猪场诊断实验室在猪病防控中的作用及其应用

冯建远 马青兰 郭 旋赵放英 刘德清 罗 伟 曾 香 张 宁

（广西农垦永新畜牧集团金光有限公司，广西南宁 530023）

在当前的养猪行业中，新病突发、老病复发或老病新型新发的情况不断出现，如非洲猪瘟的发生与威胁，猪丹毒、猪伪狂犬病、不同亚型的口蹄疫和高致病性猪繁殖与呼吸综合征的感染。此外，在猪场生产过程中还存在着不同程度的隐性感染、非典型症状感染和混合感染，使得兽医很难根据临床症状和病理变化进行确诊，必须依靠正确的检测结果进行判断。正确的鉴别诊断对于某种疾病的适时预警大有裨益，准确的诊断是猪病治疗的前提，抗体水平监测是制定科学合理免疫程序的关键，而这些工作的有序开展终究离不开实验室的支撑[1]。

相比市场上独立的经营性检测机构，养猪企业或猪场配备诊断实验室（以下统称为“猪场诊断实验室”）在猪病防控中的作用会更加明显，可以使检测更有针对性，结果更加快速、分析更加贴近生产一线，指导意见更能发挥猪场库存用药的习惯。

1 猪场诊断实验室在猪病防控中的作用

1.1 建立稳固的猪场生物安全体系

通过实验室的辅助作用，建立并加固猪场的生物安全体系，一是通过实验室检测把关好人流、猪流、车流和物流进入猪场的关卡，杜绝猪病传染源进入猪场，特别是在当前非洲猪瘟疫情防控中，通过有检测资质的实验室对待入或靠近猪场的人员、猪群、车辆和物资进行检测，及时将病毒隔绝在场外；二是通过实验室检测将感染猪只快速识别并清除，避免其他动物的感染与传播，比如某种特定疾病的净化；三是通过筛选有效药物、疫苗提高猪群的健康度，抵抗疾病的威胁。

1.2 针对性病原检测，快速确诊疾病，对症治疗

在猪场正常生产中，定期对猪场猪群进行病原学检测，了解猪群是否携带或感染某种病原，从而了解猪群的健康状况，一旦猪场生产情况出现异常或猪只发病，猪场诊断实验室可以第一时间到达现场，通过临床症状和病理变化对其进行初步诊断，再通过实验室针对性的及时检测，达到快速确诊疾病，采取科学合理的方案控制疫情，防止疾病的蔓延，减少猪场损失。

同时，对病原检测阳性的样品，可以进行进一步的实验室鉴定。比如分离细菌的亚型鉴定，区分某些病毒是野毒株还是疫苗株的感染，如猪伪狂犬病毒；也可以做到经典株和高致病性变异株的区分，如猪繁殖与呼吸综合征病毒。

1.3 细菌分离，了解细菌感染情况和耐药情况，更加科学合理用药

从猪场样品中分离鉴定的致病菌，猪场诊断实验室可以进行进一步的生物学鉴定，同时选择猪场常用药物进行药敏试验，这样可以了解猪场常见菌的分布情况、药物耐药情况，以评估阶段性用药效果，为猪场科学合理用药、更换用药提供依据。

1.4 抗体监测，监测猪群健康，制定和优化合理的免疫程序

按照制定的年度猪群主要疫病监测方案，对猪场各阶段猪群进行相应的抗体监测。

通过检测血清抗体的变化，了解猪群的整体免疫状况，及早发现问题，及早采取措施，对猪群的群体健康起到一种预警的作用。以常使用的IDEXX公司蓝耳病抗体S/P值为例，S/P值检测的是N蛋白，和蓝耳病病毒中和抗体没有任何相关性，它反映的是猪群的蓝耳病病毒波动状态。育肥猪发生严重呼吸道疾病，母猪出现发烧、流产、不食等症状，通过病原检测只有蓝耳病病毒甚至没检测到任何病原，其他项目抗体检测均未发现异常，只是此时S/P会出现急剧的升高，和临床症状基本是同步的。那么通过这一特性可以对公猪、后备猪等进行健康状态的监测，以判断公猪是否可用或后备猪能否入群[2]。

根据抗体消长规律，制定或优化合理的免疫程序。如对猪群各阶段的猪瘟抗体进行监测（见图1），阳性率低于30%或平均阻断率在45%左右时考虑进行首免[2]，确定猪瘟首免时间为4～5周龄；小猪伪狂犬gB抗体S/N值在0.3左右时考虑首免等[3]。

1.5 筛选有效的药物和疫苗

从猪场样品中分离鉴定的致病菌，兽医实验室根据猪场常用的药物对其进行进一步的药物敏感性试验或者消毒药的消杀试验，以评估目前所用药物的效果，也给猪场选择抗生素和消毒药提供依据，从而更加有效控制原发性和继发性细菌感染。

此外，合理的运用抗体检测手段有助于筛选出适合本场的优秀疫苗，如猪瘟抗体阻断率和中和抗体水平呈正相关，可以通过种猪免疫猪瘟疫苗后4～6周的猪瘟抗体水平来初步评价疫苗效果；伪狂犬gB抗体S/N值高低可以用来比较不同厂家伪狂犬疫苗的效果等[3]。

