乙型肝炎肝硬化患者血清Chemerin、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白表达及其预后分析

杜尚春，秦建平

(1.成都市新都区第三人民医院消化内科，四川 成都 610504；2.西部战区总医院消化内科，四川 成都 610000)

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是全球常见的肝脏疾病，我国是HBV感染高发区，HBV携带者约占总人口的10%，若不及时治疗可发展为乙型肝炎、肝硬化、肝癌[1，2]。乙型肝炎肝硬化(Hepatitis B-liver cirrhosis，HB-LC)是由乙型肝炎反复发作而引起的弥漫性肝损害，晚期以肝功能损害和门静脉高压为主要临床症状，一旦发生肝硬化，疾病呈不可逆发展，发展为失代偿期HB-LC的患者死亡率明显升高，预后极不理想[3，4]。因此，寻找一种科学、实用、准确的评价方法，对做出HB-LC患者的预后判断尤为重要，准确的预后预测有助于制定个性化治疗方案，延长患者生存期。本研究探讨HB-LC患者血清Chemerin、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)的表达水平，其对患者预后的预测价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料2015年1月至2016年10月两家医院收治的185例HB-LC患者(HB-LC组)，纳入标准：①符合《慢性乙型肝炎防治指南》(2010年版)[5]诊断标准；②经血液学、生化、影像学等检查确诊为乙型肝炎肝硬化；③长期在我院随访；④相关资料完整。排除标准：①非乙型肝炎引起的肝硬化；②合并原发性肾脏疾病；③恶性肿瘤；④原发性高血压、心肺疾病；⑤代谢综合症；⑥合并血液系统疾病；⑦非肝病原因死亡；⑧失访或资料缺失者。男107例，女78例；年龄29～72岁[(49.05±8.21)岁]；肝功能Child-Pugh分级A级55例、B级69例、C级61例；病程4～19年[(11.79±3.46)年]；未婚22例，离婚或丧偶43例，已婚120例。选择同期健康体检者50例为对照组，各项检查均正常，既往无肝脏疾病，其中男28例，女22例；年龄30～71岁[(49.77±7.98)岁]。

1.2 标本采集及检测采集入选患者清晨空腹静脉血3 ml，室温静置1～2 h，4000 r/min离心15 min，分离上层血清，分装后存于-80 ℃冰箱待检。采用酶联免疫吸附法检测血清Chemerin、NGAL水平，使用日本东芝TBA-2000FR全自动生化分析仪检测，试剂盒购于上海蔚霆生物试剂有限公司，严格按照试剂盒说明书要求操作。

1.3 资料收集与分组制订统一的病例资料表格，记录受试者年龄、性别、既往病史、生化指标、血清Chemerin、NGAL等。所有HB-LC患者随访3年，死亡29例(15.68%)，根据预后情况，分为死亡组(n=29)和存活组(n=156)。

1.4 统计学方法采用SPSS 20.0软件分析数据。计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验；计数资料以[n(%)]表示，组间比较采用χ2检验；采用COX回归模型进行影响HB-LC患者预后的多因素分析，应用受试者工作特征(ROC)曲线和曲线下面积(AUC)分析血清Chemerin、NGAL对HB-LC患者预后的预测价值。P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HB-LC组与对照组临床资料比较HB-LC组血小板计数、血红蛋白水平低于对照组，HB-LC组AST、ALT、INR、总胆红素、血肌酐、血肾素、血清Chemerin、血清NGAL水平均高于对照组(P< 0.05)；两组年龄、性别比较，差异无统计学意义(P> 0.05)。见表1。

表1 HB-LC组与对照组临床资料比较

2.2 死亡组与存活组各指标比较死亡组血肌酐、血肾素、血清Chemerin、血清NGAL水平均高于存活组(P< 0.05)。见表2。

表2 死亡组与存活组各指标比较

2.3 影响HB-LC患者预后因素的Cox回归模型分析以HB-LC患者预后为因变量，年龄、血肌酐、血肾素、血清Chemerin、血清NGAL为自变量，进行Cox模型分析，结果显示，血肌酐、血清Chemerin、血清NGAL是影响HB-LC患者预后的独立因素(P< 0.05)。见表3。

表3 影响HB-LC患者预后因素的Cox回归模型分析

2.4 血清Chemerin、NGAL预测HB-LC患者预后的ROC曲线分析血清Chemerin预测HB-LC患者预后的AUC为0.850，截断值为101.64 ng/ml，约登指数为0.630，敏感性为75.86%，特异性为87.18%。血清NGAL预测HB-LC患者预后的AUC为0.892，截断值为178.47 U/L，约登指数为0.671，敏感性为79.31%，特异性为87.82%。血清Chemerin、NGAL联合检测预测HB-LC患者预后的AUC、敏感性、特异性均大于单独检测。见表4、图1。

