马庆华,边禄森,王兴红,封焕英,范宇光,余海,刘学,张永安,*
(1.中国林业科学研究院华北林业实验中心,北京102300;2.长白山科学研究院,长白山生物群落与生物多样性吉林省联合重点实验室,吉林安图133613)
猴头菌属(Hericium Schrank)隶属于担子菌门(Basidiomycota)、伞菌纲(Agaricomycetes)、红菇目(Russulales),猴头菌科(Hericiaceae)[1-3],是一种重要的药食两用菌[4-5]。本属菌类不仅营养丰富,味道鲜美,而且含有丰富的多糖、萜类、蛋白质、氨基酸、脂肪酸、矿质元素等物质,具有增强机体免疫力、降血糖、保肝护胃、抗肿瘤、抗溃疡、抗炎症、抗氧化等功效[6-9],市场前景十分广阔。
猴头菇作为传统的林副产品,采用林下仿野生栽培方式较其他人工栽培方式可节约农业用地,提高品质,使产品更安全、有机、绿色。自2016 年开始,笔者所在课题组针对北京山区生态特点开展了猴头菌林下栽培研究,猴头菌长势良好,产量高,栽培管理相对简单,且在生产过程中利用大量的林木枯枝,采收后的基质可用于还林养林,使林木与食用菌形成生物间的互利关系,实现“以林养菌、以菌促林”的良性循环。
本研究采用课题组林下培育的两种猴头菌[猴头菌 Hericium erinaceus(Bull.)Pers.和珊瑚状猴头菌 H.coralloides(Scop.)Pers.]子实体为材料,测定其子实体多糖、三萜、矿质元素及18 种氨基酸含量等,并对其蛋白质营养价值进行分析,以期为猴头菌的推广和应用提供理论依据。
猴头菌(Hericium.erinaceus)菌种 HE5:中国林科院中国林业微生物保藏管理中心提供;珊瑚状猴头菌(H.coralloides)菌种SH2:长白山科学研究院提供,由采自长白山国家级自然保护区的野生珊瑚状子实体分离并驯化。栽培地点:北京门头沟九龙山自然保护区针阔混交林。
Foss 2000 全自动凯氏测氮仪:福斯分析仪器公司;L-8900 全自动氨基酸分析仪:日立高新技术公司;Mars6 微波消解仪:美国 CEM Corporation;MM400冷冻混合研磨仪:德国莱驰Retsch GmbH;UV1901 紫外可见分光光度计:上海奥析科学仪器有限公司;LGJ-10 冷冻干燥机:北京松源华兴科技发展有限公司;PE AA800 原子吸收分光光度计:岛津上海实验器材有限公司;18 种氨基酸标准品:Sigma-Aldrich 公司:各元素标准溶液1 000 μg/mL:国家有色金属及电子材料分析测试中心;香草醛、齐墩果酸、钼酸铵、钒酸铵、硝酸、H2O2:北京国药集团;其它试剂均为国产分析纯。
1.3.1 猴头菌中营养成份的测定
蛋白质含量测定参照GB 5009.5-2016《食品安全国家标准食品中蛋白质的测定》,蛋白质系数为4.38;粗多糖含量参照NY/T1676-2008《食用菌中粗多糖含量的测定》;水分含量参照GB 5009.3-2016《食品安全国家标准 食品中水分的测定》;磷含量参照GB 5009.87-2016《食品安全国家标准食品中磷的测定》;硒含量参照GB 5009.93-2017《食品安全国家标准食品中硒的测定》;钙、铜、铁、钾、锰、锌含量参照GB 5009.268-2016《食品安全国家标准食品中多元素的测定》;氨基酸组成分析参照GB/T 5009.124-2016《食品安全国家标准食品中氨基酸的测定》;色氨酸含量通过加入15 g/L 的氢氧化锂溶液进行碱水解,采用高效液相色谱法测定;三萜类物质含量测定参照《中华人民共和国药典》2015 版(一部)(简称《中国药典》)灵芝三萜及甾醇的测定方法。
1.3.2 营养价值评价方法
