段在乳腺癌疾病的诊断中得到了逐步应用和推广，但准确率较低，尤其是对于未发生癌细胞转移的病例，容易出现漏诊情况，延误患者治疗时间。临床中肿瘤细胞核形态变化可反映细胞分化程度，而核异质性是导致局部复发的重要因素，采用行之有效的方法对形态变化进行定性、量化分析，可描述核异型特征，为医师诊疗患者病况、评估预后提供参考依据。李斌等[7]研究发现的，定量病理技术可通过多方式观察生物微观形态、宏观组织，获取细胞核核周长、面积等细胞核具体参数形态，而肿瘤细胞核形态与肿瘤细胞分化程度关联密切，根据肿瘤细胞核形态可为医师判断肿瘤细胞有无转移，评估预后提供参照。

经本文研究发现，复发转移患者的肿瘤细胞核最小直径、核周长、核最大直径、DI、核面积均低于无复发转移患者，形状因子对比未见显著性差异，提示单独根据形状因子无法反映患者细胞核形态变化，而复发转移患者和无复发转移患者的肿瘤细胞核形态、DI存在明显差异，以此为依据可对预后进行判断。分析后可知，癌细胞通过不停地翻译、转录等过程，复制自身DNA，达到增殖效果，引发细胞转移，因此细胞核DNA含量显著上升是恶性肿瘤细胞具有的特征之一，可作为评估乳腺癌预后的重要参照指标。本文中复发转移患者的DI远高于无复发转移患者，证实了这一观点。临床中利用定量病理学技术可获取肿瘤细胞生物组织微管形态数据，从量化角度分析发病机制、病变形态特征。樊宁[8]对77例腋淋巴结阴性乳腺癌患者研究后发现，采用定量病理技术能够获取较为客观肿瘤生物特性信息，结合检验结果可知复发转移患者的肿瘤细胞核最小直径、最大直径、核周长、核面积、DI高于无复发转移患者，提示定量病理技术可用于评估腋淋巴结阴性乳腺癌预后，是一种可靠的方法。本文研究证实，DI、核面积、核周长、核最大直径、最小直径是影响乳腺癌患者预后的危险因素，说明定量病理技术是一种评估腋淋巴结阴性乳腺癌预后的有效定量方法。研究后发现，细胞的分化程度、生物学行为与肿瘤的细胞核关系紧密，而细胞核的核异质性是引起肿瘤局部复发的重要原因。因此通过定性描述、图像等能够分析和了解乳腺癌细胞核的特征、形态，为临床诊断患者病情提供参照。本文采用的定量病理技术可保留细胞核完整的组织形态，获得生物宏观组织的形态变化特征，掌握核直径、核面积等形态参数，并通过宏观图像或微观数据量化病因，同时结合常规病理检查结果，同步进行定量检验和形态观察，具有操作简单、可重复操作的特点，在肿瘤病理研究中适用性广泛。且采取定量病理技术可客观反映肿瘤细胞完整细胞核中的DNA含量，获取肿瘤生物学特性信息，根据细胞核形态判断有无肿瘤细胞转移，并结合核异质性变化评估预后。

综上所述，本文对93例腋淋巴结阴性乳腺癌患者进行了定量病理技术检测，通过观察肿瘤细胞核微观形态，发现DI、核面积、核最小直径、核最大直径、核周长等参数是影响乳腺癌预后的独立危险因素，可作为评估腋淋巴结阴性乳腺癌患者预后的有效方法，具有重要的临床应用价值。