儿童肺炎支原体感染流行病学特征及其与气象因素的相关性研究*

渠 滕,鞠 瑛,刘义庆,邱 旸,张 庆,崔朝杰,刘春梅

(山东第一医科大学附属省立医院临床医学检验部，山东济南 250021)

肺炎支原体(MP)是一类无细胞壁、介于细菌与病毒之间的原核细胞型微生物，是目前已知能独立存活的最小的无细胞壁的病原微生物[1-2]。MP主要经空气飞沫传播[3]，是儿童社区获得性肺炎(CAP)的重要病原体之一，占CAP的10%～40%[4-5]。近年来文献报道发现，肺炎支原体肺炎(MPP)在儿童肺炎中的比例逐年增加，重症MPP的报道也越来越多，引起人们的高度重视[6-8]。由于MP是细胞内病原微生物，一旦感染极难清除，且小儿呼吸系统及心血管系统尚未完全发育成熟，患肺炎时临床表现复杂多样且常有肺内外并发症，早期识别困难，容易误诊、漏诊[9-10]。因此，开展济南地区儿童MP感染流行病学分析，了解其与气象因素的相关性，可及时分析及预测济南地区MP感染流行病学趋势，指导临床早期诊断治疗,同时为疫情监控及家庭预防提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年3月至2019年3月因呼吸道感染入院的济南地区患儿5 429例作为研究对象，其中男3 312例，女2 117例，按年龄将其分为3组，其中0～3岁组2 746例，>3～7岁组1 827例，>7～14岁组856例。诊断标准参照《褚福棠实用儿科学》(第8版)。从中国气象科学数据共享服务网站(https://data.cma.cn/)收集2016年3月至2019年3月山东省济南地区的每月气象信息，包括每月降雨天数、月平均气温、月平均风速和月平均湿度。

1.2试剂与仪器 MagX全自动核酸提取仪(上海仁度科技有限公司)；Cobas z480实时荧光定量PCR仪(美国Roche公司)；MP核酸检测试剂盒用于RNA恒温扩增实时荧光检测(SAT)(上海仁度科技有限公司)。所有仪器均经过校准，试剂盒均在检测有效期内。

1.3标本采集与检测 用医用棉拭子取咽部分泌物，取2.5 mL生理盐水洗脱拭子标本，振荡混匀后转移2 mL洗脱液到含RNA保存液的专用标本管备用。按照实验室标准操作规程使用MagX全自动核酸提取仪提取核酸并自动完成PCR反应体系加样。最后，将加好标本的8排管转移到扩增区，用Cobas z480实时荧光定量PCR仪进行PCR扩增，设定反应程序为：42 ℃ 1 min，40个循环，荧光素通道设定为F1(FAM)和F2(HEX或VIC)，每分钟进行一次荧光信号收集；从40～80 ℃进行熔解曲线分析，反应体系40 μL，试验过程设置阴性和阳性对照。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据分析处理。计数资料以例数或百分率表示，采用χ2检验进行比较；不符合正态分布的计量资料以M(P25,P75)表示，采用秩和检验进行统计学分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1MP核酸检测阳性率与性别、年龄和季节的关系 2016年3月至2019年3月因呼吸道感染入院的济南地区0～14岁患儿5 429例，男、女患儿MP核酸检测阳性率分别为22.04%、28.67%，差异有统计学意义(χ2=30.60，P<0.05)；0～3岁患儿MP核酸检测阳性率最低,为12.53%，>3～7岁患儿MP核酸检测阳性率最高,为37.93%，>7～14岁患儿MP核酸检测阳性率为35.05%，各年龄段MP核酸检测阳性率差异有统计学意义(χ2=440.86，P<0.05)；春、夏、秋、冬四季MP核酸检测阳性率分别为16.54%、24.27%、31.93%、24.66%，其中秋季MP核酸检测阳性率最高，差异有统计学意义(χ2=87.70，P<0.05)。见表1。

表1 MP核酸检测阳性率与性别、年龄和季节的关系

2.2MP核酸检测阳性率与气象因素的关系 对MP核酸检测结果与每月的降雨天数、平均湿度、平均风力和平均湿度进行秩和检验分析，结果发现，MP感染与月降雨天数、平均温度无关(P>0.05)；但与平均风力、平均湿度有关(P<0.05)。当风力大、湿度低的时候，MP阳性患者减少；当风力小、湿度高的时候，MP阳性患者增加。见表2。

表2 MP阳性率与气象因素的关系

3 讨 论

MP广泛存在于全球范围，由于儿童免疫功能尚未发育健全，抵抗力较成人弱，因此极易受到MP的侵袭[11]，是CAP最常见的病原体之一。CAP是导致5岁以下儿童死亡的重要原因之一[12]，MPP占CAP的10%～40%[4-5]。MP感染的临床表现多样，潜伏期长，大多起病缓慢，早期临床表现和胸部X线片检查无特征性，因此，若要明确诊断，还需进行病原体检测[13]。虽然MP培养检测是MP感染诊断的金标准，但其操作不易且耗时较长；MP抗体的检出时间延迟于临床症状，不能及时有效地指导临床用药。因此，使用MP核酸检测对MP感染的早期诊断有很好的指导意义，MP RNA检测相对于MP DNA检测来说，能更有效反映MP在体内的生存情况及感染类型是否是现症感染。因此，本研究采用SAT技术对5 429例患儿的咽拭子标本进行MP RNA检测，MP核酸检测阳性1 337例，阳性率为24.63%。将MP阳性率按性别、年龄和季节进行分组，采用χ2检验分析可以看出，不同性别、不同年龄儿童MP核酸检测阳性率差异均有统计学意义(χ2=30.60，P<0.05;χ2=440.86，P<0.05)。秋季MP核酸检测阳性率最高，为31.93%，春、夏、秋、冬四季MP核酸检测阳性率比较，差异有统计学意义(χ2=87.70，P<0.05)，这与前期研究结果一致[14-15]。

目前，国内外对于呼吸道感染相关病原体的研究很多[16-17]，但大多集中在对流行病学分析，对其与生活息息相关的气象因素方面的研究较少，而其传播方式基本为空气飞沫传播。因此，本研究将患儿MP RNA检测结果与山东济南地区的气象因素(月降雨天数、平均湿度、平均风力和平均湿度)进行统计学分析发现，与XU等[18]在前期研究中提出的平均温度与MP核酸检测阳性率有关不同，MP感染与月降雨天数、平均温度无关(P>0.05)，但与平均风力和平均湿度有关(P<0.05)，这可能与南北方气候差异比较大有关。因此，本研究结果提示，在北方地区，当风力大、湿度低的时候，MP阳性患者减少；当风力小、湿度高的时候，MP阳性患者增加。

综上所述，山东济南地区MP感染与性别、年龄和季节均有很大关系，可以根据本地区的流行病学特征，为卫生行政部门制订预防措施和临床早期诊断提供参考依据；在气象方面，MP感染与风力和湿度有很大关系。因此，平常要注意定期开窗通风，保持室内空气新鲜，干燥寒冷的季节多喝温水、加强锻炼，重点人群做到积极、科学预防。