1-脱氧野尻霉素对肥胖小鼠甲状腺激素稳态的影响

李思远，宁俊丽，丁晓雯，黄先智

（1.西南大学食品科学学院，重庆 400716；2.西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400716）

肥胖是一种主要由长期能量摄入与消耗失衡而导致的全球性慢性疾病，影响机体的糖、脂代谢及激素代谢等诸多代谢系统，是癌症、高血压、2型糖尿病、心血管疾病[1-3]的主要风险因素，已被世界卫生组织认定为影响人类健康的五大危险因素之一[4]。

甲状腺激素（thyroid hormones，THs）作为一种内分泌激素，能够促进脂肪酸氧化，促进胆固醇逆转运至肝细胞，进一步转化为胆汁酸外排，在调节脂代谢及能量平衡等方面具有重要意义[5]。THs主要包含甲状腺素（thyroxine，T4）和三碘甲状腺原氨酸（triiodothyronine，T3）两种。甲状腺合成及释放的THs大部分为T4，只有少部分为T3，其中T4为THs的主要存在形式，通常被认为是激素前体，而T3活性是T4的5 倍，是THs的主要活性形式，主要来源于肝脏等组织中I型脱碘酶（type 1 deiodinase，DIO1）使T4脱碘生成[6]。血液中的THs以结合态和游离态形式保持动态平衡，只有游离态THs能够进入靶细胞与甲状腺激素受体（thyroid receptor，TR）结合发挥生理作用[7]。

目前，已有大量研究报道了在肥胖条件下THs水平及其代谢的变化，Shen Huiting等[8]认为，相比正常小鼠，肥胖小鼠总甲状腺素（total T4，TT4）水平显著下降，游离甲状腺素（free T4，FT4）水平显著上升，总三碘甲状腺原氨酸（total T3，TT3）及游离三碘甲状腺原氨酸（free T3，FT3）水平无明显变化；Cheserek等[9]研究发现肥胖小鼠相比正常小鼠，TT4水平显著增加，TT3水平显著降低，FT4及FT3水平无明显变化，同时DIO1mRNA表达下调；另有研究表明肥胖小鼠TT4、TT3水平均显著下降，肝脏DIO1mRNA及TRβmRNA表达显著下调[10]。尽管关于肥胖个体THs水平的变化没有一致的结论，但可以确定的是肥胖导致调节THs合成及释放的下丘脑-垂体-甲状腺轴（hypothalamic-pituitary-thyroid axis，HPT）功能紊乱[11]、THs功能异常、机体能量代谢失衡进一步加剧。由于THs特别是T3能够促进能量消耗，许多学者曾利用T3治疗肥胖，但最终因其对心血管存在负面效应而放弃[12]，因此，寻找对肥胖患者甲状腺功能具有一定改善作用但毒副作用小的天然食品功能成分，对于肥胖的改善甚至治疗具有重要意义。

1-脱氧野尻霉素（1-deoxynojirimycin，DNJ）是一种主要从植物桑中分离得到的哌啶生物碱，其降糖、降脂、抗肿瘤、抗病毒等生理活性已被科学实验证明[13-15]。在脂代谢方面，目前发现DNJ降脂机理主要为调节脂代谢相关酶活性，抑制脂肪酸合成，促进脂肪酸β氧化[16]，但对肥胖个体THs稳态的影响鲜有研究报道。本实验以高脂膳食诱导的肥胖小鼠为模型，研究肥胖对THs稳态的影响以及DNJ的干预作用，探究DNJ改善肥胖的新途径。

1 材料与方法

1.1 动物、材料与试剂

140 只4 周龄清洁级昆明种小鼠（雌雄各半），生产许可证号：SCXK（渝）2018-003，购于重庆恩斯维尔生物科技有限公司。

基础饲料 重庆恩斯维尔生物科技有限公司；高脂饲料[17-18]由实验室自行配制：含基础饲料78.8%（质量分数，下同）、猪油10%、蛋黄粉10%、胆固醇1%、胆酸钠0.2%。

