北京市鸡毒支原体和滑液囊支原体血清学调查

（北京市动物疫病预防控制中心，北京 102629）

鸡毒支原体（Mycoplasma galliscepticum，MG）和滑液囊支原体（Mycoplasma synoviae，MS）是禽类支原体中最具致病性的两个种。MG又称鸡败血支原体，主要引起鸡、火鸡的慢性呼吸道疾病[1]。MG 不同菌株的感染性和致病性不同，感染后的主要临床表现为流鼻涕、流眼泪、咳嗽，严重时呼吸困难或张口呼吸，可听到湿性啰音。临床上，MG 常常与某些细菌、病毒协同感染，导致呼吸道疾病症状加剧，死亡率升高[2]。MS 可感染鸡和火鸡，不同菌株的致病力有所不同[3]，可引起亚临床型上呼吸道感染[4]，以及关节炎和传染性滑膜炎，导致生长发育迟缓及胴体降级，甚至会激发免疫系统抑制[5]。MS 感染能使产蛋鸡群的产蛋量和蛋品质下降。目前MG 和MS 在养殖场（户）中普遍存在，两种病原感染的直接致死率并不是很高，但很难彻底治愈，往往因治疗不力而继发大肠杆菌感染，导致患病鸡体自身黏膜屏障保护力降低，造成免疫失败，继而诱发禽流感和新城疫等疫病，给养殖业造成很大经济损失。MG 和MS 除可水平传播外，还可垂直传播[6-7]。为掌握北京市MG 和MS 感染情况，2019 年从北京市10 个区127 个养鸡场（户）采集鸡血清样品，采用 ELISA 方法进行血清学调查，以期为制定MG 和MS 感染的控制措施提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

鸡毒支原体（批号BR844）和滑液囊支原体（批号BP864 和BR884）抗体酶联免疫检测试剂盒：美国爱德士（IDEXX）公司生产，购自北京协信诗华生物科技有限公司。主要仪器：酶标仪（SUNRISE）、洗板机、微量移液器等。

1.2 采样

在北京市10 个区，按两阶段抽样方法：第一阶段，按95%的置信水平，90%的预期场阳性率，10%的可接受误差，计算抽样场（户）数量。每季度应抽30 个场（户），实际每季度平均抽32 个场（户），根据养殖场（户）列表，采用系统随机抽样方法选定抽样场（户）。第二阶段，同样按95%的置信水平，90%的预期场内流行率，10%的可接受误差，计算场内抽检鸡只数量。每场（户）应平均抽30 只。考虑实际情况，每场平均抽31 只，根据鸡只序号，采用系统随机抽样方法选定鸡只。实际随机抽取了127 个养鸡场（户）共3 910 份鸡血清样品，其中规模场3 220 份、散养户690 份。样品涵盖不同日龄的鸡只。

1.3 检测方法

对采集的血清样品，采用上述抗体酶联免疫检测试剂盒（敏感性98%、特异性100%）检测。检测步骤及判定标准，按照试剂盒说明书进行。

1.4 数据分析

用Excel 整理采集到的数据，运用 SPSS 23 软件进行统计学卡方检验分析。

2 结果与分析

2.1 总体情况

随机抽取的127 个养鸡场（户）3 910 份血清样品中，共检出MG 抗体阳性场（户）113 个，场群表观阳性率为89.0%，真实阳性率为90.8%（95%CI：85.7%～95.9%）；抗体阳性血清3 087 份，表观样品阳性率为79.0%，真实阳性率为80.6%（95%CI：79.3%～81.8%）；检出MS 抗体阳性场（户）110个，场群表观阳性率为86.6%，真实阳性率为88.4%（95%CI：82.8%～94.0%），抗体阳性血清2 956份，表观样品阳性率为75.6%，真实阳性率为77.1%（95%CI：75.8%～78.5%）。具体结果见表1。

表1 北京市MG 和MS 抗体检测结果统计

2.2 不同区情况

北京市10 个区均有不同程度的MG 和MS 感染。其中：MG 场群阳性率均在78%以上，最高的达100%，样品阳性率均在59%以上，最高的达93.13%；MS 场群阳性率均在68%以上，最高的达100%，样品阳性率均在50%以上，最高的达94.53%（表2）。

2.3 不同季度情况

不同季度的MG 和MS 样品阳性率差异极显著（MG：χ2=7 487.67，P＜0.01；MS：χ2=5 829.32，P＜0.01）。第四季度的MG 和MS 场群阳性率和样品阳性率最低，第二季度样品阳性率最高，第三季度场群阳性率最高。具体结果见表3。

2.4 不同日龄情况

检测数据统计显示，不同日龄鸡群均有MG和MS 感染，样品阳性率差异极显著（MG：χ2=2 148.00，P＜0.01；MS：χ2=2 265.00，P＜0.01），MG 样品阳性率110～180 日龄最高，462 日龄以上最低；MS 样品阳性率251～320 日龄最高，462 日龄以上最低（表4）。

