不同透皮吸收促进剂对黄绵马酸BB乳膏体外透皮吸收的影响

梁玉婷　刘小赟　潘敬灵　吴小诗　黄晓彤　唐春萍　沈志滨

中图分类号 R944.2+1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2020）05-0590-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2020.05.17

摘 要 目的：研究不同透皮吸收促进剂对黄绵马酸BB乳膏体外透皮吸收的影響。方法：分别制备含1%氮酮、2%氮酮、3%氮酮、4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸、1%氮酮+1%薄荷醇、1%氮酮+1%丙二醇、1%氮酮+1%油酸、1%薄荷醇+1%丙二醇等11种不同透皮吸收促进剂的黄绵马酸BB乳膏。采用改良Franz扩散池，以离体雄性大鼠腹部皮肤为透皮屏障，通过超高效液相色谱法测定接受液中黄绵马酸BB含量，并计算24 h内的单位面积累积透过量（Q24 h）和经皮渗透速率（Jss）;同时与无透皮吸收促进剂的黄绵马酸BB乳膏进行比较，计算增渗比（ER）。结果：含上述11种透皮吸收促进剂的黄绵马酸BB乳膏的Q24 h分别为（82.96±7.15）、（80.17±0.66）、（78.22±1.87）、（73.53±1.24）、（35.65±2.23）、（34.02±1.73）、（42.68±2.66）、（33.94±1.37）、（34.16±1.54）、（46.78±1.21）、（43.66±1.69） μg/cm2，Jss分别为（5.26±0.10）、（4.69±0.12）、（4.45±0.45）、（4.00±0.06）、（3.74±0.33）、（3.23±0.18）、（3.73±0.53）、（3.14±0.47）、（3.54±0.11）、（3.98±0.34）、（4.34±0.14） μg/（cm2·h），ER分别为2.055、1.831、1.738、1.564、1.462、1.263、1.456、1.227、1.385、1.557、1.698。结论：以上透皮吸收促进剂均可增强黄绵马酸BB乳膏的透皮吸收作用，其中以1%氮酮的作用最强。

关键词 黄绵马酸BB乳膏;透皮吸收促进剂;经皮渗透;体外

Effects of Different Penetration Enhancers on in vitro Transdermal Permeation of Flavaspidic Acid BB Cream

LIANG Yuting1，LIU Xiaoyun1，PAN Jingling1，WU Xiaoshi1，HUANG Xiaotong1，TANG Chunping1，SHEN Zhibin1，2（1.School of TCM， Guangdong Pharmaceutical University， Guangzhou 510006， China;2.Guangdong Provincial Cosmetics Engineering Technology Research Center， Guangzhou 510006， China）

ABSTRACT   OBJECTIVE： To study the effects of different penetration enhancers on in vitro transdermal permeation of Flavaspidic acid BB cream. METHODS： Flavaspidic acid BB cream was prepared， containing 11 kinds of different penetration enhancers as 1% azone， 2% azone， 3% azone， 4% azone， 1% menthol， 1% propylene glycol， 1% oleic acid， 1% azone+1% menthol， 1% azone+1% propanediol， 1% azone+1% oleic acid or 1% menthol+1% propanediol. Modified Franz diffusion cell was adopted using abdominal skin of isolated male rat as transdermal barrier. The content of flavaspidic acid BB was determined by UPLC. The accumulative transdermal amount （Q24 h） and percutaneous permeability （Jss） within 24 h were calculated; and compared with Flavaspidic acid BB cream without transdermal enhancer， the enhancement ratio （ER） was calculated. RESULTS： Q24 h of Flavaspidic acid BB cream with above 11 kinds of transdermal enhancers were （82.96±7.15），（80.17±0.66），（78.22±1.87），（73.53±1.24），（35.65±2.23），（34.02±1.73），（42.68±2.66），（33.94±1.37），（34.16±1.54），（46.78±1.21），（43.66±1.69） μg/cm2， respectively. Jss value were （5.26±0.10）， （4.69±0.12）， （4.45±0.45）， （4.00±0.06）， （3.74±0.33），（3.23±0.18）， （3.73±0.53）， （3.14±0.47）， （3.54±0.11），（3.98±0.34），（4.34±0.14） μg/（cm2·h）， respectively. ER were 2.055， 1.831， 1.738， 1.564， 1.462， 1.263， 1.456， 1.227， 1.385， 1.557， 1.698， respectively. CONCLUSIONS： All of the above transdermal absorption enhancers can enhance the percutaneous absorption of Flavaspidic acid BB cream， among which， 1% azone is the best.