DNJ（纯度≥98%） 南京道斯夫生物技术有限公司；总甘油三酯（total triglyceride，TG）试剂盒、总胆固醇（total cholesterol，TC）测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）试剂盒、BCA法总蛋白测定试剂盒南京建成生物工程研究所有限公司；极低密度脂蛋白胆固醇（very low-density lipoprotein cholesterol，VLDL-C）酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒、促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）ELISA试剂盒 厦门慧嘉生物技术公司；TT4 ELISA试剂盒、TT3 ELISA试剂盒、DIO1活力测定试剂盒、DIO1含量测定ELISA试剂盒、TRβ含量ELISA试剂盒 上海优选生物技术有限公司提供；总RNA提取试剂盒 北京百泰克生物技术公司；反转录试剂盒及荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）SYBR Green染料试剂盒 上海翊圣生物科技公司。

1.2 仪器与设备

5810R型台式冷冻高速离心机 德国Eppendorf公司；EPOCH2型全波长酶标仪 美国基因公司；QTOWER 3G实时荧光定量PCR仪 德国耶拿分析仪器公司；FM200型匀浆机 上海弗鲁克公司。

1.3 方法

1.3.1 DNJ灌胃液的配制

根据实验室前期的研究结果[16]，将DNJ用生理盐水溶解，配制成质量浓度分别为0.2、0.4、0.8 mg/mL的DNJ溶液，4 ℃保存备用。

1.3.2 肥胖小鼠模型的建立

140 只4 周龄昆明小鼠（雌雄各半）适应性喂养1 周后，随机挑选20 只（雌雄各10 只）作为对照组，继续饲喂基础饲料，其余120 只作为造模组饲喂高脂饲料6 周，根据下式计算肥胖度。肥胖度大于20%时认为造模成功[19]。

1.3.3 动物分组及饲养

随机选择造模成功的肥胖小鼠80 只（雌雄各半）分为4 组（每组20 只，雌雄各半），分别为肥胖对照组和DNJ高、中、低剂量组，继续饲喂高脂饲料。以1.3.2 节中的对照组作为正常对照组继续饲喂基础饲料。DNJ高、中、低剂量组分别以8.0、4.0、2.0 mg/（kgmb·d）剂量灌胃DNJ，正常对照组与肥胖对照组以生理盐水灌胃，持续灌胃45 d。实验期间小鼠自由摄食饮水，每5 d称1 次体质量。控制室温（22±2）℃、相对湿度（50±15）%，12 h轮换照明。

1.3.4 样本采集及指标测定

各组小鼠灌胃45 d，禁食不禁水12 h，称体质量后眼球取血于真空采血管中，室温放置1 h后，于4 ℃、3 000 r/min离心10 min分离血清[20]，于-80 ℃保存备用。血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平采用比色法测定，VLDL-C、TT3、TT4、TSH水平采用ELISA法测定，严格按照试剂盒说明书操作。

取肝脏称质量后迅速于预冷生理盐水中漂洗，称取部分肝脏，按1∶9（m/V）加入磷酸盐缓冲液（pH 7.4）于冰上进行匀浆，4 ℃ 3 000 r/min离心15 min，取上清液得10%肝匀浆，-80 ℃保存备用。按照试剂盒说明书的方法测定肝脏组织总蛋白、DIO1活力、DIO1及TRβ蛋白含量。

1.3.5 肝脏总RNA提取及反转录

按照试剂盒方法提取肝组织R N A ， 测定260 nm/280 nm吸光度比值检测其纯度，并通过电泳观察条带检测其质量，之后按照试剂盒方法反转录为cDNA。

1.3.6 实时荧光定量PCR

反应体系按照SYBR Green染料说明书操作配制，扩增程序：预变性95 ℃，5 min；变性95 ℃，10 s，退火55～60 ℃，20 s，延伸72 ℃，20 s，40 个循环。扩增结束后根据熔解曲线评估引物特异性，根据扩增Ct值计算2-△△Ct得到mRNA相对表达量。引物序列见表1。

表 1 实时荧光定量PCR引物序列Table 1 Primer sequences used for quantitative real-time PCR

1.4 数据统计分析

2 结果与分析

2.1 DNJ对肥胖小鼠体质量的影响

体质量的过度增长是肥胖的一个重要表现，控制体质量在正常范围内能够有效控制肥胖及肥胖相关疾病对健康的危害[21-22]。

图 1 DNJ对肥胖小鼠体质量的影响（n ＝10）Fig. 1 Effect of DNJ on body mass in obese mice (n = 10)

