一种保健功能青红酒30天喂养试验研究

朱贲峰 赵 立 阚永军 胡 娟,2

1. 福建省中医药研究院，福建 福州 350003；2. 福建中医药大学附属第二人民医院，福建 福州 350003

药酒在我国有着悠久的历史，以酒为载体，利用酒的辛温行散之性，以达到通经活络、畅通血脉、活血散瘀、祛风散寒、健脾胃、提精神，以达引药上行、助药物之力的功效。保健酒不同于药酒，其特点以健体、养生为目的，在满足消费者嗜好的同时对身体状态进行调节。药酒用于对疾病的治疗，而保健酒则重在对疾病的预防[1]。

以米粉、米糠、白粉土为基础配方，加入茯苓、当归、白芷、丁香、柴胡、藿香等数十味中药制成药白曲，并与黄精共同发酵，研制一款黄精青红酒。其富含粗多糖和总黄酮等功效成分[2]，具有缓解体力疲劳[3]、辅助降血糖之功效。

本文依据保健食品检验与评价技术规范，进行30天喂养试验，通过检测白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、中性粒细胞等血液学指标，观察黄精青红酒对大鼠造血系统和功能的影响；通过检测转氨酶、白蛋白、尿素氮、肌酐、血脂、血糖等血液生化指标，观察黄精青红酒对大鼠肝、肾损伤及代谢系统的影响。对产品进行安全性评价[4]。

1 材料和方法

1.1 样品 黄精青红酒，棕黄色液体，澄清透明、无肉眼可见的杂质、久置后允许有少量沉淀物，成品酒精浓度(14±1)% vol。样品常温保存，样品标示保质期24个月，成人人体推荐剂量100 mL/人/日(以60 kg体重计)，因人体推荐剂量大，本实验室使用为60℃减压浓缩方法，将受试样品浓缩为15倍浓缩液作为本次实验受试样品，折算成成人人体推荐剂量为6.67 mL/人/日。

1.2 实验动物 SPF离乳SD大鼠80只，雌雄各半。按体重随机分为对照组、高、中、低剂量共4组，每组20只，雌、雄各半。雌性动物初始体重为70～85 g；雄性动物初始体重为74～90 g。

1.3 剂量选择与受试物给予方式 设3.33、7.23、11.12 mL/(kg·bw)(低、中、高)三个剂量组，分别相当于人体推荐剂量的30、65、100倍。另设一个溶剂对照为0 mL/kg·bw。15倍浓缩液用50%(v/v)的酒基配制，调整各剂量组乙醇浓度最终为15%(v/v)。高剂量组用15倍浓缩液11.12 mL+50%(v/v)的酒基6 mL+无菌水2.88 mL，中剂量组用15倍浓缩液7.23 mL+50%(v/v)的酒基6 mL+无菌水6.77 mL，低剂量组用15倍浓缩液3.33 mL+50%(v/v)的酒基6 mL+无菌水10.67 mL，溶剂对照组用50%(v/v)的酒基6 mL+无菌水14 mL，灌胃量为20 mL/ (kg·bw)。

1.4 主要仪器 电子天平、离心机、全自动生化分析仪、血液分析仪等。

2 试验方法

各组动物给予基础饲料，供试品连续灌胃30天后，禁食隔夜，逐只称重，10%水合氯醛按3.5 mL/(kg·bw)腹腔注射麻醉，腹主动脉取血测其血液学指标和血液生化指标。

2.1 一般情况观察 每天观察并记录动物的一般表现、行为、中毒表现和死亡情况。

2.2 体重 每周称1次体重，观察每周体重变化情况。

2.3 血液学指标 取大鼠全血用血液分析仪测定其血红蛋白含量、红细胞计数、白细胞计数及其分类等。

2.4 血液生化指标 取大鼠血清，用全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、尿素氮、肌酐、血糖、甘油三酯等。

2.5 统计分析 用SPSS软件对各实验原始数据进行统计分析。各项指标进行方差齐性检验，不满足方差齐要求，用秩和检验进行统计处理；用单因素方差分析方法中多个试验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理，P﹤0.05差异有统计学意义。

3 结果与讨论

3.1 一般观察 各组动物一般表现和行为均未见明显异常、无中毒表现、无死亡。

3.2 黄精青红酒对大鼠体重的影响 雌、雄性大鼠第0天体重各剂量组与0 mL/(kg·bw)/d组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，即试验前大鼠的体重在各组间较为均衡。

