萧铭明 胡一丞 潘荣华 何 前 陈奕彬 李色东
(1.广东恒兴饲料实业股份有限公司,广东 湛江 524073;2.湛江市海洋与渔业发展研究中心,广东 湛江 524039;3.农业农村部南海水产动物育种与养殖重点实验室,广东 湛江 524073)
我国是南美白对虾养殖大国,2018年南美白对虾养殖产量为111.8万吨(中国渔业统计年鉴,2019),所以自主选育适合我国气候、养殖条件的南美白对虾品种就尤为重要。此次评价的南美白对虾品系来源于南美白对虾新品种“中兴1号”。“中兴1号”是由中山大学和广东恒兴饲料实业股份有限公司合作选育的抗病南美白对虾新品种,是以白斑综合征病毒(WSSV)抗性为主要选育目标,经连续5代家系选育获得的品种。本实验通过对两个不同选育方向的南美白对虾品系的生长和抗病性状进行比较、分析,希望能够对现行选育方法和手段的效果进行评价,为今后的工作提供参考依据。
实验地点位于广东湛江恒兴南美白对虾国家级良种场(恒兴863基地),实验虾来源于“中兴1号”的两个不同选育方向品系(A品系和B品系)。A品系和B品系分别于2019年10月31日和11月3日放苗,实验开始时体长约为7厘米。
将实验虾混养于室内6.5米×6.5米×1.4米的正方体水泥池中,具有进水和排水功能。光照条件为自然光照,海水经三级过滤后方可使用。实验前将虾放在水泥池内设置的网箱里暂养,24小时后待虾稳定开始实验。每个家系随机挑选实验虾200尾,注射荧光标记来区分不同家系,每天8:00、12:00、17:00按时投喂,日投饲率为虾体重的8%~10%。每隔3天吸污1次,分别在实验第0天、第60天采样,每个家系每次采样50尾,测量体长、体重。
将实验虾养于室内玻璃钢化桶中,每个钢化桶容积为300升,设有排污口和进水管道,光照条件为自然光照,海水经三级过滤后方可使用。实验前分别在实验桶中暂养,待实验虾稳定后开始实验。每个品系设置两个平行桶,每桶随机放入40尾注射后的实验虾。攻毒实验设计3组实验,分别给两个品系的实验虾注射50微升WSSV(106拷贝/微升)、50微升CQIV(106拷贝/微升)和50微升VPA(105拷贝/微升)。注射了WSSV和CQIV的实验虾,每隔4小时记录每个品系的实验虾死亡数量;注射VPA的实验虾,前12小时每隔2小时记录每个品系的实验虾死亡数量,12小时后每隔4小时记录1次,实验时间为7天。结束后记录各品系实验虾的存活数量,统计平均死亡时间、死亡率和抗病评价指数。每天给每个实验桶投喂相等量的饲料,日投喂率为虾体重8%~10%。每天于9:00、17:30底排污两次。
式中,W1为时间t1时实验虾的体重,W2为时间t2时实验虾的体重。
经投喂感染后,以第一尾实验虾死亡的时间为0起点,以最后一尾死亡实验虾的时间基点顺延24小时为终点,从第一尾实验虾死亡的时间到终点间隔时间为B,式中,AI为时段实验虾死亡数,F为实验结束后实验虾的存活数,N为实验虾的总数。
实验数据在Excel 2016中处理,采用统计软件SPSS 19.0对数据进行单因素方差分析,P<0.05表示差异显著,并用prism 7.0作图。
由图1、图2可见,两个品系在第0天时,体长、体重无显著性差异(P>0.05),经过60天的养殖,A品系平均体长、体重分别长到(9.82±0.72)厘米、(8.72±2.21)克,体重特定生长率为1.46%/天;B品系平均体长、体重分别长到(11.00±1.14)厘米、(11.81±3.86)克,体重相对生长率为1.82%/天。养殖60天时B品系的体长、体重均显著高于A品系(P<0.05)。
图1 A品系和B品系体长均值变化情况
图2 A品系和B品系体重均值变化情况
由表1、图3可见,A品系对WSSV、CQIV和VPA的抗病评价指数均比B品系要高,抗病性更强,尤其是A品系注射VPA后平均死亡时间为(93.0±37.3)小时,显著高于B品系(P<0.05),平均死亡率较B品系低36.5%。综上所述,A品系相较B品系对WSSV、CQIV和VPA有更强的抗病性状。
表1 两个品系攻毒实验结果
图3 A品系和B品系攻毒过程中虾的死亡时间
生长实验结果显示,养殖60天后B品系平均体长、体重皆显著大于A品系(P<0.05),B品系的生长速度显著高于A品系。攻毒实验结果显示,A品系对WSSV、CQIV和VPA的抗病评价指数均高于B品系,说明A品系对WSSV、CQIV和VPA的抗病性更强。综上,对A、B两个品系的生长和抗病性状进行分析比较后发现,这两个选育的南美白对虾品系生长和抗病性状各有优劣,A品系生长速度较慢但抗病性较好,B品系则相反。