表2 不同区MG 和MS 抗体检测结果

表3 不同季度MG 和MS 抗体检测结果

表4 不同日龄MG 和MS 抗体检测结果

2.5 不同养殖类型情况

统计显示，不同养殖类型MG 和MS 样品阳性率差异极显著（MG：χ2=6 328.45，P＜0.01；MS：χ2=3 920.05，P＜0.01），规模化商品鸡场的MG 和MS 场群阳性率和样品阳性率均最高。具体结果见表5。

2.6 不同种类情况

统计显示，不同鸡群种类间的MG 和MS 样品阳性率差异极显著（MG：χ2=4 963.06，P＜0.01；MS：χ2=2 202.27，P＜0.01），其中蛋鸡的MG 和MS 样品阳性率均高于肉鸡，但MG 场群阳性率低于肉鸡，MS 场群阳性率高于肉鸡（表6）。

3 讨论

本次调查发现，2019 年北京市MG 样品阳性率为80.6%，场群阳性率为90.8%；MS 样品阳性率为77.1%，场群阳性率为88.4%，表明北京市鸡群普遍存在MG 和MS 感染，且感染程度较严重。

本次调查数据与国内报道的其他地区数据有较大差异。黄招玲等[6]2013 年对福建省4 个规模场进行MG 血清学调查，发现平均阳性率为47.22%。马爽等[7]检测了来自华北、华中、华南、东北、西北、华东地区11 个省（区、市）的21 962 份血清，发现MG 抗体阳性率为30.23%～54.67%。孟冬霞等[8]2011 年对山西省15个鸡场不同种类、不同日龄未免疫鸡的2 850 份血清，用MG 血清平板凝集试验进行了血清学调查，发现平均阳性率为24.35%。羊扬等[9]对广西地区3 个黄羽肉鸡养殖公司10 个鸡群的300 份血清进行MS 检测，发现抗体阳性率达96.3%。Sun 等[10]对2010—2015 年来源于国内16 个省（区、市）的鸡血清进行MS 抗体检测，发现抗体阳性率达63.2%。齐新永等[11]2014 年对上海市240 份血清检测MG 感染抗体，发现规模化蛋鸡和林地散养鸡的抗体阳性率分别为97.8%和93.3%，肉鸡上市前抗体阳性率达94%。以上数据说明，全国各地的MG 和MS 感染严重，但北京市更严重。可能原因有以下几点：（1）种鸡场未采取MG 和MS 净化措施，使病原垂直传播给后代，造成后代鸡群感染率较高；（2）部分鸡场生物安全设施较差，控制措施实施率低，导致病原水平传播从而引起鸡群阳性率高；（3）ELISA 方法敏感性较高，会出现部分假阳性；（4）抽样人员抽样时可能采取了便利抽样方式，影响了随机抽样的结果。

表5 不同养殖类型MG 和MS 抗体检测结果

表6 不同鸡群种类MG 和MS 抗体检测结果

本次调查发现，第四季度的MG 和MS 样品和场群阳性率均最低，第二季度样品阳性率和第三季度场群阳性率最高。每季度的样品采集时间分别为1、4、7、10 月的上旬。检测表明，MG 和MS一年四季均可发生，但第二、三季度高发。这与马爽等[7]2010—2015 年全国鸡群发病情况调查发现的MS 春季易暴发的结果一致。

从不同日龄的检测结果来看，各种日龄的鸡均可感染MG 和MS，但MG 阳性率110～180 日龄最高，MS 阳性率251～320 日龄最高，而MG 和MS 阳性率均为462 日龄以上最低。这可能是因为随着年龄增加，机体免疫力增强，鸡群感染概率减小。下一步将重点关注110 日龄以下鸡群的感染情况，以寻找采取措施的最佳时期。

从不同养殖类型的检测结果来看，种鸡场、规模化商品鸡场和散养户的MG 和MS 感染率均较高，其中规模化商品场最高。这可能与商品场饲养密度过大有关。种鸡场MG 和MS 样品阳性率在70%以上，场群阳性率在89%以上，提示种鸡场应制定净化方案，开展净化监测。在引种时务必严格把关，严禁从疫区引种，从源头上杜绝疫病的进入；加强种鸡群MG 和MS 监测及净化，逐渐降低鸡群中MG 和MS 感染率。

各养鸡场（户）应加强生物安全防护意识，建立并完善适合本场的生物安全体系。MG 疫苗应用较广泛的有F 株、6/85 株和ts-11 株；国内尚无MS 疫苗上市，国外已经有灭活苗和活疫苗用于生产，但价格较高，有条件的鸡场可进行疫苗接种。同时可以选择使用对支原体敏感的药物进行早期治疗。总之，建议采取包括加强生物安全、种鸡净化、疫苗预防和药物治疗在内的综合管理措施。

4 结论

调查表明，北京市不同类型鸡场以及不同种类、不同日龄鸡群的MG 和MS 感染均较严重，感染范围较广，10 个区均有不同程度的感染，每年第二、三季度更易暴发，提示北京市应采取综合管理措施，加强MG 和MS 的净化和防控。