KEYWORDS   Flavaspidic acid BB cream; Transdermal absorption enhancer; Transdermal permeability; in vitro

香鳞毛蕨[Dryopteris fragrans（L.）Schott]为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物，民间广泛用于治疗多种皮肤病，如牛皮癣、头癣及脚癣等，其主要的生物活性成分为间苯三酚类成分[1]，具有抗菌、止痒、抗氧化等多种药理作用[2-4]。其中，黄绵马酸BB是香鳞毛蕨中含量最高的间苯三酚类成分[5]。本课题组前期研究表明，黄绵马酸BB具有良好的抗真菌和抗革兰氏阳性菌作用，但关于其体外透皮性能还没有系统研究。外用制剂具有不受肝首关效应和肠胃道破坏影响、可直达病灶的独特优点[6]，但皮肤是其有效成分吸收起效的主要屏障，在外用制剂中加入透皮吸收促进剂有利于药物通过皮肤屏障到达靶组织[7]。因此，選择理想的透皮吸收促进剂是外用制剂研究的主要内容之一。

透皮吸收促进剂是一种能可逆地改变皮肤角质层屏障功能又不损伤任何活性细胞的物质，可用于增强药物透皮能力，提高药物透皮量[8]。为了乳膏中的有效成分能更好地进入皮肤，从而更好地发挥疗效，处方中应该加入合适且适量的透皮吸收促进剂。目前，透皮吸收促进剂主要分为天然透皮吸收促进剂与合成透皮吸收促进剂。天然透皮吸收促进剂主要有薄荷类、挥发油类，合成透皮吸收促进剂常用的有醇类、亚砜类、脂肪酸类、脂肪酸酯类、酮类、有机盐类等[9]，其中以氮酮、薄荷醇、油酸、丙二醇及其联用较为常见[10]。本研究拟通过考察黄绵马酸BB乳膏体外透皮吸收行为，比较11种常见的透皮吸收促进剂（1%氮酮、2%氮酮、3%氮酮、4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸、1%氮酮+1%薄荷醇、1%氮酮+1%丙二醇、1%氮酮+1%油酸、1%薄荷醇+1%丙二醇）对其体外透皮吸收的影响，为筛选黄绵马酸BB乳膏优良的透皮吸收促进剂提供参考。

1 材料

1.1 仪器

BT125D型十万分之一电子天平（德国Sartorius公司）;AUY120型万分之一电子天平（日本岛津公司）;SB-1200型水浴锅（上海爱朗仪器有限公司）;KQ-500E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）;TK-20B型透皮扩散试验仪（上海锴凯科技贸易有限公司）; ACQUITY H-Class型超高效液相色谱（UPLC）仪（美国Waters公司）。

1.2 药品与试剂

黄绵马酸BB原料药（批号：GC-CZ-180906，纯度：≥98%）、黄绵马酸BB对照品（批号：20180903，纯度：≥98.5%）均来源于武汉长成化成科技发展有限公司;白凡士林（批号：2017120136，医用级）、液体石蜡（批号：2016112031，分析纯）、丙二醇（批号：2018051014，分析纯）、无水乙醇（批号：2019041038，分析纯）均购自天津市致远化学试剂有限公司;十八醇（批号：20170220，分析纯）、乙二胺四乙酸二钠（批号：20141104，分析纯）均购自天津市大茂化学试剂厂;对羟基苯甲酸甲酯（天津市科密欧化学试剂有限公司，批号：20180109，分析纯）;维生素E（浙江医药股份有限公司，批号：20170419，药用级）;单硬脂酸甘油酯（批号：M180820614，分析纯）、对羟基苯甲酸丙酯（批号：C10106360，分析纯）、   2，6-二叔丁基对甲酚（批号：C10377371，分析纯）、月桂氮酮（批号：C10158832，纯度：97%）、薄荷醇（批号：C10097271，纯度：99%）、油酸（批号：C10375483，药用级）均购自上海麦克林生化科技有限公司;脂肪醇聚氧乙烯醚O-9（江苏省海安石油化工厂，批号：20171013，分析纯）;甘油（济南杰辉商贸有限公司，批号：20180617，医用级）;甲醇（德国Merck公司，批号：10972907839，色谱纯）;三氟乙酸[阿拉丁试剂（上海）有限公司，批号：J1626023，分析纯];水为市售纯净水。

