艾滋病检验中HIV 抗体ELISA 法筛查研究

刘晓云

（内蒙古鄂尔多斯市疾病预防控制中心，内蒙古 鄂尔多斯 017000）

0 引言

获得性免疫缺陷综合征简称艾滋病（ADIS），引发艾滋病的主要原因是艾滋病毒也就是人类免疫缺陷病毒（HIV）引起的，同时艾滋病是一种具备较强恶性传染的疾病，并且有着较高的死亡率。由于受到HIV病毒的侵蚀，造成人体的免疫功能减退，进而各种类型的疾病也随之爆发，且并发症的发病率也大幅度上升，严重威胁人们的身体状况。在世界上检测HIV抗体的方法有很多，其中最主要的检测方法就是酶联免疫吸附试验简称ELISA、明胶颗粒凝集实验简称PA、免疫荧光实验简称IFA、免疫印迹实验简称WB法以及放射免疫沉淀实验简称RIP和斑点免疫胶体金实验。

1 资料及方法

1.1 一般资料。本次研究选择我院441名体检人员进行ADIS检验，其中男231名，女210名。另外于2017年4月至2018年4月所采集的标本为220份，2018年5月至2019年4月所采集的标准为221份。

1.2 方法。检测仪器：本次研究中，艾滋病患者筛查所选用的检测仪器有：自动洗板机，型号为WD-3009型；酶标仪，型号为WD-9417B型；水浴恒温箱以及可调式移液器等等。检测试剂：在本次研究中选用的主要检测试剂为人类免疫缺陷病毒诊断试剂盒，所选用的试剂均经过国家药监局检测，且检测合格，并且在有效期的时间范围内。另外，严格按照试剂盒的相关说明来严格使用并操作。检测方法：在对标本检测过程中，所涉及的全部操作都是在严格执行相关标准的基础上进行的，确保操作过程的规范和标准。同时详细阅读试剂的说明书，规范和标准的使用试剂。标本的检测过程在根据试剂说明书以及检测的相关规定的基础上进行严格操作，并且在检测过程中及时规避交叉污染状况的发生。经过多次检查，正确处理检查检查结果，并对检测过程的质量进行评价和测定，在此基础上创建质控图。采用ELISA法对体检者的标本进行初次筛查，同时将呈阳性的标本进行是实验室检查，再次确认检测的结果，并且对于检测的结果做好保密工作。

2 结果

由表1可以看出，通过对441份标本进行ELISA法初次筛查发现，初次筛查呈阳性的有11例，占比2.4%，同时对这11例标本进行实验室确认，其中确定阳性的有5例，占比45%，不确定的有1份，占比10%，确定阴性的为5例，占比45%。

表1 2017年4月-2019年4月艾滋病检测标本与筛检结果统计[n（%）]

3 讨论

人体免疫缺陷病毒是一种对人们的人体免疫系统造成极大破坏力的病毒，并且也是引起艾滋病的主要原因。倘若HIV病毒侵入人们的机体，并且在体内大量繁殖就会引起病变，破坏甚至扼杀人体内大量的CD4细胞，CD4细胞是人体免疫系统中最为关键的一种的免疫细胞，同时也是HIV病毒侵袭的主要对象。CD4细胞属于一种特殊的白细胞，在人体免疫系统中起着指挥的重要作用，消灭和控制各种病毒的感染。倘若体内的CD4细胞遭到HIV病毒的大肆破坏，就会造成人体免疫功能失调甚至减退，严重影响人们的身体健康和生命安全[1]。鉴于艾滋病的潜伏期长达8-9年，在没有发病之前是没有任何临床表现和症状的。但是患者潜在艾滋病的话在和其他人接触的时候可以通过性接触、血液以及母婴的方式传播，进而威胁他人的生命。现阶段，艾滋病的不断滋长已经成为国际上最为严重的公共卫生问题，艾滋病已经成为疾病预防控制中心关注的焦点。

酶联免疫吸附试验简称ELISA法，主要就是将抗体和酶复合物融合起来，通过显色的结果进行检验。ELISA法属于一种特异性基因检测技术，并且可以快速检测出人体内的HIV病毒，和其他检测方法相比较ELISA法的准确性更高。并且ELISA法在检测HIV抗体的时候操作起来非常的简单快捷，并且成本费用不高，另外这种筛查方法具有较高的灵敏度和特异性[2]。

尽管ELISA法和其他检测方法相比有很大的优势，但是在操作过程中仍然受到一些因素的影响。在对标本检测过程中，由于影响结果的不确定因素有很多，在初次筛查的时候经常出现假阳性的状况，不仅仅要将初次筛查为阳性的患者标本进行实验室确认，同时还应该对检测结果造成影响的因素进行分析，以便提出相应的解决策略，规避这些因素对检测结果造成的影响。在对标本检测过程中，检测员未根据相关规定及操作规范进行检测、试剂和标本的质量不合格、加样控制不合理，洗板不通畅或者检测过程中洗板等待时间过长以及显色时间等都会对检测的结果产生影响[3]。因此，医院在检测之前第一，对参与标本收集、保存、操作的工作人间定期进行培训，让检测人员深刻意识到自己工作的重要性以及检测结果对患者产生的关键影响，严格执行操作规范和相关章程对标本进行检测，从标本的收集到最后的检测整个过程都应该和《全国艾滋病检测技术规范》的要求相吻合，尽最大的可能确保检测结果的准确性。第二，试剂的质量会对检测的过程和结果产生直接的影响，是以在检测之前，应该严格甄选试剂，并且所选择的试剂必须是通过国家药监局检测的合格产品。第三，确保标本的质量，在检测之间，将等待检测的标本在自然状态下存放1-2个小时，在标本凝固并达到检测标准之后，进行离心处理，倘若标本为血浆，需要加用一定比例的抗凝剂。假如收集的标本短时间内不会检测，将标本放置在医用冰箱当中，将冰箱的温度控制在2℃-8℃范围内，假设需要储存，温度应该保持在-20℃左右。第四，在加样过程中使用可调式移液器在短时间内完成加样，倘若加样量比较多，可以分几次进行操作，每次加样都应该间隔一定的时间，避免影响加样的结果。第五，在检测之前首先对洗板机进行检查，检测洗板机的管路是否存在堵塞问题。第六，在检测过程中，要想将标本可以充分的显色，应该在室温37℃下半小时之后结束观察，倘若时间过长就会影响质控图。是以，在利用ELISA法对HIV抗体进行检测的时候，应该对实验室实施科学化管的管理，根据相关规定和标准严格进行操作，加强对检测人员的培训，提高他们专业水平，确保标本的质量，为临床判断提供可靠、精准的数据信息，另外，选用具备较高灵敏度以及特异性的试剂，根据试剂说明书以及操作章程严格检测，继而保障检测结果的精确性和可靠性。

本次研究对我院近两年ADIS体检患者中的441份标本利用ELISA法对体检人员的HIV病毒进行初次筛选，并对筛查的记过进行确定和进一步分析。通过研究表示，初次筛查呈阳性的占比2.4%，同时对这些呈阳性标本进行实验室确认，其中确定阳性的占比45%，不确定占比10%，确定阴性的占比45%。

综上所述，利用ELISA法来筛查艾滋病患者体内的HIV抗体有着良好的成效，但是要想确保此方法检测结果的准确性，工作人员严格按照相关规定进行检测，确保试剂以及标本的质量，减少假阳性状况的发生。