制作蛙骨骼标本

刘凯丰

动物骨骼标本在教学、科普活动中有着重要作用，标本也是新分布记述以及新物种发表可供研究和检查的唯一实物证据。因此，学会动物骨骼标本制作技术，对以后想要学习动物形态研究类专业的学生有极大的帮助。

要完成骨骼标本的制作，就必须对动物的整体结构进行详尽了解。我以蛙为例制作标本，引导同学们了解两栖动物的身体结构。

一、实验材料及用具

蛙一只，20ml医用注射器一个，手术刀两把，手术剪一把，眼科剪一把，解剖针一根，眼科镊子一把，尖头镊子一把，氢氧化钠少量，双氧水少量，502粘胶一管，塑料槽一个。

二、制作步骤

1.选材

选取无畸形、结构完整的蛙用作实验材料。个体不能太小，过小的动物骨骼可能尚未发育完全，缺乏代表性，还会影响标本美观。也不能太大，过大的动物标本可能需要更长的制作时间，难度更大，而且成本也会增加。应挑选体形完整、适于制作骨骼标本的蛙活体。

2.处死动物

处死动物的方法主要有窒息法，适用于鸟类、小型哺乳动物;麻醉法，适用于两栖类、爬行动物;自然死亡法，如使鱼类离开水。无论采用哪种方法，都应遵循安乐死的原则。

制作标本的关键在于使骨骼保持完整，由于双毁髓法会破坏脊椎，所以不能采用这种方法处死蛙类。

3.剔除肌肉

（1）去掉皮肤及其附属物。把处死的蛙置于解剖盘上，剪开腹部皮肤，将皮肤左右剥离。为了不剪坏剑胸软骨，应注意不要剪到腹部肌肉。可先将蛙的四肢和头部皮肤完整地去除，避免在氢氧化钠溶液处理后蛙皮变韧，增加去除难度。

（2）剥离后，用镊子夹起腹壁肌肉，剪开腹腔，去除内脏。

（3）粗剔大塊肌肉。要特别注意保存软骨，如剔除蛙胸骨上的软骨及舌骨肌肉时，不要将各关节分离，同时注意保持韧带连接。按走向把骨骼上的肌肉大致剔除干净。

（4）精剔较小的肌肉。把动物体放入沸水中进行热处理，使肌肉收紧，更易剔除。热处理时间一般不超过1min。在剔除细小的肌肉时，不要弄散头骨或折断脊柱。

4.除去脑髓、脊髓和骨髓

将解剖针伸入脑颅中，轻轻捣碎脑髓，避免损毁颅底，再用注射器从眼眶插入，吸取脑髓。

5.腐蚀与脱脂

在塑料槽中倒入0.4%～0.8%氢氧化钠溶液，完全没过骨骼即可。将蛙主体以及附肢骨骼放入塑料槽，进行腐蚀和脱脂后取出，用清水洗去残留碱液，并用牙刷将残留的碎肉轻轻刷掉。

6.漂白

将骨骼浸入10%的过氧化氢溶液中2～3h，待骨骼变得洁白后取出，再用清水冲洗。仍需特别注意关节间的韧带与软骨，防止由于其断裂导致骨骼散落。

7.固定

腐蚀后被剔干净的骨骼标本可暂时置于70%酒精中，这样可使韧带变硬，利于成型。散落的骨骼可在骨连接处用胶水固定。

三、结果与讨论

在腐蚀实验中，氢氧化钠的溶解度会随温度的升高而升高，腐蚀性也会不断增强。因为蛙的骨骼小，最好使用低浓度的氢氧化钠溶液，并经常观察，避免骨骼被过度腐蚀。

在做解剖实验前，需认真了解骨骼系统构造，这样在解剖动物时能最大限度地避免损伤骨骼。解剖实验结束后，我先进行了剔肉处理，摸索出骨骼标本处理的最佳条件，并利用课余时间进行实验，完成骨骼标本的制作。

今后如果有时间，我还会去了解不同动物的骨骼结构，制作鱼类、爬行类、鸟类以及哺乳类动物的骨骼标本，进一步探究与完善实验方法。（指导老师：张兰柱）