张子鹏
(西北民族大学体育学院,甘肃兰州 730030)
肥胖发生率在不断提高,据估计,2030年全球肥胖者将超过11.2亿。肥胖并不只是一种病症,还是慢性病的诱因,肥胖已成为对人类健康影响的最大障碍。目前治疗肥胖的主要方式为饮食控制、药物和运动调节等。但研究表示,长期服用药物不仅增加患者经济压力,而且对机体也有毒副作用,。饮食调控对防治肥胖具有一定效果,但效果并不明显。目前,有氧运动是公认的有效减肥方式,备受国内外专家重视。以此,本文研究有氧运动对高脂饲料喂养大鼠血脂和骨骼肌的影响,为肥胖治疗提供参考。
1.1 材料 试验选择雄性SD大鼠80只,由沈阳医学院实验动物中心所提供。使用大鼠常用的饲料配方作为基础饲料,高脂饲料配方为:在每100 g基础饲料中添加10 g猪油、10 g奶粉、1个鸡蛋、10滴浓鱼肝油、250 g新鲜黄豆芽。高脂饲料的总能量为12.57 KJ/g,碳水化合物32.99%,脂肪41.48%、蛋白质25.53%。
1.2 主要试剂 试验试剂由南京建成生物工程研究所提供,包括葡萄糖测定试剂盒、甘油三酯测定试剂盒、总胆固醇测定试剂盒、高低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒、I-胰岛素放射免疫分析药盒(陈剑峰和万勇,2018)。
1.3 实验
1.3.1 肥胖动物模型 一周适应性饲养后进行高脂饲料分笼饲养,自由饮水。试验房的湿度设置为(50±10)%,温度设置为(22±5)℃,明暗周期为12/12,控制并记录大鼠的给食量和撒食量,每周定时称重。大鼠体重在第8周末已基本稳定,以膳食诱导肥胖大鼠和肥胖抵抗大鼠的判断标准,体重最快增加的1/3大鼠为肥胖鼠DIO,后1/3为肥胖抵抗大鼠DIO-R,中间大鼠为对照鼠。
1.3.2 分组干预 高脂喂养8周后,肥胖与肥胖抵抗大鼠模型成功。一共包括抵抗组、抵抗运动组;肥胖组、肥胖运动组;中间组、中间运动组6组。对所有小鼠继续饲喂高脂饲料7周,然后进行游泳训练。
运动组自由游泳训练共开展7周,水温32~36℃,游泳池水深50 cm,每只小鼠在游泳过程中的活动表面积为350 cm2。刚开始训练时长为10 min,时间逐渐增加,前两周每天运动40 min,之后每40 g体重与10 min确定大鼠的游泳时间,每周运动6 d。
1.3.3 标本收集 动物结束运动后24 h处死,禁食12 h,取血分成两份,制备血清和血浆。收集血清:3000 rpm离心10 min分离血清,密封在-70℃冰箱中保存,待测。
1.3.4 指标检测 使用Bechman自动化分析仪测定大鼠血清血脂,甘油三酯TG和胆固醇TC使用酶法检测;高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)使用酶修饰方法与清除法检测。使用蛋白免疫印迹法对骨骼肌FNDC5蛋白进行测试,制备样品蛋白质,测定蛋白质含量;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳;凝胶转膜和检查(童俊露等,2018)。
2.1 各组大鼠的脂肪量、体重和两者比的变化 试验结束时对比3组发现,脂肪量、体重与脂体比比抵抗组、中间组高,抵抗组对比中间组,脂肪量和体重比中间组低,没有改变脂体比。在对比肥胖组与肥胖运动组的过程中,脂肪量、体重、脂体比有所降低,数据差异具有统计学意义(P<0.05),中间运动组和中间组对比,体重具有明显的降低,数据差异具有统计学意义(P<0.05);抵抗运动组和抵抗组对比,改变并不明显,数据无差异(P>0.05),详见表1。
表1 脂肪量、体重和两者比的变化
2.2 大鼠血脂变化对比 肥胖组对比中间组,TC、TG、LDL-C比中间组要高,HDL-C比中间组低;肥胖组对比抵抗组,TG、LDL-C比抵抗组要高,HDL-C比抵抗组要低,抵抗组对比中间组,各指标并没有改变。对照组对比运动组中,肥胖运动组对比肥胖组,其中的TG和TC都有明显的降低,HDL-C具有明显提高,数据差异具有统计学意义(P<0.05)。中间运动组对比中间组,LDL-C、HDL-C、TG、TC并没有改变。抵抗运动组对比抵抗组,TC下降显著,其他三者没有改变,详见表2。
表2 各组大鼠的血脂变化情况 mmol/L
