Nanofat 联合颗粒脂肪注射治疗下睑混合型黑眼圈的疗效研究

暴志国，王耀聪，金小焕

（郑州市中心医院整形美容科，河南 郑州，450007）

现临床有多种方式可治疗黑眼圈，如注射硬化剂、填充、手术、激光治疗、化学剥脱、药物、增白化妆品、按摩、微针等。目前，微针治疗已成为常用方式之一，此方式虽安全、有效，但随着人们对美的追求度增高，其效果已无法满足需求。为此，探讨更为有效的治疗方式具有必要性。近年我院采用注射Nanofat的方式进行治疗，发现患者皮肤色素沉着、皱纹等均得到改善。且有关此点，目前已有报告指出[1-2]，纳米脂肪联合颗粒脂肪注射效果明显，但其效果是否优于单一采用微针治疗的报告非常少，为证实此点，现纳入我院2018年4月至2019年12月期间收治的下睑混合型黑眼圈患者60例分组进行论述：

1 资料及方法

1.1 一般资料

回顾分析我院2018年4月至2019年12月期间收治的下睑混合型黑眼圈患者60例，按其治疗方式分组，即对照组（30例）和研究组（30例）。入选标准：①各患者身体健康；②皮下血管显影显示泪槽凹陷畸形和血管型黑眼圈导致的结构型黑眼圈；③病历资料齐全；④纳入研究前未使用眼部化妆品。排除标准：①合并血液性疾病、内分泌性疾病等；②精神、智力障碍者；③纳入研究前已接受其他方式治疗；④颜面部过敏性皮肤者，或对化妆品过敏者；⑤合并脑血管、心血管疾病者；⑥资料不全、不乏判定疗效、治疗中过敏者。对照组：年龄20-56岁，平均为（32.51.2）岁，病程时间0.5-12年，平均为（4.80.3）年；研究组：年龄20.3-56岁，平均为（32.81.1）岁，病程时间0.6-12年，平均为（4.90.2）年。基本资料差异小（P＞0.05）。

1.2 方 法

对照组接受微针治疗，用温水浸湿一次性毛巾，轻擦拭患者面部，尤其时眼周皮肤，针对使用油性润肤品患者和油性皮肤者，需用洁面乳将其面部清洁干净。用消毒液消毒皮损部和穴位部位，避免消毒液误入眼睛。用微针平刺黑眼圈区域、四白穴、攒竹穴、太阳穴、印堂穴，进针角度需与皮肤保持15°，每针间距0.2cm左右，留针20min，取针。隔天治疗1次，1疗程为10d，持续治疗3个疗程。

研究组接受Nanofat联合颗粒脂肪注射，供区为腹部或大腿，注射肿胀液后10min，连接注射器和2mm直径的抽脂针，针头刺入皮下脂肪后，多层次、多隧道抽吸。注射器中共装脂肪混悬液，静置5min，将下层血液或肿胀液排尽，挑选大脂肪团块。把处理完成的颗粒脂肪放置20ml膜片Nanofat转换注射器内，Nanofat用Tonnard法备制。注射脂肪：神经阻滞麻醉，眶外侧下隐蔽部位做针孔，经此孔，用注射钝针头顺着骨膜，到达泪槽凹陷部位远端，单侧注射1.5ml，一边退针一边注射。用三通管把Nanofat转至1ml注射器内，锐针头30G多隧道、少量多点、缓慢均匀注射到下眼睑皮下层中，需避开血管，待下睑皮肤颜色为淡黄色则可，两侧共注射1ml。注射后，需轻揉注射部位，保持下眼睑注射部位平整。用红霉素眼膏涂抹进针点，术后，需冰敷注射部位0.5h。

1.3 指标判定

随访时间≥6个月。

目前国内外暂无统一标准判定黑眼圈治疗疗效，本研究设定判定标准为：设X为瞳孔中心直下25cm与15mm部位，设Y为内眦连线中点下20mm和瞳孔中心点下10mm，治疗前、治疗后分别设为X1、Y1和X2、Y2，治疗前后需用数码相机拍摄照片记录其症状，以便评估效果。显效：对比治疗前后照片，Y1/3≤Y1-Y2＜Y1，X1/3≤X1-X2＜X1。有效：比较治疗前后照片，X1/4≤X1-X2＜X1/3，X1/4≤Y1-Y2＜X1/3；无效：比较治疗前后照片，X1加大或无变化，Y1加大或无变化，若Y值或X值减少，Y1/4＞Y1-Y2，X1/4＞X1-X2。

