张 婷,邓爱华,易梦媛,易明霞,李林峰,李青洋
(湖南文理学院 生命与环境科学学院,湖南 常德 415000)
朝鲜蓟,别名菜蓟、法国百合,为菊科菜蓟属多年生植物,是一种营养价值较高的保健蔬菜,有“蔬菜之王”的美誉[1-2]。朝鲜蓟不仅具有提高肝脏的活力、促进肝脏排毒、促进肝脏细胞再生、增进胆汁的分泌和脂肪的消化、抗氧化、抗高血脂保护心血管、改善功能性消化不良的作用,而且对恶性细胞也有一定的功效[3]。目前,朝鲜蓟花苞主要用于制作罐头,利用率只有1/3,大量的外苞叶浪费。试验以项目组开发的朝鲜蓟发酵茶为原料[4-6],进一步研究朝鲜蓟发酵茶的泡制工艺及抗氧化性能,为朝鲜蓟发酵茶的市场推广及功效提供理论参考。
朝鲜蓟茶,常德市鑫盛生物科技有限公司提供;总抗氧化能力(T-AOC) 测定试剂盒,南京建成生物工程研究所提供。
HJ-6 型磁力搅拌器,上海国华仪器公司产品;ELx800 型全自动酶标仪,上海赛默生物科技有限公司产品;EL104 型电子天平,梅特勒- 托利多仪器有限公司产品;UV-1600 型紫外分光光度计、PHS-25 型pH 计,上海精密科学仪器公司产品;YB-700A 型高速多功能粉碎机,浙江速峰公司产品。
1.2.1 工艺流程朝鲜蓟发酵茶粉碎→过筛→称量→袋装→封口→朝鲜蓟袋泡茶→泡制→感官评分。
1.2.2 感官评定方法
感官评分表参照GB/T 23776—2009《茶叶感官评审法》 和GB/T 24690—2018《袋泡茶》 制定,结合了朝鲜蓟泡茶后的特点,对品质特征的标准做了部分修改,以香气、汤色、滋味进行感官评分,满分为100 分。
朝鲜蓟袋泡茶感官评分标准见表1。
1.2.3 抗氧化性测定通过体外抗氧化试验ABTS 法和DPPH 法来检测朝鲜蓟袋泡茶的抗氧化能力。
表1 朝鲜蓟袋泡茶感官评分标准
ABTS 法计算公式为:
朝鲜蓟茶总抗氧化能力(mM) =-1.121 4×测定OD 值+1.126 2。
DPPH 法计算公式为:
朝鲜蓟茶总抗氧化能力(mL) = [(测定OD 值-对照OD 值)/0.3]×反应液总量×样本测试前稀释倍数/取样量。
1.3.1 包材的选择
取2.5 g 朝鲜蓟发酵茶,粉碎过筛,分别用5 cm×7 cm 的无纺布袋、滤纸袋、尼龙纤维袋包装成袋泡茶。置于透明玻璃杯中加入250 mL,于90 ℃下热水冲泡15 min,对包材影响进行评价。
1.3.2 单因素试验设计
取2.5 g 朝鲜蓟袋泡茶,冲泡时间15 min,冲泡水温85 ℃,加水量200 mL,粉碎度40 目,分别考查袋泡茶净含量(2.0,2.5,3.0,3.5 g)、冲泡时间(5,10,15,20,25 min)、冲泡温度(75,80,85,90,95 ℃)、加水量(100,150,200,250,300 mL)、目数(<10,10~20,20~40,40~60,60~80 目) 等因素对朝鲜蓟袋泡茶感官评分的影响。
1.3.3 响应面试验设计
在单因素试验结果的基础上,采用Box-Behnken设计原理,选取对朝鲜蓟袋泡茶影响较大的4 个因素冲泡时间(A)、加水量(B)、冲泡温度(C)、粉碎度(D) 为自变量,每个因素的高中低水平分别以0,1,-1 进行编码,以朝鲜蓟袋泡茶的感官评分为响应指标(Y),进行响应面试验设计因素与水平设计。
响应面试验因素与水平设计见表2。
对3 种不同包材朝鲜蓟袋泡茶的汤色、香气、滋味等方面进行综合评价。尼龙纤维包材冲泡的茶颜色浑浊,不透明,出现少量沉淀,香味较沉重,苦味较重,说明尼龙纤维袋孔径过大,不适宜作为朝鲜蓟袋泡茶的包材;滤纸包材冲泡的茶,在前5~10 min 茶汤色浅,香气及口感较淡,可能是孔径过密,有效成分释放较慢,不宜作为朝鲜蓟泡茶的包材;无纺布包材冲泡的茶,汤色透明,无沉淀,香气滋味较好,因此选择无纺布作为朝鲜蓟袋泡茶的包材。
表2 响应面试验因素与水平设计
2.2.1 冲泡时间的影响
冲泡时间对感官评分的影响见图1。
由图1 可知,冲泡时间太短,朝鲜蓟有效成分释放不完全,汤色较浅,香气不够浓郁,口感风味较淡;随冲泡时间的延长,茶汤颜色也逐渐加深,由浅黄逐渐变成棕黄,有效成分全部进入茶汤;冲泡时间过长,茶汤口感苦涩,色泽浑浊,合适的冲泡时间为20 min。