3.3 黄精青红酒对大鼠血液学指标的影响 大鼠灌胃不同剂量的黄精青红酒30天，测定血液红细胞计数、血红蛋白水平、白细胞计数及其分类等指标。各项指标进行方差齐性检验，均满足方差齐要求，用单因素方差分析方法中多个试验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表1、表2可见，各项指标各剂量组与空白对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

性别剂量/[mL/(kg·bw)/d]动物数/只白细胞计数/×109/L红细胞计数/×1012/L血红蛋白/g/L雌0107.0±1.87.1±0.4138±53.33108.1±1.17.1±0.4142±77.23107.6±1.37.2±0.3137±511.12108.2±1.47.2±0.3140±7雄0109.0±1.27.4±0.2147±53.33108.6±1.57.4±0.3150±47.23107.4±3.17.5±0.3150±511.12109.9±2.37.2±0.3146±4

性别剂量/[mL/(kg·bw)/d]动物数/只淋巴细胞/%中性细胞/%单核细胞/%嗜酸性细胞/%嗜碱性细胞/%雌01085.3±3.010.6±2.93.0±0.60.5±0.20.2±0.13.331085.3±2.910.5±2.93.0±0.70.6±0.10.1±0.17.231086.4±2.510.0±2.82.5±0.80.4±0.20.1±0.111.121087.3±2.68.5±2.12.8±0.90.6±0.20.1±0.1雄01085.3±3.210.5±2.52.9±0.80.6±0.20.2±0.13.331084.7±3.110.9±2.63.2±1.30.5±0.10.2±0.17.231084.2±8.711.4±7.83.0±1.20.6±0.20.2±0.411.121083.9±4.011.8±3.32.8±1.00.7±0.70.2±0.1

3.4 黄精青红酒对大鼠血液生化指标的影响 大鼠灌胃不同剂量的黄精青红酒30天，测定血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、甘油三酯、尿素氮、肌酐及血糖的水平。各项指标进行方差齐性检验，雌性大鼠谷草转氨酶不满足方差齐要求，用秩和检验进行统计处理；其它指标均满足方差齐要求，用单因素方差分析方法中多个试验组与一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理。由表3、表4可见，雄性大鼠7.23 mL/kg·bw/d组总胆固醇低于空白对照组 (P<0.05)。此项虽有统计学差异，但数值在正常值范围内，且无剂量-反应关系，不认为具有不良生物学意义。其它各剂量组各项血液生化指标与空白对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

性别剂量/[mL/(kg·bw)/d]动物数/只谷丙转氨酶/U/L谷草转氨酶/U/L总蛋白/g/L白蛋白/g/L雌01034±6120±4252.4±1.834.1±1.23.331033±4131±854.3±2.234.7±1.37.231031±2115±1253.5±2.134.5±1.111.121030±6118±952.4±1.933.8±0.8雄01045±10146±2351.9±1.333.4±0.73.331041±5142±2251.4±2.733.1±1.67.231039±9139±1953.1±2.133.9±1.311.121041±6147±3052.2±2.633.0±1.4

性别剂量/[mL/(kg·bw)/d]动物数/只尿素氮/mmol/L肌酐/μmol/L总胆固醇/mmol/L甘油三酯/mmol/L血糖/mmol/L雌0107.14±1.6935±91.94±0.180.38±0.066.78±1.163.33107.69±1.9537±81.80±0.330.32±0.046.59±0.407.23106.15±0.7931±41.86±0.210.34±0.056.47±0.4811.12107.09±1.1432±41.71±0.250.35±0.046.08±0.71雄0105.60±0.8730±61.36±0.280.52±0.196.35±0.773.33105.54±1.0631±41.24±0.110.49±0.086.99±0.557.23104.84±0.6028±51.15±0.14*0.65±0.175.24±1.0511.12105.40±0.5031±41.25±0.180.57±0.146.40±1.54

注：与0g/(kg·bw)/d比较，*P﹤0.05。

4 结论

黄精青红酒以3.33 mL/(kg·bw)/d、7.23 mL/(kg·bw)/d、11.12 mL/(kg·bw)/d(相当于人体推荐量的30倍、65倍、100倍)的剂量给予大鼠30天，受试动物一般情况良好，体重无异常改变；血液学指标及生化指标结果显示，各项指标均在正常值范围内。30天喂养试验，给予动物人体推荐剂量100倍的黄精青红酒，未观察到有害作用。