用我院自行设计的治疗满意度问卷表调查此次满意度状况，设非常满意、满意、不满意三个选项，让患者自行填写。

测量黑眼圈区域皮肤颜色：用数码相机在室温相同、曝光值相同的环境下拍摄照片，用Adobe photoshop CS7曝光校正术前术后照片，测量泪槽线与下睑缘中内1/3的像素点，测量所有像素点b*、a*、L*平均值。b*为蓝黄范围，值越小则皮肤越蓝，反之越黄；a*表绿红范围，值越小越绿，反之越黄；L*表黑白范围，L*值越小则皮肤越黑，反之越白。

1.4 统计学方法

用统计学软件（SPSS13.0版本）分析数据，t检验计量资料，表示为，χ2检验计数资料，表示为%，P＜0.05表差异有统计学意义。

2 结果

2.1 治疗疗效

研究组治疗疗效93.33%高于对照组70%（P＜0.05），见表1：

表1 两组患者疗效比较[n，(%)]

2.2 L*、a*、b*值

术前L*、a*、b*值差异小（P＞0.05），术后6个月时，研究组L*高于对照组（P＜0.05），研究组a*、b*比对照组，差异小（P＞0.05）。见表2：

2.3 满意度

研究组满意度93.33%高于对照组66.67%（P＜0.05），见表3：

表3 两组患者满意度比较[n，(%)]

2.4 典型案例

女性，30岁，2019年5月12日因下睑型黑眼圈到院就诊，接受纳米脂肪联合自体颗粒脂肪注射治疗，术后共随访6个月，术后1个月时，与术前比较，黑眼圈症状有改善，术后6个月有明显改善，下睑皮肤无皱纹，非常满意，术后a*、b*变化不明显，术前L*=48.02，术后L*=55.02，患者非常满意。见图1：

表2 两组美学效果比较(，分)

表2 两组美学效果比较(，分)

图1 典型案例 a 术前；b 术后

3 讨 论

从医学角度来说，黑眼圈属于不规范用语，但因其通俗易懂，目前已广泛用于临床。其类型可分混合型黑眼圈、结构型黑眼圈、血管型黑眼圈、色素型黑眼圈，合并黑眼圈者，主要表现为下眼睑皮肤颜色暗沉、无精打采，不仅影响到患者面容美观，且对其个人情绪有影响。现我国有关黑眼圈的报告仍然较少，暂未完全明确黑眼圈发生机制和原因。微针对皱纹、色斑等损美性疾病疗效非常好，可在不破坏皮肤结构完整性的状况下，建立皮肤微细管道，输送基底药物或美容产品，激活细胞，修复损伤组织，让其直接参与到细胞代谢中[3-4]，通常联合相应药物进行治疗。此外，接受治疗后，治疗部位浅黄色印退的比较缓慢。所以，此方式的推广受到局限。

有学者把脂肪用胶原酶消化后，用注射器注射到下睑皮下层，黑眼圈有所改善，但需制备胶原酶，步骤繁琐，方法复杂。制备中脂肪被污染的危险性较大[5-6]。本研究在制备Nanofat时，采用Tonnard法，并将其注射到口周、下睑部位的皮下层、真皮层，发现下睑及皱纹灰暗，得到显著改善，且未发生肉芽肿、脂肪囊肿、感染等症状[7-8]。本研究结果显示，研究组Nanofat联合颗粒脂肪注射可显著改善下睑黑眼圈部位皮肤颜色，提升满意度和疗效。笔者分析，Nanofat内含多种生长因子（表皮细胞生长因子、转化生长因子β）和脂肪来源干细胞[9-12]。纳米脂肪对皮肤沉着色素有改善作用，则可能与生长因子和脂肪干细胞有关。大量研究表明[13-15]，脂肪源性干细胞可生成多种细胞因子，此类细胞因子对上皮细胞、纤维细胞迁移和增殖有促进效果。Friji学者在2014年则对Nanofat名称准确度产生了质疑，并对Tonnard等学者用侧孔直径1.0mm、内径2.0mm的多孔刨状吸脂针吸脂做出了分析，乳化脂肪后，用孔径500um进行过滤处理，收集Nanofat。现纳米技术已在各学科领域得到一定应用，但目前针对纳米级的定义仍然持多种观点。美国政府认为，纳米为1nm-100nm，所以，Nanofat易与纳米技术出现混淆。

