2 000例孕25～32周妇女宫颈分泌物中的细菌培养结果及耐药性分析

苏广龙 林玉婷 姜雪梅

(新疆乌鲁木齐市妇幼保健院检验科,乌鲁木齐市 830001,电子邮箱：su07539@163.com)

孕期生殖道感染是孕妇妊娠期间常见的生殖道疾病之一,妊娠期是女性的特殊时期,孕妇体内激素水平发生改变,引起生殖道微生物菌群失调,导致病原菌过度生长,增加孕妇生殖道感染概率[1]。随着临床上抗生素的大量使用,致病菌的耐药率不断增长,对孕妇危害较大,成为临床抗感染的重点和难点问题[2]。同时病原菌还能经胎盘传播引起胎儿宫内感染,造成流产、早产、死胎等[3]。由于孕期的特殊性,限制了抗菌药物的品种及给药途径,因此,分析孕妇宫颈分泌物细菌分布及耐药情况对临床抗感染治疗,降低母婴感染率具有重要意义[4]。本研究分析2 000例孕25～32周妇女宫颈分泌物的细菌培养结果及耐药情况,为临床抗感染治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2016年3月至2019年3月在本院产科进行产检的2 000例孕妇作为研究对象。纳入标准：(1)孕25～32周孕妇；(2)孕妇自愿进行宫颈分泌物培养,签署知情同意书。排除标准：(1)孕前有阴道炎或宫颈炎者；(2)近期有抗菌药物服用史者；(3)合并严重循环系统疾病者；(4)合并严重心、肝、肾等脏器功能障碍者。孕妇年龄20～36(25.27±2.63)岁,孕周25～32(30.18±0.90)周,孕次1～4(1.52±0.24)次。

1.2 试剂与仪器 血平皿、巧克力平皿、麦康凯平皿、中国蓝平皿购自广东环凯微生物科技公司,药敏片购自杭州微生物试剂有限公司,标准菌株金黄色葡萄球菌(ATCC25923)、无乳链球菌(ATCC12386)、粪肠球菌(ATCC33186)、大肠埃希菌(ATCC25922)、肺炎克雷伯菌(ATCC700603)、白色念珠菌(ATCC90028)均由国家卫生健康委临床试验中心提供,VITEK-32全自动微生物分析仪购自法国生物梅里埃公司。

1.3 宫颈分泌物采集 采用扩阴器暴露孕妇宫颈,无菌棉签拭去宫口黏液,再用无菌棉拭子探入宫颈管内1～2 cm处,旋转2～3周,置于无菌试管中,送检。

1.4 细菌鉴定与药敏试验 (1)细菌鉴定：将宫颈分泌物接种于血平皿、巧克力平皿、麦康凯平皿、中国蓝平皿上,37℃培养18～24 h,采用稀释涂布平板法对菌株进行分离，采用全自动微生物分析仪进行菌种鉴定；(2)药敏试验：采用K-B法对分离菌株进行耐药性检测,其中革兰阳性菌所用抗菌药物为青霉素、氨苄西林、苯唑西林、庆大霉素、头孢曲松、头孢唑林、万古霉素、利奈唑胺、阿莫西林/克拉维酸、四环素、红霉素、克林霉素、利福平、左氧氟沙星、环丙沙星；革兰阴性菌所用抗菌药为氨苄西林、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、头孢曲松、头孢唑林、头孢呋辛、头孢吡肟、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、阿莫西林/克拉维酸、复方新诺明；真菌所用抗菌药为氟康唑、酮康唑、伏立康唑、伊曲康唑、氟胞嘧啶、制霉菌素、两性霉素B。根据美国临床实验室标准化协会的相关标准[5]对耐药结果进行判定,耐药率=耐药株数/总株数×100%。

1.5 统计学分析 采用WHONET 5.6软件、Excel软件进行统计分析。

2 结 果

2.1 孕妇宫颈分泌物的细菌分布情况 2 000例孕25～32周孕妇的宫颈分泌物中共检出细菌426株,检出率为21.30%。其中革兰阳性菌178株(41.78%),优势菌为金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌及粪肠球菌；革兰阴性菌189株(44.37%),优势菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌；真菌59株(13.85%),优势菌为白色念珠菌、光滑假丝酵母菌。大肠埃希菌中产超广谱β内酰胺酶47株(36.15%),肺炎克雷伯菌中产超广谱β内酰胺酶2株(5.00%)。见表1。

表1 孕妇宫颈分泌物的细菌分布情况(n=426)