由图1可知，肥胖对照组与DNJ各剂量组雌、雄小鼠的体质量在灌胃前（第0天）无显著差异（P＞0.05）且均显著高出正常对照组体质量20%以上（P＜0.05），表明肥胖模型造模成功。随着灌胃进行，从灌胃第30天起至灌胃结束高剂量组雌鼠体质量与肥胖对照组体质量差异显著（P＜0.05），中、低剂量组雌鼠体质量从第35天起至灌胃结束显著低于肥胖对照组（P＜0.05）；对于雄鼠，DNJ高、中、低剂量组体质量分别在灌胃第25、40天及第30天与肥胖对照组体质量出现显著差异（P＜0.05）且差异持续至灌胃结束。整个灌胃阶段，肥胖对照组与DNJ各剂量组雌、雄鼠体质量均显著高于正常对照组（P＜0.05）。表明在实验剂量范围的DNJ能够抑制高脂饮食引起的肥胖小鼠体质量增加，维持体质量稳定，但在实验的时间范围内并不能使之恢复到正常水平。

2.2 DNJ对肥胖小鼠血脂水平的影响

表 2 DNJ对肥胖小鼠血脂水平的影响（n＝10）Table 2 Effect of DNJ on blood lipids in obese mice (n= 10)

肥胖通常伴有血脂水平的异常，这些异常与动脉粥样硬化等心血管疾病的发生密切相关[23-25]。由表2可知，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠TC、TG水平均显著上升（P＜0.05），表明长期高脂饮食会引起高血脂。与肥胖对照组相比，经过45 d的DNJ干预，中、高剂量组雌鼠TC水平分别下降14.63%、16.77%（P＜0.05），雄鼠中只有高剂量组TC水平下降15.44%（P＜0.05）；低、中、高剂量组雌鼠TG水平相比肥胖对照组分别下降8.45%、13.29%、28.23%（P＜0.05），中、高剂量组雄鼠TG水平分别下降14.20%、40.35%（P＜0.05）。DNJ所有剂量组小鼠TC、TG水平仍显著高于正常对照组（P＜0.05）。以上结果表明，用实验剂量的DNJ干预45 d，能够改善高脂饮食引起的TC、TG水平升高，但并不能使之恢复到正常水平。

HDL-C在胆固醇逆转运途径中发挥重要作用，可将胆固醇由肝外组织逆转运至肝脏进行代谢，防止过多的胆固醇沉积在血管壁上，起到防止动脉粥样硬化的作用，而LDL-C则是心血管疾病的主要风险因素之一，降低其水平能有效降低心血管疾病发病率[24]，VLDL-C除了携带胆固醇外还富含甘油三酯，其水平上升可能导致机体胰岛素抵抗及动脉粥样硬化[25]。

由表2可知，与正常对照组相比，雌、雄鼠肥胖对照组的HDL-C水平均显著下降（P＜0.05），LDL-C及VLDL-C水平均显著上升（P＜0.05），表明长期的高脂饮食会引起血清中脂蛋白水平异常。DNJ干预后，中剂量组雌、雄鼠和高剂量组雌、雄鼠HDL-C水平相比肥胖对照组分别上升30.21%、58.75%（P＜0.05）和31.20%、42.80%（P＜0.05）；低、中、高剂量的DNJ使雌、雄鼠LDL-C分别下降19.30%、26.40%、30.86%（P＜0.05）和8.90%、11.89%、33.33%（P＜0.05）；中剂量组雌、雄鼠和高剂量组雌、雄鼠VLDL-C水平相比肥胖对照组分别下降22.16%、31.01%（P＜0.05）和20.93%、41.18%（P＜0.05）。表明实验剂量DNJ干预45 d，肥胖小鼠HDL-C、LDL-C和VLDL-C水平有所改善。

综上，长期的高脂饮食使小鼠血脂水平异常，经过实验剂量的DNJ干预45 d，实验小鼠血脂水平有不同程度的改善，表明DNJ能够促进机体脂代谢使血脂水平降低。

2.3 DNJ对肥胖小鼠THs功能的影响

THs能够促进脂肪酸氧化，降低机体脂肪积蓄及体质量，在调节脂代谢方面发挥着重要作用。肥胖个体中THs的合成及代谢紊乱，因此改善这一紊乱状态对于肥胖的缓解甚至治疗具有重要意义[27]。