氨基酸评分(amino acid score,AAS)、化学评分(chemical score,CS)、必需氨基酸指数(essential amino acid index,EAAI)、生物价(biological value,BV)、营养指数(nutrient index,NI)的评价方法参考 Bano 等[10]和联合国粮食及农业组织(Food and Agriculture Organization of the United nations,FAO)的方法[11]。
1.3.3 数据统计分析
除水分含量外,所有数据均是基于干品通过3 次重复试验所得。由SAS 8.2 软件通过一般线性模型(general linear model,GLM)进行显著性分析,分析方法为Duncan's 多重范围检验,显著性水平为α=0.05。
本研究中两种猴头菌多糖和三萜类物质含量存在显著差异,具体结果见图1。
图1 两种猴头菌子实体多糖和三萜类物质含量Fig.1 Contents of polysaccharide yield and triterpenoids in fruiting bodies of two Hericium species
珊瑚状猴头菌SH2 子实体多糖和三萜含量均显著高于猴头菌HE5。其中,珊瑚状猴头菌SH2 子实体多糖含量为7.04%,三萜含量为2.61%;猴头菌HE5子实体多糖含量为6.29%,三萜含量为1.84%。珊瑚状猴头菌SH2 与猴头菌HE5 相比多糖和三萜含量分别增加了11.86%和41.82%。
两种猴头菌子实体矿质元素含量丰富,具体结果见表1。
相比较来说,两种猴头菌子实体钙、钾和锌含量没有差异,磷、铜、铁、锰和硒含量存在显著差异。猴头菌HE5 与珊瑚状猴头菌SH2 相比,磷、铜、铁、锰和硒含量分别增加了39.54%、134.09%、196.77%、93.68%和29.84%。
两种猴头菌的氨基酸组成比较结果见表2。
猴头菌HE5 和珊瑚猴头菌SH2 子实体氨基酸种类齐全,总氨基酸含量分别为18.60%和16.30%,必需氨基酸含量分别为7.69%和5.26%。猴头菌HE5 总必需氨基酸含量和E/T 均显著高于珊瑚状猴头菌SH2,并且猴头菌HE5 子实体中天门冬氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、胱氨酸均高于珊瑚状猴头菌SH2,分别增加28.26%、36.0%、55.10%、92.5%、115.38%、175.0%,尤其是猴头菌HE5 蛋氨酸含量极显著高于珊瑚状猴头菌SH2(分别为0.51%和0.003%)。
表1 两种猴头菌子实体矿质元素含量Table 1 Mineral elements content in fruiting bodies of two Hericium species
表2 两种猴头菌子实体氨基酸组成Table 2 Amino acid composition in fruiting bodies of two Hericium species
两种猴头菌子实体蛋白质营养价值评分结果见表3。
表3 两种猴头菌子实体蛋白质营养价值评分Table 3 The nutritional value of protein in fruiting bodies of two Hericium species
采用国际通用标准对猴头菌蛋白质营养价值进行评价,由于半胱氨酸与酪氨酸可分别由蛋氨酸与苯丙氨酸转变而成,所以将半胱氨酸和蛋氨酸,酪氨酸和苯丙氨酸分别合并计算。猴头菌HE5 子实体中苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸+胱氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸、赖氨酸的AAS 评分均超过90,异亮氨酸和亮氨酸的AAS将近 90,色氨酸 AAS 最低(66.84),故猴头菌 HE5 第一限制氨基酸为色氨酸。相比较来说,珊瑚状猴头菌SH2 子实体中苏氨酸、缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸的AAS 均超过90,其余4 种氨基酸均低于90,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸(AAS 为22.59)。