2.2 孕妇宫颈分泌物中优势革兰阳性菌耐药率 金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、克林霉素的耐药率均较高,分别为84.29%、80.00%、61.43%、55.71%；无乳链球菌对氨苄西林、四环素、红霉素的耐药率均较高,分别为70.37%、70.37%、55.56%；凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、克林霉素的耐药率均较高,分别为75.00%、60.71%、53.57%、53.57%；粪肠球菌对头孢曲松、利福平、克林霉素、四环素、红霉素耐药率高,分别为100.00%、93.33%、86.67%、80.00%、60.00%。见表2。

表2 孕妇宫颈分泌物中优势革兰阳性菌耐药率

2.3 孕妇宫颈分泌物中优势革兰阴性菌耐药率 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林、复方新诺明的耐药率均较高,其中大肠埃希菌的耐药率分别为68.46%、66.15%,肺炎克雷伯菌的耐药率分别为82.50%、70.00%,见表3。

表3 孕妇宫颈分泌物中优势革兰阴性菌耐药率

2.4 孕妇宫颈分泌物中优势真菌耐药率 白色念珠菌对酮康唑、制霉菌素、两性霉素B的耐药率均较低,分别为2.08%、0、2.08%；光滑假丝酵母菌对酮康唑、两性霉素B均无耐药性,见表4。

表4 孕妇宫颈分泌物中优势真菌耐药率

3 讨 论

生殖系统中的病原菌沿宫颈上行感染是引起胎膜早破、先兆流产的最重要原因,有研究报道,检测孕妇生殖道分泌物致病菌对胎膜早破有较高的预测价值[6]。同时也有学者发现,检测孕妇阴道或宫颈分泌物,有助于为致病菌感染高风险孕妇合理选择抗菌药物,延长孕周,改善妊娠结局[7]。因此,对孕晚期孕妇进行病原菌筛查,对孕妇及胎儿健康极为重要。

本研究对接受产检的2000例孕25～32周孕妇的宫颈分泌物进行检测,共检出病原菌426株,检出率为21.30%,略低于郭梅等[8]报道的24.11%。其中革兰阳性菌178株(41.78%),优势菌为金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、凝固酶阴性葡萄球菌及粪肠球菌；革兰阴性菌189株(44.37%),优势菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌；真菌59株(13.85%),与王芊等[9]报道的临产妇宫颈分泌物中以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌为主要病原菌相符。无乳链球菌又称B群链球菌,主要定植于女性生殖道,是引起孕妇生殖道感染与新生儿感染的重要致病菌之一,本研究中共检出无乳链球菌54株(12.68%),略高于曾选等[10]报道的9.04%,提示应加强对孕妇感染无乳链球菌的防范,以降低其感染率及孕期并发症的发生率。本研究对优势革兰阳性菌的药敏试验检测结果显示,金黄色葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、克林霉素的耐药率均较高,无乳链球菌对氨苄西林、四环素、红霉素的耐药率均较高,凝固酶阴性葡萄球菌对青霉素、氨苄西林、苯唑西林、克林霉素的耐药率均较高,粪肠球菌对头孢曲松、四环素、红霉素、克林霉素、利福平的耐药率均较高,与曾选[11]的研究结果相似,提示应加强对孕妇金黄色葡萄球菌的筛查,并减少青霉素、氨苄西林等高耐药性药物的使用,以减少耐药菌株产生。本研究对优势革兰阴性菌药敏试验检测结果显示,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林、复方新诺明的耐药率均较高,与秦妍妍等[12]的研究结果相似,提示感染大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的孕妇应谨慎使用氨苄西林、复方新诺明。对优势真菌的药敏试验检测结果显示,白色念珠菌对酮康唑、制霉菌素、两性霉素B的耐药率较低,尤其对制霉菌素无耐药性,光滑假丝酵母菌对酮康唑、两性霉素B均无耐药性,与李盛等[13]的研究结果相似,但酮康唑属于美国食品药物管理局妊娠分级C类药品,目前关于其对孕妇影响的研究较少,而两性霉素B治疗真菌感染的孕妇时,对胎儿无明显影响,因此,在治疗真菌感染孕妇时选择制霉菌素或两性霉素B治疗,可能会取得可观的治疗效果。

综上所述,孕25～32周妇女宫颈分泌物中菌群分布广,对多种抗菌药耐药率高,今后应加强对孕妇宫颈分泌物细菌的耐药性检查,特别是对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌耐药性进行筛查,以指导孕妇合理用药,减少耐药菌株产生。