在手部、口周、眼周等非脂肪结构部位，采用未接受相应处理的脂肪颗粒，需使用直径≥1.0mm的移植针进行。因移植针口径小，无法确保大颗粒脂肪通过，所以强行高压会不可逆损伤脂肪细胞，还可能造成移植部位脂肪出现堆积，且形堆积形状存在不规则性，而堆积的脂肪出现中心性坏死的可能性非常大，进而加大术后并发症和移植成活率。因Nanofat中，未出现脂肪破坏的状况，将其用于改善容积的效果有限。临床实际中，Nanofat的嫩肤效果非常明显。另有研究表明，脂肪移植注射对面部瘢痕和放射性皮肤溃疡的和资料，效果也非常理想，其皮肤弹性得到明显改善，而目前暂不完全明确Nanofat移植注射后对受损皮肤修复的促进机制。此外，在修复受损组织和组织再生中，巨噬细胞和凋亡细胞生成的细胞因子，也对组织再生有促进作用。分解后的脂肪可能会刺激到干细胞组织再生和干细胞分化。分析Nanofat样品发现，虽乳化中会破坏到脂肪细胞，失去正常脂肪细胞形态和脂肪组织结构，但Nanofat样品中仍然存在大量的高活性间充质干细胞，因此，笔者认为，高活性间充质干细胞可能则为Nanofat中发挥作用的物质。但目前有关每克脂肪可提取出的活性间充质干细胞量仍然需持续探讨，但机械乳化法不仅克服了移植细针的难度，且降低了脂肪来源间充质干细胞的伦理问题和技术壁垒。一般来说，临床SVF步骤较为复杂，耗费时间长，并需昂贵的试剂和设备支持，同时存在安全性、标本污染等问题，临床应用存在局限性。Nanofat真皮注射相比于化学生物工程填充剂，可获得更安全、更好的美容效果，Nanofat可重叠扇形皮内注射，改善皮肤色泽，提高皮肤质量，这也是将其用于治疗黑眼圈的根据之一，术后2-6个月效果最为良好。临床发现治疗眼周色素沉着时存在长时间的红斑阶段，笔者认为可能因组织更新修复导致的。

禁忌症方面，笔者认为不适应用于泪槽凹陷畸形和血管型黑眼圈导致的结构型黑眼圈等类型的患者，此外，若患者患者合并其他疾病，暂不建议此方法治疗。本研究中患者注射部分均发生程度不同的青紫、红肿，此可能与在实施皮下注射操作时，多次穿刺造成注射部位发生组织水肿、出血等有关。随访过程中，1例患者术后1个月左右时，右侧下睑部位发生小脂肪结节症状，分析原因可能为在注射操作时存在注射不均匀的问题，结节部位皮下纳米脂肪出现堆积而造成。有学者在分析自体脂肪采用机械乳化后，转变为油性乳剂，正常脂肪结构和脂肪活性均被破坏。此例患者在术后1个月左右时出现结节，根据跟踪观察，术后3个月时自行消失，表面注射部位未存活有明显的脂肪组织。另1例患者术后下睑缘存在色素沉着状况，分析后发现，术后早期，下睑缘存在严重淤青，色素沉着状况可能与注射时出血存在关系，目前暂无相应报告。本研究各患者均未发生皮肤局部凹陷、瘢痕、脂肪栓塞、脂肪液化、感染等并发症，表明Nanofat治疗下睑型黑眼圈的安全性非常高。

综上，临床治疗下睑混合型黑眼圈可考虑采用Nanofat联合颗粒脂肪注射的方式，此方式可显著改善患者下睑黑眼圈部位皮肤颜色，治疗效果更明显，提升患者治疗满意度。