1.3 动物

SPF级SD大鼠，雄性，体质量180～220 g，购于广东省实验动物中心，生产许可证号为SCXK（粤）2018-0002。

2 方法与结果

2.1 乳膏的制备

称取6 g凡士林、8 g液体石蜡、5 g十八醇、7 g单硬脂酸甘油酯、4 g脂肪醇聚氧乙烯醚O-9、4 g维生素E、0.3 g对羟基苯甲酸甲酯、0.2 g对羟基苯甲酸丙酯、0.5 g 2，6-二叔丁基对甲酚，加热至80 ℃溶解，搅匀，降温至65 ℃，加入1 g黄绵马酸BB原料药搅拌，超声（功率：500 W，频率：40 kHz）使其完全溶解，再加入1 g透皮吸收促进剂搅拌均匀，作为油相，备用;称取12 g甘油、0.02 g乙二胺四乙酸二钠、纯化水适量（乳膏总量100 g），加热至65 ℃溶解，作为水相。将油相缓缓倒入水相中，边加边搅拌至室温，即得。用不同的透皮吸收促进剂分别制成含有1%氮酮、2%氮酮、3%氮酮、4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸、1%氮酮+1%薄荷醇、1%氮酮+1%丙二醇、1%氮酮+1%油酸、1%薄荷醇+1%丙二醇的黄绵马酸BB乳膏。同法制备不含透皮吸收促进剂的黄绵马酸BB乳膏和不含黄绵马酸BB的阴性对照乳膏。

2.2 黄绵马酸BB含量测定方法的建立

采用UPLC法测定黄棉马酸BB的含量。

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取黄绵马酸BB对照品约10 mg，置于10 mL量瓶中，加甲醇溶解、定容，制成质量浓度为1 mg/mL的对照品溶液。

2.2.2 供试品溶液的制备 精密称取黄绵马酸BB乳膏约0.5 g，置于具塞锥形瓶中，加甲醇50 mL，称质量，置于65 ℃水浴中加热2 min，振摇使溶解，取出后，40 ℃下超声（功率：500 W，频率：40 kHz）处理10 min，放冷，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

常用的透皮吸收促进剂有氮酮、薄荷醇、丙二醇、油酸及其组合物等，且这些透皮吸收促进剂的常用质量分数大都在1%～5%[13]。笔者通过查阅相关文献[14-15]，比较了1%～4%氮酮、1%薄荷醇、1%丙二醇、1%油酸单用对黄绵马酸BB乳膏的促渗效果，以及同等用量下两两联用对黄绵马酸BB乳膏的促渗效果。本试验结果表明，随着氮酮浓度增加，其促透效果反而降低。推测原因可能是氮酮浓度增大，乳膏黏稠度增加，不利于黄绵马酸BB的释放及溶出，进而阻碍了其透皮吸收;且黄绵马酸BB属间苯三酚类衍生物，含有多个酚羟基，能和氮酮上的羰基形成氢键，不利于从膏剂中释放出来[9]。在同等用量的条件下，氮酮的促渗作用明显高于薄荷醇、丙二醇和油酸，氮酮与薄荷醇、丙二醇、油酸等联用的促透效果也较其单用时降低。其原因可能是氮酮与薄荷醇有较强的亲和力，降低了黄绵马酸BB向角质层的分配比例，从而影响了渗透效果;丙二醇具有较大黏度，氮酮与丙二醇联用后黏度增加，抑制了皮肤的水合作用，使药物经皮渗透性降低[16]。

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（收稿日期：2019-10-25 修回日期：2020-01-15）

（编辑：邹丽娟）