王俊侠,刘全凤,王 静,范惠菊
(河北沧州职业技术学院,河北沧州 061001)
菊花被称为花卉“四君子”(梅、兰、竹、菊)之一,是我国传统名花,有悠久的栽培历史。主要供人观赏,布置园林,美化环境。它的繁殖方法很多,可采用播种法、扦插法、分株法、组织培养法[1]。在种苗生产上运用最广泛的方法是扦插和组培[2]。由于菊花的病毒病种类比较多,而且为害也较为严重[3],使用扦插繁殖苗,容易引起病毒病的扩张和蔓延[4]。因此,茎尖脱毒培养和组培快繁生产母本植株,再生产扦插苗的技术,对优良品种的脱病毒和复壮有着重要意义。本试验以名贵菊花为研究对象,对其组织培养中诱导生根进行试验研究,为丰富本地区的园林绿化种类提供理论依据。
1.1.1 供试材料:名贵菊花组织培养增殖后产生的单芽。
1.1.2 试验用品:蔗糖、琼脂及不同浓度的生长素NAA、IBA 的MS 培养基;珍珠岩、蛭石、中砂、草炭土4种基质。
1.2.1 选材。选取继代培养出的具有2cm 以上高度的丛生芽,并将这些丛生芽切成单芽。
1.2.2 接种。将上述切好的单芽接种在生根培养基上诱导生根,生根培养基蔗糖浓度10%,琼脂浓度为0.6%,基本培养基为MS 培养基,无机盐浓度设为1/4MS、1/3MS、1/2MS 3 种,激素选择NAA,激素的浓度定为0.2mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L 3 种,共设9 个处理。
1.2.3 接种后的管理。将接种后的苗子放在温度24℃、光照3000Lx 的条件下培养。
1.2.4 观察统计。在管理过程中随时观察试管苗的生长情况,生长20d 后统计生根度及根与苗的生长状况。
1.2.5 炼苗移栽。先打开瓶口,7d 后将长成完整根系的苗从培养瓶中小心取出,洗去根部琼脂,清洗时注意尽量不要伤根,然后移栽到不同的用0.1%KMnO4消毒过的基质中。
1.2.6 移栽后的管理。试管苗移栽后浇足水分置于培养室中,给予弱光照,每3d 浇1 次水,保持基质湿润,以后逐渐增强光照,成活后移至室外。
1.2.7 数据统计。试管苗移栽成活数天后,统计成活率及幼苗生长状况。并进行数据统计分析。
将继代培养具有2cm 以上的丛生芽切成单芽,接种在不同激素浓度的生根培养基上诱导生根,5d 后有白色根出现,7~10d 后根长0.5cm 以上,经过20d 的培养,由表1 可知,在培养基和接种芽数相同的情况下,在1/4MS 培养基中,添加NAA 0.5 mg/L 时,生根率最高为86.67%,平均生根条数为4.5 条。在1/3MS 培养基中,添加NAA 0.5mg/L 时生长情况最好,不定根长势较好,生根数最多,根多且粗壮密长,生根率均最高,达100.00%。在1/2MS 培养基中,NAA 0.2mg/L 浓度下根的生长情况较好,生根芽数与生根数较理想,生根率最高可达93.33%。
综上所述,在1/3MS 培养基中添加NAA 0.5mg/L的培养基生根率最高,其次为在1/2MS 培养基中添加NAA 0.2mg/L 的培养基,但综合考虑这几组培养基中根的生长情况可以确定:在培养基中添加NAA0.5mg/L 时培养基生根率最高,其不定根长势较好,且生根芽数、生根数均较理想。
表1 名贵菊花试管苗生长情况
由表2 可以看出,将菊花接种在NAA 0.5mg/L 但不同无机盐浓度的生根培养基上诱导生根,1/3MS 培养基效果最好,平均生根芽数30 个,平均生根数8.8条,平均生根率达100.00%。即在相同的生长素浓度下,1/3MS 培养基有利于菊花根的生长。
表2 不同无机盐浓度对菊花诱导生根的影响
从表3 可以看出,移栽成活率在不同的移栽基质中的次序为:蛭石>珍珠岩>中砂>草炭土。在蛭石栽培基质中成活率最好,成活率达到100.00%,且幼苗的生长状况较好;在草炭土基质中幼苗的生长状况较差,植株移栽成活率仅达63.33%;在珍珠岩和中砂栽培基质中幼苗生长状况一般,植株移栽成活率分别为86.67%和83.33%。
表3 不同栽培基质对移栽成活率的影响
影响菊花试管苗生根及移栽成活率的因素有很多,如外植体的来源、激素种类及其浓度、无机盐浓度、光照、温度等。诱发菊花试管苗生根的培养基以1/3MS+NAA 0.5mg/L 为最佳,在此培养基中生根率高,根系生长状况好,根系粗壮且密长生根数多。采用蛭石作为栽培基质,菊花试管苗移栽时可以获得很好的生长效果,而采用草炭土做栽培基质时生长效果不理想,其移栽成活率较低。所以,适合名贵菊花移栽的基质为蛭石,在此基质上移栽成活率可达100.00%。