针刺结合水疗对脑卒中后肌痉挛大鼠Gly表达水平的影响

冯丽娟 李梦晓

（1 成都中医药大学 四川 成都 610075）

（2 四川护理职业学院 四川 成都 610100）

肌肉痉挛和灵活性丧失是影响中风存活患者的最常见的并发症之一，卒中后肢体痉挛的患病率约为60%，甚至更高[1]。针刺疗法是传统中医治疗缓解脑卒中后偏瘫痉挛的重要方法，简单、无副作用[2]。水中运动疗法（水疗）是运动治疗方法之一，可一定程度恢复损伤后灵活性[3]。我们推测针刺结合水疗可能对脑卒中后痉挛性瘫痪有更好的治疗效果。抑制性神经递质甘氨酸（Gly）的降低是中枢神经受损后并发痉挛的原因之一[4]。本研究采用针刺申脉、照海，再结合水疗，进行脑卒中后痉挛性瘫痪大鼠神经功能缺损、肌张力评分及检测患侧脑组织中Gly含量，研究联合治疗对脑卒中后肌痉挛大鼠作用。

1.资料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 清洁级健康成年SD大鼠50只，雌雄各半，270-300g，购于成都中医药大学实验动物中心。

1.1.2 试剂 大鼠甘氨酸（Gly）ELISA试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 动物分组 50只大鼠适应性喂养1周，随机分为空白对照组、假手术组、模型组、针刺组和针刺结合水疗组，每组10只。

1.2.2 动物造模及评价 根据本实验室改良Zea Longa线栓法制作大鼠MCAO模型[5]。造模完成2h后，以Zea longa 5分制评定神经功能缺损状况：0分为无神经功能损伤症状，1分为不能伸展对侧前爪，2分为向外侧转圈，3分为向对侧倾倒，4分为意识丧失。采用改良Ashworth评分标准评估肌张力：0级为无肌张力增高，大鼠活动自如，1级为轻度肌张力增高，在屈伸过程中出现一过性停顿，2级为明显肌张力增高，但肢体尚易屈伸，有轻度共济失调，3级为明显肌张力增高，被动活动困难，有中度共济失调，4级为肢体屈伸受限，有重度共济失调。将Zea longa评分在1～3分、Ashworth评分在1级以上的大鼠纳入研究。经筛选，模型组、针刺组和针刺结合水疗组各有8只符合标准。

1.3 治疗方法

空白对照组、假手术组和模型组均正常饲喂，不作处理。针刺组：选择照海、申脉穴位进行针刺治疗。于造模第4d开始治疗，每天1次，持续7d。针刺结合水疗组：在针刺组的基础上，将大鼠放入42℃的温水中自由活动30min，出浴后用干毛巾为大鼠擦干身体，每天1次，持续7d。

1.4 行为学观察

于造模后的第3d和治疗开始后的第7d对所有大鼠进行神经功能缺损和肌张力评分，具体评分标准同1.2.2。

1.5 Gly含量检测

治疗结束后，3ml/kg体重的剂量经腹腔注射10%水合氯醛麻醉，然后取右侧半脑，取梗死边缘组织，匀浆后用于ELISA检测Gly含量。

1.6 统计学分析

数据采用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 针刺结合水疗对神经功能的影响

施以 MCAO后，模型组、针刺组和针刺联合水疗组电针组在治疗前则出现了对侧肢体无力、倾倒等症状，其神经功能评分极显著高于假手术组（P＜0.01）。治疗后，模型组神经功能缺损评分仍高于假手术组（P＜0.01），与模型组相比，针刺组神经功能缺损评分极显著下降（P＜0.01），相比于针刺组，针刺联合水疗组神经功能缺损评分进一步下降（P＜0.05），见表1。

表1 各组卒中大鼠治疗前后神经功能缺损评分比较（±s）

表1 各组卒中大鼠治疗前后神经功能缺损评分比较（±s）

注：与假手术组比较，##P＜0.05；与模型组比较，**P＜0.05；与针刺组比较，▲P＜0.05，下同。

组别 治疗前 治疗后空白对照组 0 0假手术组 0 0模型组 2.38±0.74## 2.25±0.71##针刺组 2.00±0.93## 1.38±0.74##**针刺+水疗组 2.12±0.83## 0.86±0.64##**▲

2.2 针刺结合水疗对肌肉张力的影响

MCAO后，模型组、针刺组和针刺联合水疗组在治疗前肌张力评分显著高于假手术组（P＜0.01）。治疗后，与模型组相比，针刺组肌张力评分显著下降（P＜0.01），与针刺组相比，针刺联合水疗组肌张力评分显著降低（P＜0.05），见表2。

表2 各组卒中大鼠治疗前后肌张力评分比较（±s）

表2 各组卒中大鼠治疗前后肌张力评分比较（±s）

注：与假手术组相比，##P＜0.01；与模型组相比，**P＜0.01；与针刺组相比，▲P＜0.05。

组别 治疗前 治疗后空白对照组 0 0假手术组 0 0模型组 2.10±0.74## 2.38±0.71针刺组 2.13±0.83## 1.25±0.71**针刺+水疗组 2.20±0.79## 0.63±0.52#▲

2.3 脑组织Gly含量

模型组Gly含量极显著低于假手术组（P＜0.01）；与模型组相比，针刺组以及针刺联合水疗组Gly含量极显著升高（P＜0.01）；且针刺联合水疗组Gly含量显著高于针刺组（P＜0.05），图1。

图 脑组织Gly含量

3.讨论

脑卒中偏瘫痉挛患者临床主要表现为神经功能缺损和肌群的肌张力增高[6]。本研究中，MCAO模型大鼠出现了神经缺损症状和肌张力升高，说明造模成功。针刺治疗后改善了神经缺损症状并降低了肌张力，联合水疗后，上述症状进一步缓解，说明针刺联合水疗比单独针刺有更好的疗效。

痉挛的发病机制目前多认为是由脑内神经递质变化引起中枢易化系统和抑制系统的失衡。Gly属于抑制性神经递质，可通过与突触后膜的甘氨酸受体结合，打开Cl-通道，刺激细胞外的Cl-跨膜内流，对运动神经元发挥突触后抑制效应，Gly浓度降低会导致脊髓中枢对α-γ运动神经元的抑制作用减弱，导致α-γ运动神经元兴奋性增高，肌肉持续收缩，肌张力增高，从而形成肌痉挛[4]。本研究从Gly释放的角度，探讨了针刺联合水疗治疗脑卒中后肌痉挛的作用机理。试验结果表明，肌痉挛程度与Gly含量负相关，模型组脑匀浆中Gly浓度极显著降低，而针刺与针刺联合水疗均可以使Gly水平回升，针刺联合水疗组的Gly浓度上升更为明显，说明针刺联合水疗能通过升高Gly水平来抑制卒中后的肌痉挛。

综上，水疗可以提高针刺对卒中后肌痉挛的疗效，其作用机理可能与升高Gly水平有关，Gly的升高使突触前抑制作用变强，降低α-γ运动神经元兴奋性，减轻痉挛，有助于神经功能的恢复，这可能是针刺联合水疗改善肌痉挛的机理之一。