冷冻精子复苏及人工输精

李德柏，李喜春，何 超

长春新牧科技有限公司，吉林长春 130000

1 精液复苏

1.1 精液复苏前的准备

精液复苏之前需要检查配种箱中温度计、秒表、解精杯、输精枪、枪套、镊子、剪刀、卫生纸以及长臂手套是否齐全；液氮罐中是否装满液氮且罐中冻精数目是否够用；调节水温的热水和凉水是否够用。

温度计校正后方可使用，调节水温严禁使用牛舍水槽内的水，恒温解冻杯在每次使用前先用温度计校正水温。

1.2 冻精复苏过程及注意事项

输精枪及枪套应提前预热，水平直视温度计刻度，将解精杯中水温调至38～40 ℃，用镊子夹取液氮罐中的冻精细管，将精液置于调好水温的解精杯中，计时45 s，用纸巾擦热输精枪，以靠近脸部不烫为宜，精液复苏后，用纸巾擦干细管表面水分，装枪细管剪剪开细管封口，将预热的输精枪外套固定于输精枪上，做好配种前精液保温工作。

液氮罐中正在使用的提桶内只能装1个大管精液，防止在精液提取的过程中对过多待用精液造成不良影响。精液复苏必须在避光处进行，每次只能复苏一根精液，从液氮罐取精液的过程中，提桶的提取高度要低于罐口10 cm。5 s内未能完成精液提取操作，则应将提桶再次放入液氮中，30 s后重试，从液氮中取出精液后，将冻精细管在空气中暴露 1～2 s，使液氮挥发，防止爆管。复苏水温38～40 ℃，复苏时间45 s，精液复苏时，冻精细管必须完全浸于水中。用纸擦热输精枪，以靠近脸部感觉枪体微热而不烫脸为宜。用细管剪剪掉细管封口时，剪口必须平整，且禁止将精液部分剪掉。输精枪套上外套后，检查输精枪外套是否固定到输精枪上。冬季配种时，输精枪及枪套应提前预热，并做好精液复苏后的保温工作。装枪后，尝试推出少量精液，观察精液能否正常流出，防止精液倒流和枪套堵塞。

2 人工输精

2.1 人工输精步骤

对发情牛进行保定，清理直肠内粪便，并用纸巾擦去阴门外的粪便，左手握拳，在阴门上方垂直下压，打开阴门，将输精枪斜向上45°角进入阴道，枪头达到子宫颈外口时，撕开枪套外的保护套，引导枪头进入子宫体进行输精。输精后缓慢拔出输精枪，观查输精枪外套的保护套是否脱落，避免精液流入输精枪外套的保护套内造成配种失败，最后对配种牛只进行详细登记，记录好配种时间和配种冻精编号。

2.2 人工输精操作细节

①输精枪进入阴道后枪头位置与手应平行前进。②握住子宫颈向前推，将阴道拉直，将枪头送抵子宫颈位置。③握住子宫颈口，闭合阴道穹窿，引导枪头进入子宫颈。④活动手腕握住子宫颈，使输精枪枪头部位穿过子宫颈。⑤输精前用手检查枪头在子宫体内的位置。⑥缓慢推动枪芯，将精液释放到子宫体内。

配种员每周应修剪一次指甲，配种时不允许佩戴戒指或手表等装饰物。配种前应该摸清子宫状态，确定是否为有胎牛，育成初配牛检查子宫发育是否正常有无生殖缺陷，对存在生殖缺陷牛只尽早淘汰。经产母牛检查子宫恢复情况有无产后恢复不良等情况。对于子宫未回复牛只暂停输精，子宫恢复正常后再对该牛进行配种。进枪时以向上进入分开的阴门前庭段后，略向前下方进入阴道宫颈段；输精枪头部到达子宫颈口时，撕开枪套外的保护套；用拇指和食指上下握住子宫颈口以闭合阴道穹窿并活动手腕引导枪头进入子宫颈。切勿使用蛮力，防止伤害阴道穹窿；输精枪头部进入子宫体 2 cm 处，用手指确定枪头位置并缓慢输精。若输精枪头超出子宫颈2.5 cm，精液就只能释放到一侧子宫角，影响受胎率。冻精解冻后应在10 min内完成输精操做。