2.2.2 加水量的影响
加水量对感官评分的影响见图2。
由图2 可知,当加水量低于150 mL 时,朝鲜蓟袋泡茶吸收水分沉入杯底,有效成分在杯底沉淀,茶色分布不均匀,有明显分层现象。当加水量为200~250 mL 时,汤色均匀、香味浓郁;进一步加大水量,茶汤口感变淡,合适的加水量为200 mL。
2.2.3 冲泡水温的影响
冲泡水温对感官评分的影响见图3。
由图3 可知,随着冲泡水温的升高,朝鲜蓟袋泡茶有效成分释放完全,茶汤香气浓郁、汤色透亮、滋味纯正;水温过高,对活性成分破坏较多,合适的冲泡水温85 ℃。
2.2.4 粉碎度的影响
粉碎度对感官评分的影响见图4。
表3 Box-Behnken 试验设计及结果
由图4 可知,当粉碎度低于10 目,朝鲜蓟碎片过大,与水的接触面积小,有效成分释放较慢,茶汤色浅,味道不足,口感很淡。当粉碎度高于80 目,朝鲜蓟粉末太细,冲泡时香气散发快,内部容易结块,茶汤口感偏苦,合适的粉碎度为40 目左右。
2.3.1 试验设计与结果
以朝鲜蓟袋泡茶感官评分作为响应值,选择四因素三水平进行响应面试验。
Box-Behnken 试验设计及结果见表3。
2.3.2 方差分析及响应面试验结果
使用Design-Expert 8.0.6 软件对表3 数据进行多元回归拟合,得到回归方程方差分析结果。
回归方程方差分析见表4。
由表4 可知,方差分析结果中Prob>F 项目值小于0.05 表明,该方程模型显著,而失拟项的p 值为0.252 5 检验为不显著,说明回归方程与实际情况吻合较好,试验误差小,因此可用该回归方程代替试验真实点对试验结果进行预测。该表中的二次项B2的p 值(小于0.000 1),说明加水量对感官评分有极显著影响。一次项A,B,二次项A2,C2,D2小于0.05,对响应值影响显著。在所选取的因素水平范围内,对感官评分的影响程度为冲泡时间>加水量>粉碎度>冲泡水温。
表4 回归方程方差分析
通过统计分析软件对表2 中试验数据进行二次多项式回归拟合,以感官评分为因变量,以冲泡时间、加水量、冲泡水温、粉碎度为自变量,建立二次多项回归方程预测为模型:
感官评分=88.80+3.75A-3.33B+1.17C+1.25D+2.50AB+1.00AC+0.25AD-3.00BC+2.50BD+0.50CD-3.90A2-8.52B2-5.52C2-6.40D.
模型相关系数R2为0.832 9,“Adeq Precision”测量信噪比为7.6,大于4 的比率是可取的,说明回归方程的拟合程度良好。
2.3.3 各因素之间交互作用影响
根据回归方程建立响应曲面图,考查冲泡时间、加水量、冲泡水温、粉碎度对朝鲜蓟袋泡茶感官评分的影响。
两两因素交互作用对朝鲜蓟袋泡茶感官评分的影响见图5。
响应面坡度的陡峭程度说明随着影响因素的变化,其对应响应值的变化情况。从图5 可以看出冲泡水温和加水量的曲面坡度最大,所以对感官评分的影响最大。随着冲泡水温和加水量的增加,其感官评分先增大后减小。
经过响应面回归分析得到朝鲜蓟袋泡茶最佳泡制工艺为冲泡时间22 min,加水量243 mL,冲泡水温86 ℃,粉碎度40 目,在此条件下感官评价得分理论值为90 分,与单因素试验较为相近,这也进一步证实了试验模型的可靠性和预测值的准确性。
利用DPPH 法和ABTS 抗氧化试剂盒检测朝鲜蓟袋泡茶溶液的抗氧化能力分别为1.079 1 和86.81,表明朝鲜蓟中多酚类化合物进入茶汤,茶汤富含抗氧化活性物质,具有一定的抗氧化能力。
以感官评价为指标,通过单因素试验和响应面试验设计优化朝鲜蓟发酵茶泡制工艺。在所选取的因素水平范围内,对感官评分的影响程度大小顺序为冲泡时间>加水量>粉碎度>冲泡水温。朝鲜蓟发酵茶的最佳泡制工艺为冲泡时间22 min,加水量243 mL,冲泡水温86 ℃,粉碎度40 目,在此条件下感官评分为90 分。ABTS 法和DPPH 法检测表明朝鲜蓟袋泡茶具有明显的抗氧化能力。