表4 血清Chemerin、NGAL预测HB-LC患者预后的ROC曲线分析

图1 血清Chemerin、NGAL预测HB-LC患者预后的ROC曲线

3 讨论

肝炎肝硬化是全球性健康问题，主要由慢性HBV及丙型、丁型肝炎病毒感染引起的，患者由于长期处于持续病毒感染状态，肝脏在反复炎症、损伤刺激下，发生变性坏死，进而肝脏内纤维结缔组织异常增生和肝细胞再生，形成肝纤维化，肝脏逐渐变硬、变形，最终导致肝硬化[6，7]。HB-LC患者早期因肝脏代偿功能仍基本完整而多无明显临床症状，后期则表现为肝功能损害和门静脉高压，晚期则可能出现继发感染、上消化道出血、腹水、肝性脑病、癌变等，威胁患者的生命安全[8]。HB-LC病情难以控制，根据患者临床表现和肝组织病理，分为代偿性HB-LC和失代偿性HB-LC，前者主要表现为门静脉高压，后者多指中晚期肝硬化，患者表现为明显的肝功能异常和失代偿征象，存在多种严重并发症，导致预后不理想[9]。因此，了解影响HB-LC的预后因素，寻找可靠的评价方法，并采取有效的干预措施，具有积极的临床意义。

脂肪因子主要由脂肪组织产生，在脂肪浸润、炎症、肝纤维化的发展进程中扮演重要角色，亦可影响脂肪、葡萄糖代谢和胰岛素敏感性，促进代谢异常的发生，并调节纤维形成和血管生成[10]。因此，脂肪因子在肝脏疾病的发病机制中发挥重要作用。最近的研究表明，肥胖与慢性、低度炎症状态有关，这种状态可能会导致脂肪因子失调，而肝硬化在肥胖人群中发病率更高，肥胖是酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎及肝细胞癌中肝纤维化的独立危险因素[11]。Chemerin又称为维甲酸受体反应元件2，由163个氨基酸残基组成，主要表达与脂肪组织、肝脏、肾脏、肺脏等，肝细胞分泌相对高浓度的Chemerin与脂肪细胞产生的水平相似[12]。Chemerin可与其受体结合而发挥多种生物学效应，在血压调控、炎症介导、免疫应答、代谢综合征等方面都起一定作用，但国内有关Chemerin与HB-LC的报道较少[13]。本研究结果显示，HB-LC组血清Chemerin水平高于对照组，死亡组血清Chemerin水平高于存活组，血清Chemerin是影响HB-LC患者预后的独立因素，血清Chemerin预测HB-LC患者预后的AUC为0.850；提示血清Chemerin可能是HB-LC患者预后的独立预测因子，虽然存在一定局限性，但可与其他指标一起更好地评价HB-LC患者的预后情况。

NGAL是脂质运载蛋白lipocalin超家族成员之一，一般情况下，其在肾组织中的表达甚微，但当肾小管上皮细胞受到缺血、缺氧等刺激时，NGAL表达水平明显升高，通过抑制氧化应激反应、清除氧自由基、促进肾小管细胞再生、诱导炎性浸润细胞凋亡等机制发挥肾脏保护作用[14]。NGAL是众多肾损伤指标中出现最早的，能较准确地反映肾脏疾病的损伤和恢复过程。大量研究表明，肝硬化继发急性肾损伤的主要原因为肾前性和急性肾小管坏死，损伤的近端肾小管上皮细胞NGAL表达水平显著增加，NGAL被作为肝硬化继发急性肾损伤的早期诊断指标。本研究中，HB-LC组血清NGAL水平高于对照组，死亡组血清NGAL水平高于存活组，血清NGAL是影响HB-LC患者预后的独立因素，血清NGAL预测HB-LC患者预后的AUC为0.892；HB-LC患者血清NGAL表达水平与其预后有关，可能原因为中晚期HB-LC患者容易出现继发感染、上消化道出血、腹水、肝性脑病等并发症，这些并发症可能会导致血清NGAL水平升高，同时这些并发症也是中晚期HB-LC患者预后极差的重要因素。本研究还发现，血清Chemerin、NGAL联合检测预测HB-LC患者预后的AUC、敏感性、特异性均大于单独检测；提示联合检测可提高预测HB-LC患者预后的效能。

综上所述，HB-LC患者血清Chemerin、NGAL水平明显升高，可作为HB-LC患者预后的预测指标，联合检测应用价值更佳。