2.3.1 DNJ对肥胖小鼠TT4、TT3质量浓度的影响

图 2 DNJ对肥胖小鼠TT4及TT3质量浓度的影响（n ＝10）Fig. 2 Effect of DNJ on TT4 and TT3 contents in obese mice (n = 10)

由图2A可知，肥胖对照组雌、雄小鼠的TT4水平与正常组比较均无显著差异（P＞0.05）。与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ使雌、雄鼠TT4水平分别上升12.72%、16.14%、22.03%（P＜0.05）和11.95%、12.42%、15.99%（P＜0.05），均显著高于正常对照组（P＜0.05）。

如图2B所示，肥胖对照组雌、雄鼠TT3水平相比正常对照组显著下降（P＜0.05）；各剂量的DNJ干预45 d后，雌鼠TT3水平相比肥胖对照组分别升高45.89%、60.22%、66.86%（P＜0.05），其中低剂量组恢复至正常水平（P＞0.05），中、高剂量组显著高于正常对照水平（P＜0.05）；低、中、高剂量组雄鼠TT3水平较肥胖对照组分别升高16.21%、40.06%、47.79%（P＜0.05），但均未恢复至正常水平（P＜0.05）。

2.3.2 DNJ对肥胖小鼠TSH水平的影响

甲状腺细胞与TSH结合后分泌THs，因此TSH对于维持机体THs水平的相对稳定极为重要，其微小变动都将影响THs的分泌与合成。

图 3 DNJ对肥胖小鼠TSH水平的影响Fig. 3 Effect of DNJ on TSH in obese mice

如图3所示，与正常对照组相比，肥胖对照组雌、雄鼠TSH水平均显著上升（P＜0.05）；相比肥胖对照组，低、中、高剂量的DNJ能够使雌、雄鼠TSH水平分别降低7.15%、6.34%、9.65%（P＜0.05）和5.75%、8.91%、9.73%（P＜0.05）；所有DNJ剂量组的TSH水平仍显著高于正常对照组（P＜0.05）。

2.3.3 DNJ对肥胖小鼠TT3/TT4比值和肝脏DIO1的影响

TT3/TT4比值可反映DIO1对T4的脱碘能力[9]，DIO1主要在肝脏、肾脏、甲状腺和垂体表达，对于T4向T3的转化起到十分重要的作用[29]。

图 4 DNJ对肥胖小鼠TT3/TT4及肝脏DIO1活力、含量、mRNA相对表达量的影响Fig. 4 Effect of DNJ on TT3/TT4 ratio and liver DIO1 activity, protein level, and mRNA expression in obese mice

由图4A可知，肥胖对照组TT3/TT4相比正常对照组显著下降，暗示肥胖可能影响到DIO1的脱碘能力，与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ使雌鼠TT3/TT4显著上升（P＜0.05），且恢复至正常水平（P＞0.05），雄鼠中只有中、高剂量组TT3/TT4显著上升（P＜0.05），但未恢复至正常水平（P＜0.05）。表明DNJ可能对DIO1的脱碘能力具有一定改善作用。

为了进一步研究这种改善作用，对肝脏DIO1活力、蛋白水平及mRNA相对表达进行测定，DIO1活力测定结果如图4B所示。相比正常对照组，肥胖对照组DIO1活力均显著下降（P＜0.05）。相比肥胖对照组，中、高剂量的DNJ能够使雌鼠、雄鼠肝脏DIO1活力分别上升39.04%、40.99%（P＜0.05）和26.29%、24.40%（P＜0.05），但未恢复至正常水平（P＜0.05）。表明DNJ能够改善肥胖引起的肝脏DIO1活性下降。

肝脏DIO1含量及DIO1mRNA相对表达测定结果分别如图4C、D所示。肥胖对照组肝脏DIO1含量显著低于正常对照组（P＜0.05），经过中、高剂量的DNJ干预后，雌、雄鼠肝脏DIO1含量相比肥胖对照组分别上升27.09%、35.68%（P＜0.05）和20.69%、29.50%（P＜0.05），并且恢复至正常组水平（P＞0.05）；肥胖对照组肝脏DIO1mRNA相对表达量相比正常对照组显著下调（P＜0.05），经过DNJ干预后，相比肥胖对照组，除了低剂量组雄鼠mRNA相对表达量无显著变化外（P＞0.05），其余各DNJ剂量组mRNA相对表达量均显著上调（P＜0.05）。表明DNJ可上调肝脏DIO1mRNA表达，促进肝脏DIO1蛋白合成。