2.3 大鼠血清胰岛素与血糖变化的情况 试验结束后,对照组血糖并没有改变。肥胖组对比抵抗组、中间组,血清胰岛素比抵抗组、中间组要高。抵抗组对比中间组,并没有差异。肥胖运动组对比肥胖组,血清胰岛素和GLU具有明显的下降,数据差异具有统计学意义(P<0.05)。中间运动组对比中间组,GLU的下降明显;抵抗运动组对比抵抗组,没有明显的差别,详见表3。
表3 血清胰岛素与血糖变化的情况 mmol/L
2.4 大鼠骨骼肌FNDC5蛋白表达 由表4可知,运动训练针对骨骼肌FNDC5蛋白的表达主效应明显,没有明显的饮食主效应,两者没有明显的交互作用。通过此结果可以看出来,无论是普通饮食或者高脂饮食的大鼠,长期有氧运动训练能够进一步的提高骨骼肌FNDC5蛋白表达。另外,高脂饮食并不会对两者造成影响,高脂饮食也不会影响到大鼠骨骼肌FNDC5蛋白表达。
表4 大鼠的骨骼肌FNDC5蛋白表达对比
3.1 长期有氧运动对骨骼肌的影响 在动物学研究中,陈剑峰等对6周雄性小组开展了30 d自主轮转运动干预,结果发现,能提高小鼠股四头肌与海马区FNDC与PGC1-α基因表达。此团队还报道,对12周龄小鼠进行3周自主转轮运动干预能提高骨骼肌FNDC5、PGC1-αmRNA表达水平(陈剑峰等,2018)。童俊露等对雄性大鼠进行高脂饲养干预,随机将大鼠分为高脂饲养、正常膳食、高脂膳食、大蒜素补给运动组,并进行4周中等运动强度干预,结果发现,各组大鼠骨骼肌FNDC5蛋白水平变化并不明显(童俊露等,2018)。本研究中,在结束运动干预后取材,使用蛋白质印迹法检测大鼠FNDC5蛋白表达,通过有氧运动干预能使正常饮食大鼠骨骼肌得到提高。导致结果差异的主要是干预时间长短不同,研究中运动干预为4周对FNDC5蛋白表达水平的影响较小。
3.2 高脂饮食对于骨骼肌的影响 随着现代人们生活水平的不断提高,人们的饮食方式与生活方式发生改变,机体每天通过膳食摄取营养物质维持生命,但脂肪摄入过多或者体力活动少会导致机体能量不平衡,以此导致肥胖等疾病。
谭惠文等相关研究通过30 kg/m2以上个体对比了体重正常个体与BMI,此实验组指的是受试者的健康,划分肥胖个体维糖尿病足、单纯肥胖组与前驱糖尿病足。对比正常体重组,前驱糖尿病骨骼肌表达水平高于体重正常组,差别较为明显,单纯肥胖组对比糖尿病组的骨骼肌表达水平没有差异,对比体重组正常组的骨骼肌表达水平有所提高(谭惠文等,2017)。在本试验结果发现,高脂饮食组大鼠骨骼肌水平有所提高,和此试验结果一样。以此可以看出,骨骼肌表达与机体生理状态等因素关系密切,机体具备调定点,在机体状况异常时会触发此调定点,使机体进行自我保护,使骨骼肌FND5等蛋白水平上调,保证机体正常。
3.3 有氧运动对高脂饲料大鼠血脂的影响 在现代肥胖治疗试验过程中,创建试验动物模型尤为重要。 肥胖是由于长期能量摄入过多,超过机体能量消耗,体内多余能量转化为脂肪,并过度积聚而引起的营养代谢失衡性疾病。肥胖为科学界尤为重视的公共健康问题,以此产生了多种减肥方法。使用饮食调控就是主要方法,雷艳等利用实证表示,单纯饮食调控对减肥具有一定效果,但效果并不明显(雷艳等,2018)。有氧运动为最基础有效的减肥方法,Gutin等表示,有氧运动干预对预防肥胖非常有效。侯少伟等发现,有氧运动不仅能减肥健身,还能降低并消除营养性肥胖导致的并发症(侯少伟等,2019)。但杨晓龙等发现,单纯根据运动减肥并不是有效途径(杨晓龙,2018)。所以,要与高脂饮食结合提高治疗效果。相关研究表示,可以通过体重与血脂两个指标检测肥胖。通本研究发现,与中间组相比,肥胖组TC、TG、LDL-C升高,HDL-C降低;与抵抗组相比,肥胖组TG、LDL-C升高,HDL-C降低,与中间组相比,抵抗组各指标并没有改变。对照组对比运动组中,肥胖运动组对比肥胖组,TG和TC明显降低,HDL-C明显提高。中间运动组对比中间组,LDL-C、HDL-C、TG、TC并没有改变。抵抗运动组对比抵抗组,TC下降显著,其他三者没有改变。所以得出结论,有氧运动对大鼠血脂水平有改善作用,且饮食控制和有氧运动联合具有良好的干预效果。
有氧运动能对高脂饮食诱导血脂异常进行改善,其机制和骨骼肌表达、血脂具有密切关系。使用高脂饮食能复制肥胖与肥胖抵抗模型,肥胖大鼠对比肥胖抵抗大鼠有具脂代谢紊乱的情况,肥胖敏感性大鼠存在胰岛素抵抗。利用长时间的有氧运动可以增加机体能量能耗,降低体脂,对机体脂代谢紊乱有改善作用,从而缓解胰岛素抵抗。