不同中西药物对急性软组织损伤的治疗作用研究

黄景慧，袁海龙，王梦真

空军特色医学中心药学部，北京 100142

急性软组织损伤是临床骨科一种常见病、多发病。损伤造成局部组织红肿、疼痛、毛细血管破裂，使患者行动能力受限，严重影响生活质量[1]。中重度疼痛的急性软组织损伤，经医师批准可使用阿片受体激动剂。虽然阿片受体激动剂具有快速镇痛作用，但不能缓解损伤造成的水肿、炎症、外周组织出血，也不能缩短创伤恢复时间[2]。因此，寻找针对急性软组织损伤具有快速治疗作用的药物具有重要意义。本研究在大鼠急性软组织损伤模型上评价一系列中西药物的抗炎镇痛作用，旨在筛选发现对急性损伤症状具有快速抗炎镇痛作用的潜在药物组合，为针对急性软组织损伤具有良好治疗作用药物的研发及临床应用提供了药理学参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 药物、试剂 阿司匹林肠溶片(Bayer HealthCare Manufacturing S.r.l.国药准字J20171021批号BJ45966)双氯芬酸钠缓释片(北京诺华制药有限公司国药准字H10980297批号X0747)塞来昔布胶囊(辉瑞制药有限公司，国药准字J20140072，批号x43537)氨酚羟考酮片(SpecGx LLC USA，国药准字J20171086，批号0512B02730)云南白药贴(云南白药集团股份有限公司，国药准字Z53020756，批号ZEB1932)活血止痛贴(安徽安科余良卿药业有限公司，国药准字Z34020905，批号20190660)奇正消痛贴(西藏奇正藏药股份有限公司，国药准字Z54020113，批号1905071)

1.1.2 动物 雄性SD大鼠，体重(180±25)g，由解放军302医院实验动物中心提供。

1.1.3 仪器 自制动物挫伤模型台、热板实验台、测量尺、游标、卡尺、显微镜等由解放军302医院实验动物中心提供。

1.2 试验方法

1.2.1 大鼠急性软组织损伤模型的建立 将大鼠于实验前脱去右后小腿部毛，将大鼠固定于软组织打击器上，选择小腿中部外侧软组织做好标记，0.2kg砝码自20cm的高度自由落下，直接打击大白鼠右下肢脱毛部位，连续同上操作5次，大鼠经打击后伤肢迅速出现肿胀、皮肤淤斑及皮下出血现象，表明急性损伤模型造模成功[3,4]。

1.2.2 药物对大鼠急性软组织损伤模型镇痛疗效研究 西药组随机分为5组，每组10只大鼠。根据临床人用剂量换算给药剂量分别为：塞来昔布组(Cel)21mg/kg，氨酚羟考酮组(Oxy)138mg/kg，双氯芬酸组(Dic)7.8mg/kg，阿司匹林组(Asp)6.25mg/kg，溶媒组(Veh)给予2mL生理盐水。在造模后每天灌胃给药一次。中药贴剂组随机分为4组，分别为云南白药贴组(Yunnan)，活血止痛贴组(Huoxue)及奇正消痛贴(Qizheng)组，贴剂均为2.5cm×2.5cm，溶媒组(Veh)给予同等面积胶布，每组10只大鼠，在造模后每天更换贴剂一次。

每日观察损伤处的红肿、瘀血情况，根据软组织损伤的评分标准(损伤症侯指数)进行评分。具体评分标准为：①有轻微红肿，但无瘀斑及行为障碍，0～1分；②有轻微红肿和瘀斑，但无行为障碍，1.1～2分；③有轻微红肿和瘀斑，以及轻微的行为障碍(能行走，不影响行动)，2.1～3分；④有明显红肿和瘀斑，行为障碍，3.1～4分；⑤严重的红肿和瘀斑，完全不能自发行走，4.1～5分[4,5]。

1.1.3 药物对大鼠急性软组织损伤模型镇痛作用研究 将急性软组织损伤模型大鼠置于温度为(52±0.2)℃的热板上，环境温度23℃～25℃，开始计时，直至出现疼痛反应(跳跃，舔后足)为止，累计时间即为痛阈值。给药前测定动物基础痛阈，选择基础痛阈在5～20s范围内的大鼠用于实验。每日在灌胃后每30min测定痛阈，比较前后大鼠痛阈值的改变。测时如大鼠60s无反应，应立即将其足离开热板避免烫伤，其痛阈以60s计算。按下列公式计算给药后最大镇痛百分率(maximum possible effect,MPE%)。在实验过程中为防止动物组织损伤，60s不出现疼痛反应则中止测定，记为镇痛100%。MPE%=(给药后痛阈值-给药前痛阈值)/(60 s-给药前痛阈值)×100%[6]。