2.3.4 DNJ对肥胖小鼠肝脏TRβ含量的影响

肝脏是THs的主要靶器官之一，THs（主要是T3）进入靶细胞后通过与TR结合发挥其生理作用，TR有2 种亚型，其中TRβ亚型主要在肝脏中表达[30]。

图 5 DNJ对肥胖小鼠肝脏TRβ含量及其mRNA表达水平的影响Fig. 5 Effect of DNJ on TRβ content and mRNA expression levels in liver of obese mice

如图5 所示，肥胖对照组雌、雄鼠肝脏T R β 含量及T R βm R N A 相对表达量显著低于正常对照组（P＜0.05），DNJ干预后，相比肥胖对照组，雌鼠中、高剂量组TRβ含量显著上升27.45%、37.53%（P＜0.05），各DNJ剂量组TRβmRNA相对表达量均显著上调；低、中、高剂量的DNJ使雄鼠TRβ含量分别上升21.97%、20.51%、27.81%（P＜0.05），中、高剂量组TRβmRNA相对表达量相比肥胖对照组显著上调（P＜0.05）。表明DNJ能够促进肥胖小鼠肝脏TRβ蛋白表达。

2.3.5 DNJ对肥胖小鼠T3应答脂代谢基因的影响

THs与TR结合后调控相关靶基因的转录，由于T3被认为是THs的主要活性形式，因此这些靶基因通常称为T3应答基因，已有研究表明脂肪甘油三酯脂酶（adipose triglyceride lipase，ATGL）、肉毒碱棕榈酰转移酶1α（carnitine palmitoyltransferase 1α，CPT1α）、胆固醇7α-羟化酶（cholesterol 7 alpha-hydroxylase，CYP7A1）等脂代谢酶mRNA的转录表达受到T3的调控[31]。

图 6 DNJ对肥胖小鼠肝脏ATGL、CPT1α、CYP7A1 mRNA表达的影响Fig. 6 Effect of DNJ on ATGL, CPT1α and CYP7A1 mRNA expression in liver tissues of obese mice

由图6 可知，肥胖对照组中AT G L、C P T 1 α、CYP7A1mRNA相对表达量相比正常对照组显著下调（P＜0.05），与肥胖对照组相比，低、中、高剂量的DNJ干预均能使雌、雄鼠的ATGL、CPT1α、CYP7A1mRNA表达显著上调（P＜0.05）。

3 讨 论

肥胖是一种能量失衡导致的慢性疾病，同时也是心血管疾病、2型糖尿病、癌症等疾病的主要风险因素[21]。已有大量研究证实了DNJ在促进脂代谢、缓解肥胖方面的作用，如Tsuduki等[32]以高脂饲料饲喂大鼠同时以1 mg/kgmb剂量DNJ灌胃4 周，结果表明DNJ能够通过激活脂肪酸β氧化促进脂代谢，降低机体脂肪积蓄。李有贵等[31]以50 mg/kgmb剂量桑叶DNJ灌胃高脂血症模型小鼠90 d，结果表明小鼠血清TC、TG水平逐渐恢复至正常水平。在本实验所用DNJ剂量范围与实验周期内，TC、TG水平虽然有所改善但未恢复至正常水平，可能与灌胃剂量及实验时间长短不同有关。

图 7 DNJ对肥胖小鼠甲状腺激素的影响示意图[34]Fig. 7 Schematic representation of the effect of DNJ on thyroid hormones in obese mice[34]