猴头菌HE5 子实体中18 种氨基酸CS 评分均低于80,第一限制氨基酸为色氨酸(CS 为41.78)。珊瑚状猴头菌SH2 中除苏氨酸和亮氨酸的CS 接近100外,其余均低于80,第一限制氨基酸为蛋氨酸+胱氨酸(CS 为14.37)。两种猴头菌的必需氨基酸指数、生物价与营养指数结果见表4。
表4 两种猴头菌的必需氨基酸指数、生物价与营养指数Table 4 The indexes of EAAI,BV and NI of two Hericium species
EAAI 用以评价食物蛋白质的质量,根据相关EAAI 实用评价标准:EAAI>95 为优质蛋白源,86<EAAI<95 为良好蛋白源,75<EAAI<86 为可用蛋白源,EAAI<75 为不适用蛋白源[7-8]。依据 EAAI,猴头菌 HE5为良好蛋白源,珊瑚状猴头菌SH2 为可用蛋白源。BV值越高,表明该种蛋白质吸收消化后的利用程度就越高,与珊瑚状猴头菌SH2 相比,猴头菌HE5 中蛋白质更容易被机体吸收利用。NI 是由EAAI 及蛋白质含量计算而得到,两种食用菌的NI 均超过10,且HE5 的NI 高达 20.49。
依据FAO/WHO 提出的理想蛋白质标准:组成蛋白质的必需氨基酸总量/总氨基酸的值应达总量的40 %左右,必需氨基酸/非必需氨基酸的值应在60%以上。猴头菌HE5 达到理想蛋白源的标准,这与李巧珍等[12]的报道相一致,尤其是猴头菌HE5 子实体Met+Cys 的AAS 评分为均超过100,表明猴头菌HE5 蛋白质中含有丰富的Met+Cys。相比较来说,一些食用菌中Met+Cys 的AAS 评分常常低于100,为第一限制氨基酸,如秀珍菇、金福菇、香菇、杏鲍菇分别为51、27、71和29[13]。
本研究引进的猴头菌HE5 和珊瑚状猴头菌SH2均含有丰富的矿质元素,与张楠等报道的结果类似[14]。并且,本研究中两种猴头菌Ca 含量(247.35 mg/kg~324.17 mg/kg)高于何晋浙等报道的猴头菌中Ca 含量 (110.14 mg/kg~172.47 mg/kg)[15];其中 Zn 含量(80.63 mg/kg~83.74 mg/kg)高于香菇、野生牛肝菌和乳菇 Zn 含量(9.8 mg/kg~21.6 mg/kg)[16];其中锌、铁、钙含量显著高于香菇、平菇、金针菇、杏鲍菇、黑牛肝菌中相应元素含量[17]。
本研究引进的猴头菌HE5 和珊瑚状猴头菌SH2子实体多糖含量分别为6.29%和7.04%。相比较来说,段丹等对比了33 株不同来源猴头菌菌株的多糖含量,其中6 个菌株多糖含量介于5.0%~6.2%,其它27个菌株多糖含量均低于5.0%[18]。周春晖等研究表明,猴头菇子实体多糖含量为0.66%[19]。李巧珍等研究表明,猴头菌成熟期多糖含量为2.4%[20]。何晋浙测定5 种不同地区采集的猴头菌子实体多糖,其平均含量为2.15%[15]。张楠等研究表明,猴头菇中多糖含量为3.06%~3.39%[14]。本研究采用香草醛-高氯酸比色法测定食用菌子实体三萜类物质含量,猴头菌HE5 和珊瑚状猴头菌SH2 萜类物质含量分别是1.84%和2.61%,两者均高于闫梅霞等报道的松杉灵芝萜类物质含量(0.57%~1.26%)[21],高于何晋浙等报道猴头菌丝体萜类物质含量(1.79%)[22]。并且,已有研究表明,猴头菌提取物对于降低血脂和血糖[6,23]、增强机体免疫力[8]、提高抗氧化活性[24-25]、抑制肿瘤细胞增殖等[26]也表现出明显的作用。
综上所述,猴头菌HE5 为优质蛋白源,具有更高的营养价值;珊瑚状猴头菌SH2 含有较高的多糖和萜类物质,表现出潜在的药用价值,这两种猴头菌均含有丰富的矿物质元素,关于这两种猴头菌化学成分和药理特性有待于深入研究。