玻片离心沉淀法脑脊液细胞学检查在小儿中枢神经系统感染性疾病中的诊断价值

刘敏 周峥珍 郑台青

作者单位：410007 湖南长沙，湖南省儿童医院病理科

小儿中枢神经系统感染性疾病是指由细菌、病毒等致病原引起的中枢神经系统感染，如脑炎、脑膜脑炎等，此类疾病病死率极高［1-2］。脑脊液检查是诊断小儿中枢神经系统疾病的重要方法［3］，而玻片离心沉淀法是检验脑脊液的方法。本研究主要评价采用玻片离心沉淀法进行脑脊液细胞学检查对诊断小儿中枢神经系统感染性疾病的临床应用价值，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象及分组 选择2015 年5 月—2019 年5 月在本院住院治疗的185 例小儿中枢神经系统感染性疾病患儿作为研究对象。根据疾病分类分为化脓性脑膜炎组（62 例），病毒性脑膜炎组（62 例），结核性脑膜炎组（61 例）。另选60 例经检查无中枢神经系统感染性疾病的小儿作为对照组。

1.2 伦理学 本研究符合医学伦理学标准，并经本院伦理委员会批准（审批号：HCHLL-2020-14），所有对患儿的检测均获得过患儿家属的知情同意。

1.3 检测方法 3 组患儿入院后评估生命体征平稳及排除禁忌证后，在无菌条件下进行腰椎穿刺取1 mL 脑脊液并检测患儿脑脊液压力，腰椎穿刺术后嘱患儿平卧至少4 h。

1.3.1 常规细胞计数法 取0.5 mL 脑脊液采用常规方法进行细胞计数。

1.3.2 玻片离心沉淀法 取0.5 mL 脑脊液采用玻片离心沉淀法进行细胞计数［4-6］。本研究选用仪器为购自湖南赛特公司的FMU-6 细胞涂片离心沉淀仪。具体操作方法：将脑脊液滴入制作好的玻片沉淀孔内，置入离心机中，以700 r/min（离心半径为7.25 cm）离心5 min，待玻片上的沉淀物自然干透，将其置于水平位的染色架上，进行迈格姬染色。染色具体步骤：滴加迈格姬染液数滴至标本完全被覆盖为止，静置6 min 后加入95%乙醇（染液与95%乙醇比例冬季为1：1，夏季为2：1），以橡皮气球将染液与95%乙醇吹匀，静置4 min，弃去染液，用蒸馏水冲洗数秒；将玻片吹干，中性树胶封片、镜检，观察细胞学形态并进行计数和分类，查看有无异常细胞，计算异常细胞比例。

1.4 统计学方法 采用SPSS 22.0 软件分析数据，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（）表示，采用t 检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料 4 组受检者的性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。见表1。

表1 对照组及各组中枢神经系统感染性疾病患儿的一般资料比较

2.2 脑脊液常规细胞计数法与玻片离心沉淀法检测结果比较 3 组中枢神经系统感染性疾病患儿中，玻片离心沉淀法在脑脊液检查中异常细胞的检出率均明显高于常规细胞技术法（均P＜0.05）。见表2。

表2 常规细胞计数法及玻片离心沉淀法检测各组脑脊液细胞异常情况比较

2.3 玻片离心沉淀法检测各组小儿脑脊液的结果比较 各组患儿脑脊液中WBC 及异常细胞比例与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 玻片离心沉淀法检测对照组及各组中枢神经系统感染性疾病患儿脑脊液WBC 及异常细胞比例

3 讨论

儿童的免疫系统未完全发育成熟，尤其是婴幼儿，因此中枢神经系统感染性疾病在儿童中发病率和病死率均较高，其主要致病原因是细菌、病毒等侵入小儿中枢神经系统后引起的急性、亚急性和慢性疾病［7-8］。不同病原体引起的机体免疫系统反应不同［9-10］，细菌性感染可致中性粒细胞比例明显升高；而病毒性感染以淋巴细胞反应为主；结核性脑膜炎主要以混合细胞反应为主。脑脊液常规检查项目包括透明度、颜色、潘氏试验以及显微镜检等［11］，了解脑脊液细胞及生化指标差异可为抗感染药物的选择提供指导［12］，因此玻片离心沉淀法脑脊液细胞学检测能有效提供患者的脑脊液细胞学分类，对于临床分辨感染类型具有指导意义。

玻片离心沉淀法检验患儿脑脊液在国内众多专家的研究及改进下已经很好地应用于临床，其成本低，减轻了患儿家庭的经济负担，已成为临床小儿中枢神经系统感染性疾病诊断的“金标准”［13-15］。玻片离心沉淀法与以往的血细胞计数盘检测方法比较可长期保留、存档，随时取阅，并可以清楚地区分肿瘤性细胞和炎性细胞［16-17］。本研究显示，玻片离心沉淀法对于脑脊液中各类异常细胞的检出率明显高于常规脑脊液检查方法，采用玻片离心沉淀法对于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎及结核性脑膜炎中脑脊液异常细胞的检出率均达到100%，而常规细胞计数法对化脓性脑膜炎中的中性粒细胞检出率略高，很大程度上导致了误诊及漏诊。本研究提示，通过玻片离心沉淀法观察到的化脓性脑膜炎患儿脑脊液中嗜中性粒细胞升高程度远远高于结核性脑膜炎及病毒性脑膜炎，化脓性脑膜炎患儿脑脊液检查结果中可以发现嗜中性粒细胞明显升高及未见明显异常的淋巴样细胞，这与其细菌感染的特征相吻合。结核性脑膜炎患儿脑脊液主要以混合细胞学反应为特点。病毒性脑膜炎患儿脑脊液中以小淋巴细胞增多为主。通过异常细胞数及其所占比例的比较可以推断出感染类型，从而指导临床早期用药。本研究还显示，常规脑脊液细胞学检查只能简单区分单个核和多个核细胞，不能进行更具体的细胞分类及计数，也不能观察到细胞形态，而玻片离心沉淀法不仅能很好地进行细胞分类计数，更能观察细胞形态，并且能发现异常细胞。

综上所述，采用玻片离心沉淀法检查脑脊液细胞成分可以更好地分辨出异常细胞，对临床诊断小儿中枢神经系统感染性疾病具有指导意义。

利益冲突所有作者均声明不存在利益冲突