桑叶水煎醇沉液对小鼠镇痛作用的研究

何喆　鲍翠俊

桑树为桑属植物桑科多年生落叶小乔木植物，每年可摘3～6次。生命力很强，中国是蚕丝业的发源地，栽桑养蚕具有500多年的悠久历史。本文通过小鼠镇痛实验，观察了桑叶乙醇沉淀物不同剂量组对小鼠的镇痛作用，为进一步研究桑叶乙醇沉淀物的有效成分及其镇痛作用奠定了基础，也为发现桑叶乙醇沉淀物的类型及其开发利用提供了实验依据。

一、材料与方法

1、动物

昆明种小鼠（普通级）200只。25～30g，由安徽科技学院实验动物中心提供（普通级）。

2、仪器

R20-型旋转蒸发器（上海申生科技有限公司）;SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）;FA-1004型电子天平（上海天平仪器厂）;TDL80-IB型台式离心机（上海安亭科仪器厂）;YP600型电子分析天平（上海精科电子厂）;RB-200型智能热板仪（成都泰盟科技有限公司）。

3、药材与试剂

（1）药材。桑叶：安徽科技学院中药园5月份采集，烘干，备用。

（2）试剂。无水乙醇（分析醇，上海建业化工有限试剂厂）;生理盐水（安徽环球药业限公司）;安乃近注射液（芜湖原奇制药有限公司）;冰乙酸（上海化学试剂有限公司）。

4、桑叶水煎醇沉液的制备

称取桑叶200g，置于不锈钢锅中，按照药物与蒸馏水1：8的比例往锅内加入1600mL蒸馏水浸泡30min，用电炉煎煮，先用武火水开后再用文火煮30min，使用8层纱布过滤。药渣复煎1次，第二次20min，合并2次煎液，浓缩、离心、定容至200mL，即得含生药1g/mL桑叶水煎液。取桑叶水煎液200mL，以3：7的比例加无水乙醇，使醇含量达70%，密封于4℃冰箱冷藏24h。滤液用旋转蒸发器回收乙醇（转速100 r/min，50℃），离心10min（转速3800r/min），最后定容为200mL（含生药1g/mL），即得桑叶水煎醇沉液，装瓶，备用。

5、试验方法

（1）热板法镇痛试验。从100只雌鼠中选取合格雌鼠50只，随机分5组，每组10只。

（2）扭体法镇痛试验。从100只小鼠中随机选取50只合格小鼠（雌雄均可），将选取的50只合格小鼠随机分5组，每组10只。

6、统计学处理

应用SPSS 17.0 统计软件进行统计学处理，其结果以（±SD）表示，统计学处理采用t检验。

二、结果与分析

1、桑叶水煎醇沉液对热板法所致小鼠镇痛作用的影响

表1的结果表明：给药前各剂量组差异不显著（p>0.05），给药后各组的痛阈值都有提高，阳性对照组痛阈值最高，生理盐水组最低。阳性对照组、高剂量组和中组剂量组与生理盐水组比较，差异极显著（p<0.01），低劑量组与生理盐水组比较，差异显著（p<0.05）;生理盐水组与阳性对照组比较，差异极显著（p<0.01），低剂量组与阳性对照组，比较差异显著（p<0.05），高剂量组和中剂量组与阳性对照组，比较差异不显著（p>0.05）;各剂量组之间差异不显著（p>0.05）。以上结果表明桑叶水煎醇沉液对小鼠有镇痛作用，中剂量组效果明显。

2、桑叶水煎醇沉液对扭体法所致小鼠疼痛的影响

表2结果表明：在第一次出现扭体反应15min内的扭体次数的比较中，阳性对照组与生理盐水组比较，差异显著（p<0.05），各剂量组与生理盐水组比较差异极显著（p<0.01）;生理盐水组和高剂量组与阳性对照组比较，差异显著（p<0.05），中剂量组和低剂量组与阳性对照组比较差异极显著（p<0.01）;各剂量组之间差异不显著（p>0.05），各剂量组之间扭体数降低。上述结果表明腹腔注射不同剂量的桑叶水煎醇沉液对小鼠有镇痛作用，其中高剂量、中剂量、低剂量组效果明显。

（作者单位：1.245702安徽省黄山市黄山区耿城镇农业综合服务站;2.245720安徽省黄山市黄山区永丰乡农业综合服务站）