图7为DNJ对THs的影响示意图[34]，总结了DNJ对肥胖小鼠的作用机制。THs的合成与释放受到HPT的反馈调节，当THs能够满足机体需要时，通过降低TSH分泌以减少THs合成，当THs不足时则通过增加TSH分泌促进THs合成释放[35]。在本研究中，雌、雄肥胖对照组TSH水平显著升高，表明肥胖个体对THs的需求增加，希望通过增加TSH水平以促进THs合成释放，达到促进脂代谢的目的，但与此相矛盾的是肥胖对照组TT4水平无显著变化，可能是长期的高脂饮食使小鼠对TSH的应答能力受到影响，甲状腺无法正常合成及释放T4[36]，DNJ干预后，机体部分恢复对TSH的应答能力，TT4水平也相应上升。T3是THs的主要活性形式，与TR结合的能力相比T4更强，然而甲状腺合成分泌的T3仅占血液循坏T3的20%，大部分T3由脱碘酶使T4脱碘产生，脱碘酶有3 种亚型，其中DIO1主要在肝脏、肾脏等组织表达，决定循环T3的浓度[37-38]。本研究中，TT3/TT4相比肥胖对照组显著下降，DNJ干预后，TT3/TT4上升，推测肥胖个体DIO1对T4的转化能力降低，DNJ的干预能够改善DIO1的脱碘能力，进一步对DIO1的活性、蛋白水平及mRNA相对表达进行研究，结果表明DNJ的干预能够使DIO1活性上升、mRNA表达上调，促进T4向T3转化。另外，郝立月[39]以高脂饮食饲喂小鼠，发现饲喂初期血清TT4及TT3水平上升并显著高于正常对照，但后期均下降，TT4水平与正常对照无显著差异，TT3显著低于正常对照组，认为在饲喂高脂饮食前期，机体能够对过多的能量摄入做出反应，增加TT4及TT3水平以促进能量消耗，这是机体的一种代偿保护机制，但到后期，T4的合成以及转化均受到影响，导致TT4及TT3水平下降，并且给予功能成分干预后出现TT4及TT3上升并且高于正常对照的现象。在本研究中，肥胖对照组TT4水平与正常对照组无显著差异，TT3水平显著低于正常对照组，与其研究结果相一致，并且DNJ干预后也出现TT4及TT3水平上升并显著高于正常对照组的现象，DNJ的干预可能使机体这种保护机制得以部分恢复，增加TT4及TT3促进能量消耗。另有研究表明肥胖造成的机体氧化应激对DIO1活性造成影响，因此，DNJ对DIO1活性改善可能与其具有抗氧化性有关[28,40]。

肝脏是THs的靶器官之一，在肝脏中THs（主要是T3）通过TRβ发挥作用，TRβ与维甲酸X受体（retinoid X receptor，RXR）形成二聚体并与T3应答基因启动子上的THs应答反应元件（thyroid hormone response element，TRE）结合，当T3进入细胞与TRβ结合形成T3-TRβ-TRE复合体，实现对脂代谢相关基因的转录调控[41]。ATGL是甘油三酯分解为甘油二酯的关键酶之一，CPT1α是脂肪酸β氧化的限速酶，而CYP7A1则是胆固醇代谢过程中的限速酶，主要作用是使胆固醇分解为胆酸，本实验的研究结果表明DNJ的干预能够使ATGL、CPT1α、CYP7A1mRNA表达上调，已有研究表明ATGL、CPT1α、CYP7A1 3 种酶的基因启动子区域均存在TRE，mRNA的表达受到T3的调控[31,42-43]，因此，DNJ对于ATGL、CPT1α、CYP7A1mRNA表达的上调与其对THs功能的改善作用有关。

此外，功能成分的效果也可能因性别不同而产生差异。因此，本实验设立双性别小鼠观察DNJ的降脂作用及对THs的改善作用是否存在性别差异。对于THs，中、高剂量的DNJ使雌鼠TT3显著上升并高于正常对照组，各剂量组的雄鼠TT3虽然上升却未恢复至正常水平；另一方面，低剂量组雄鼠TRβ蛋白水平得到显著改善，而雌鼠则需要中剂量的DNJ才可使TRβ蛋白水平显著改善。Li Yougui等[44]的研究表明DNJ对高脂饮食雌性小鼠TC水平的改善作用优于雄性小鼠，本研究中，中剂量的DNJ便能使雌鼠TC显著下降，而雄鼠中只有高剂量DNJ才有效果，表明DNJ对雌鼠TC的改善作用较好，与Li Yougui等[44]的研究结果相一致。造成这些差异的原因有待进一步研究，同时这些差异也暗示对不同性别对象使用DNJ时，应充分考虑性别不同造成的影响，对使用剂量进行合适的调整。

综上所述，DNJ能够改善机体对TSH的应答及脱碘酶活性，上调DIO1和TRβmRNA表达来改善肥胖造成的THs功能紊乱，进一步靶向调节脂代谢相关基因表达，进而改善血脂水平，抑制体质量增加。