1.6 毒素检测，了解饲料霉菌毒素情况，防止霉菌毒素危害

猪场环境中和饲料中的霉菌毒素，不但会降低饲料营养、引起饲料资源浪费，而且还可能影响猪只的细胞代谢，抑制免疫系统机能，降低机体抵抗力。其中对猪只危害最为严重的主要有黄曲霉毒素（AFT）、赭曲霉毒素（OTA）、烟曲霉毒素/伏马毒素（FUM）、玉米赤霉烯酮（ZON）、呕吐毒素（DON）和T2毒素。猪场诊断实验室通过对饲料原料和成品料，以及猪场现场料槽等进行定期的取样检测，就可以了解饲料原料、成品料及猪舍环境中的毒素含量，并据此采取必要措施规避其危害。

1.7 疫病净化，制定并实施可行有效的疫病净化方案

通过对某种特定疫病病毒的抗体水平监测，了解猪场该特定病原的存在情况，确定感染猪群或猪只，制定适合猪场的净化方案。比如猪伪狂犬病，猪只一旦感染伪狂犬病毒，将会终身带毒，可以根据实验室的检测结果进行抗体筛查—淘汰—免疫等措施进行净化（图2）。

2 兽医诊断实验室工作的开展及注意事项

在兽医诊断实验室开展工作的过程中，不仅要注重检测的准确性和时效性，更为重要的是检测后数据的综合科学分析和防控措施的规划。因此，快速、准确的实验室诊断对于猪病防控的作用不言而喻，而如何确保检测结果的可靠、可信，则需要从采样、运输、检测、分析4个方面科学把握。

2.1 临床样品的采集与送检

2.1.1 血清学抗体监测

前腔静脉或耳缘静脉采血2～5 mL，血液4℃冷藏送样，避免震荡造成溶血。群体采集根据猪场情况具体实施，但应满足一定统计学意义（可参考不同规模养猪场疫病抗体监测样本推荐采样分布及数量参照表）。样品需4℃保存并及时送到实验室，越快越好，最好在24 h内送至实验室，一般不能超过48 h。

2.1.2 发病病原检测

选择临床症状典型、能代表整个猪群发病特点的病猪2～3头进行剖解，根据怀疑疫病采集病原嗜性组织，以淋巴结、扁桃体、肺脏、肾脏、脾脏、血样为主。作细菌性病原检测，应该选择送检前5～7 d内未使用抗生素治疗的待剖猪只。内脏病料的采取，不能选择死亡3 h以上的死亡猪只的病料。采样后4℃保存，运送至实验室后马上开展检测工作，如不能及时送至实验室或者实验室不能马上开展样品处理和检测，应－20℃冻存，严禁检测前反复冻融。

2.2 临床样品的检测与分析

全面、准确的检测结果分析对于防控措施的提出和实施至关重要。因此，除了将检测与分析有机结合外（如样品采集与处理的细节，检测环境的干扰等），还要根据猪场的实际情况考虑分析，包括猪场的饲养环境、管理水平、猪群的群体健康状况，以及发病猪只的发病情况和治疗情况，猪场历史疾病发生情况，猪场所在区域疾病流行现状等。并且做到猪场检测数据、检测结果、预防与治疗效果的持续性跟踪服务，只有这样，才能发挥兽医诊断实验室的最大效用。

2.3 兽医诊断实验室工作人员的要求

在开展兽医诊断实验室工作的过程中，对实验室工作人员的要求也很高：一是考量工作人员的细心和耐心，因为开展一项检测工作，准备工作比较繁琐，操作时间较长；二是工作人员要有一定的实验室操作经验，比如有经验的人员比较懂得选择合适的采样时机和采样部位。同时检测的仪器比较精密，试剂量小且易受污染，对工作人员的实操经验是很大的考验。三是工作人员要有扎实的猪场生产管理经验以及与猪场沟通的水平，这样对于检测数据的分析、处理措施的落实与跟踪，效果的评估很有意义，也保证了一项检测工作的有效性。四是猪场诊断实验室工作人员的培养成本也是一笔不小的开支，因此，要留住有经验的实验室工作人员，需要提供一定的收入水平和职业生涯平台。

3 小结

猪场诊断实验室在猪病防控中的作用举足轻重，无论是哪方面的应用，都应将检测与分析，实验室与猪场相结合，并做好持续性的跟踪。只有如此，才能发挥兽医诊断实验室的最大效用。科学专业的检测手段加之合理可行的解决方案远比免费的增值服务来的划算。据统计，如果猪场每年的实验室检测成本为2万元，那么通过专业的实验室检测并积极采取科学合理的保健和免疫措施，可挽回因发病而引起的经济损失和隐性损失20万～200万元。因此，兽医诊断实验室对猪病防控至关重要。

可以预想，由于更多的猪场诊断实验室更直接地参与到猪场生产中来，猪场预警系统必将越来越完善，终将有一天我们的猪场不用忙于“整天救火”，而是从容淡定地进行健康管理。