2 结果

2.1 药物对大鼠急性软组织损伤恢复的影响Veh组大鼠24h内损伤症侯指数达到最高，之后逐渐降低至第7d恢复正常。Cel、Oxy及Dic组与Veh组比较损伤评分均显著降低(P＜0.001)，而Asp组与Veh组无显著性差异(P＞0.05)；Cel组组织损伤恢复最快，与Oxy、Dic、Asp组均有显著差异(P＜0.001)(图1)。

图1 西药组不同时间点损伤症状指数的变化。

图2 中药组不同时间点损伤症状指数的变化。

图3 西药组不同时间点MPE%的变化。

中药贴剂Yunnan组只在第2、3天与Veh组有显著差异(P＜0.05)，Qizheng组从造模后第1～6天均与Veh组相比，可明显改善损伤组织红肿状态，降低损伤评分(P＜0.001)(图2)。从绝对值上看，Qizheng组急性损伤组织恢复速度最快。

西药Cel组与中药贴剂Qizheng组比较，治疗第1～5天，Cel组的损伤评分显著低于Qizheng组(P＜0.05)，从第6天起两组无显著性差异(P＞0.05)。

2.2 药物对大鼠急性软组织损伤所致疼痛的影响Veh组小鼠痛阈值在给药后30～300min无显著性改变，Oxy组大鼠在给药30min后痛阈值显著升高(P＜0.001)，在150min药效达峰值，之后药效逐渐下降；Cel及Asp组给药后60min痛阈值均明显升高，Cel组给药后150min药效下降，Asp组给药后240min药效下降，Dic组大鼠在给药后90min痛阈值明显升高，180min后药效下降(P＜0.001)(图3)。

3 讨论

急性软组织损伤的机制为毛细血管破裂、出血，引发炎性反应，组织胺、5-羟色胺等炎性因子使微血管先收缩，后扩张充血，通透性增加，血管内的水、蛋白等物质从血管内渗入组织间隙，临床表现为局部疼痛、压痛、肿胀、青紫瘀斑、肢体活动功能障碍等[2]。本文研究的四种非甾体抗炎药物中，阿司匹林、双氯芬酸均为非选择性环氧酶(cyclooxygenase,COX)抑制剂，通过抑制下丘脑和外周前列腺素的合成和释放，起到抗炎、镇痛的作用[7,8]。塞来昔布能特异性抑制COX-2，阻止炎性前列腺素类物质的产生，达到抗炎、镇痛及解热的作用[9]。在大鼠急性软组织损伤模型灌胃给予塞来昔布、氨酚羟考酮、双氯芬酸均能促进软组织损伤恢复，其中塞来昔布疗效最佳，阿司匹林无显著作用，表明COX-2在急性软组织损伤发病机制中可能起到关键作用，选择性COX-2抑制剂产生较好促进损伤恢复的效果。

氨酚羟考酮是对乙酰氨基酚和盐酸羟考酮组成的复方制剂(每片含对乙酰氨基酚325mg，盐酸羟考酮5mg)。该药在乙酰氨基酚的外周抗炎镇痛基础上加入盐酸羟考酮激动中枢阿片受体加强镇痛作用[10]。本实验表明西药组均对大鼠急性软组织损伤模型表现出时间依赖性镇痛作用，其中氨酚羟考酮的急性镇痛起效时间短，作用最强，阿司匹林和塞来昔布起效晚于氨酚羟考酮，也表现出一定程度的镇痛作用，双氯芬酸起效时间最晚，镇痛作用最弱。虽然氨酚羟考酮的镇痛作用较强，但根据国家药监局、公安部、国家卫生健康委员会《关于将含羟考酮复方制剂等品种列入精神药品管理的公告》规定，口服固体制剂每剂量单位含羟考酮碱不超过5mg的复方制剂自2019年9月1日起列入第二类精神药品加强管理，该药物的临床应用受限。因此，寻找镇痛活性强且无中枢依赖的替代药物或研发新型的复方制剂组合具有重要意义。

云南白药贴为国家保密方，在静脉炎、乳腺炎等疾病的外敷治疗方面具有良好效果[11,12]，本研究在急性软组织损伤模型上发现该药物仅在个别时间点有效。活血止痛贴含有干姜、独活、牡丹皮等成分，文献报道对临床急慢性扭挫伤具有一定镇痛抗炎作用[13,14]，但对本研究模型不能促进软组织损伤恢复的作用。奇正消痛贴成分为独一味、棘豆、姜黄等，本实验显示可显著促进损伤恢复，与文献报道一致[15,16]。推测奇正消痛贴中某些活性成分可能对急性软组织损伤模型镇痛抗炎疗效更为显著，具体机制尚待研究。

综上所述，在大鼠急型软组织损伤模型上，一系列的中西药均表现出不同程度的治疗作用。塞来昔布、奇正消痛贴的促软组织损伤恢复效果最好；氨酚羟考酮镇痛作用起效最快，效能最强。本研究结果可为制定急性软组织损伤的救治方案或研制镇痛抗炎复方制剂提供实验证据。