■ 宋锐 王金龙 付青山( 湖南省水产科学研究所; 沅江市畜牧水产事务中心)
草鱼属鲤形目鲤科雅罗鱼亚科草鱼属,是我国最主要的水产养殖品种,草鱼淡水养殖几乎遍布全国各地,2018年全国草鱼养殖产量550.43万t,占淡水养殖总量的18.59%。草鱼具有味美、生长快的特点,其养殖饲料价格相对较低而经济效益明显,深受消费者和养殖户的喜爱,但草鱼又具有多病、成活率低的特点,与草鱼有关的疾病有草鱼出血病、肠炎病、烂鳃病、寄生虫病等十几种。本研究使用3种常用杀虫药物(甲苯咪唑、敌百虫和辛硫磷)和3种中草药(博落回、狼毒大戟、婆罗子)的粗提产物,对寄生于草鱼的单殖吸虫的杀灭效果进行了评价。
常用杀虫药物购买自渔药店,均为国标药物;中草药使用用粉碎机制成粉末,然后在45 ℃的烘箱烘48h,以去除水分。称量药材之后用有机溶剂(甲醇,乙酸乙酯,水)进行浸泡提取。
实验用草鱼为1冬龄鱼种,选择个体大小一致(65±5g),选择10条镜检,指环虫感染率为90%,然后置于室内循环水系统暂养。暂养15d后,再次抽样10条镜检,发现指环虫感染率为100%,每条草鱼鱼体上寄生的指环虫数量为30~50条之间,进行下一步杀虫实验。每10条感染有指环虫的草鱼种被随机分配在循环水养殖缸中,水温维持在21~23℃。
将杀虫药物溶解后,配置成实验浓度,每个实验组设置3个平行,同时设置一个对照组(药物浓度见表1)。药物作用48h后,将所有实验用草鱼种杀死,取下鳃片,在解剖镜下记录指环虫的数量,并计算每个实验组和对照组中寄生指环虫的平均数。根据公式AE=(B~T)×100%B(AE是平均杀虫率,B是对照组指环虫平均数量,T是实验组指环虫平均数量)计算每个实验组平均杀虫率。
表1 杀灭指环虫的药物名称、使用浓度和作用时间
研究过程中,所有实验组和对照组草鱼种都没有出现死亡,不同平行组中指环虫的感染水平也没有显著差异。对照组和实验组,指环虫的平均感染强度为33.2。在所有实验组中,用药结束后对草鱼种鳃部指环虫进行检查时,基本没有观察到成熟的虫体。实验结果显示,在所有测试的药物和浓度范围内,敌百虫、博落回乙酸乙酯提取物和狼毒大戟乙酸乙酯提取物杀虫效果最好,敌百虫浓度为2.0和2.5、博落回乙酸乙酯浓度为60mg/L,狼毒大戟浓度为15mg/L,杀虫效率超过80%,分别是81.4%和90.2%,83.2%,81.7%,统计结果显示,这几种药物最高杀虫率之间没有显著性差异。婆罗子水溶液提取物杀虫效果最差,最高杀虫率为22.3%(600mg/L),显著低于敌百虫、博落回乙酸乙酯和狼毒大戟乙酸乙酯提取物的杀虫率。辛硫磷、甲苯咪唑和婆罗子乙酸乙酯提取物有中等程度的杀虫效果,最高杀虫率分别为73.1(1.5mg/L)、48.7(0.03mg/L)和50.1(600mg/L)。在所有测试药物中,杀虫效率随着药物浓度升高而增加。
本研究对三种常用药物(敌百虫、辛硫磷和甲苯咪唑)和3种中草药(博落回、狼毒大戟和婆罗子)不同提取方法(乙酸乙酯和水)的粗产物杀虫效果进行了评估。试验结果表明,传统杀虫药物敌百虫在所有测试浓度下,均有很好的杀虫效果,杀虫率随浓度提高而上升,最高杀虫率为90.2%;广泛使用的杀灭单殖吸虫的药物,甲苯咪唑只有中等程度的杀虫效率,最高杀虫率仅为48.7(0.03mg/L),并不适合作为指环虫的专杀药物;中草药中,婆罗子乙酸乙酯和水溶液提取物杀虫效果均没有达到60%,因此,不具备开发潜力;博落回和狼毒大戟乙酸乙酯提取物在一定的浓度下,对指环虫有很好的杀灭效果,而水溶液对指环虫并没有明显的杀灭效果。这一结果暗示,具有杀虫性能的活性成分存在于这两种中草药的乙酸乙酯提取物中,而杀虫活性成分很少溶解于水。测试结果显示,博落回和狼毒大戟乙酸乙酯提取物分别在60 mg/L和15mg/L浓度时,48h杀虫率超过80%。因此,博落回和狼毒大戟含有对指环虫的杀虫活性成分,这两种中草药有潜力开发成为低毒高效的抗寄生虫药物。