杜云鹤
2020年新冠肺炎就如同一场没有硝烟的战争在全球蔓延,对全人类的生活造成了极大影响。假期小刘去青岛旅游,但是在旅游结束后却听到当地有新冠肺炎疫情出现,于是小刘很快就做好防护,到当地的医院进行检测,但是听说新冠病毒实验室检测有病毒核酸和血清抗体两种检测方法,到底是要检测哪一个?还是都要检测呢?有什么区别和联系吗?对于这个问题,就让我们一起来认识一下新冠病毒实验室检测方法吧!
1新型冠状病毒核酸检测
在已知生命体中,核酸是十分重要的组成部分,核酸的工作是对遗传信息的携带,脱氧核糖核酸(DNA)与核糖核酸(RNA)是两个主要类型。RNA是新型冠状病毒携带的核酸物质,类似于病毒的“指纹”,而且分子排列比较独特。用特用的技术可以对新冠进行核酸检测,然后可以在RNA的寻找下,确定病毒是否存在。实时荧光RT-PCR方法因为出结果较快(4~6 h),是目前常用的新冠病毒核酸检测技术,检测过程主要分为三步:
1.1 提取病毒的 RNA
病毒RNA的提取,较为常见的方式就是咽拭子、鼻拭子等,通过对标本的采集,然后将核酸提取试剂加进去,对病毒的外壳进行破坏,壳内的RNA核酸得以释放。
1.2 把病毒 RNA“反转录”成 cDNA
这个步骤其实也不复杂,在反转录技术(RT)的应用下,可以实现单链 RNA的配对,然后就可以组成双链 DNA——cDNA。这是由于病毒 RNA的结构不稳定,极易碎掉,所以为了让其更加稳定,能为后期的检测提供支持,就要转化结构。
1.3 进行病毒 cDNA 的扩增与检测
cDNA可以在 PCR 技术的应用下进行大量的复制。所以 cDNA 的双链与衣服的拉链类似,拉开拉链的过程其实就是PCR 的過程, cDNA分为两个拉链,双链需要经过配对才能使用。两条拉链不断复制的过程,其实就是新冠病毒 cDNA增长的过程,试剂盒中荧光探针在cDNA扩增期间,也开始工作,这时荧光信号被释放,cDNA的每次增长,就会让信号增强,荧光信号的增加Ct值也就可以通过PCR检测仪记录,然后就可以通过Ct值的分析,得出对应的结果。
核酸检测在实际应用中,其实是对病原体的指纹进行检测,具有较高的精准性,核酸也是病毒入侵后最先产生的,所以在诊断期间,核酸检测发挥着积极作用。但是就检测来看,不可避免误差。如果检测出来的结果为阴性,这时也难以排除受检者是否患有新冠,需要对假阴性的因素进行排除如当样本质量不好时,样本没有提取到病毒感染部位,或者样本中没有病毒等,也会出现假阴性的可能。还有受到检测技术、运输等各种因素的影响,也会出现假阴性的情况。
2新型冠状病毒血清抗体检测
人体在受到病毒入侵后,机体就会进行自我调节,对病原体进行抵抗,然后产生特异性抗体。在新冠病毒的检测上,可以通过血液样本的检测,来对患者是否有新冠病毒的特异性抗体进行判断,这样就有为新冠的确证提供了依据。
新冠病毒血清特异性抗体检测主要有IgM、Igg两种,IgM是近期感染的标志,在确诊后的4 d以内就可以检出IgM抗体,而且峰值在15 d左右达到顶峰;Igg抗体检出则需要7 d,而且随着时间延长检出率持续上升。在新冠病毒的助诊断中,血清Igg和IgM抗体是比较有效的诊断方法,Igg和IgM联合检测可提高诊断敏感性,同时也可以检测感染者体内特异性抗体的变化情况、人群的易感状况等,有助于疾病的防治和疫苗研发。常用的检测方法有胶体金、磁微粒化学发光、ELISA,操作起来较核酸检测简便、快捷、成本低等优势。
就血清学检测来看,在实际应用中依然存在有一定不足,就算抗体出现的再早,要想到达一定对检测水平,也需要一段时间,所以在初期的检测期间,结果极有可能是假阴性。而且检测用的标准抗原相互作用的抗体可能会存在于血液中,也就是说会发生交叉反应,从而在假阳性的误导下,让医务人员出现误诊。
3小结
通过以上了解,我们知道两种检测方法各有利弊,应客观对待其不同,合理应用,两种方法的联合使用,则可以更有效发现病毒,让病毒无处遁形。同时在选择上,我们更应根据当地的防疫工作要求开展检测,像小刘这种刚刚从疫区回来人员,为防止再传播及提高检测准确性,还应集中隔离使用多种方法多次检测。总之,疫情防控期间大家要积极配合医务人员的建议与指导,及时发现感染病例,维护自身和全社会的公共卫生安全。