阿苯达唑对斑点叉尾的毒性试验

阿苯达唑在水产养殖中主要用于防治淡水鱼类体表寄生的指环虫、三代虫、黏孢子虫及海水鱼类寄生的双鳞盘吸虫、贝尼登虫等。甲苯咪唑主要用于治疗鱼类指环虫、三代虫等单殖类吸虫。从防治对象不难看出它们均属于抗蠕虫药物，但甲苯咪唑在说明书中明确规定了斑点叉尾、大口鲇禁用，而阿苯达唑却未标注对斑点叉尾、大口鲇禁用的相关内容。本文就阿苯达唑对斑点叉尾是否敏感进行深入的研究与试验，试验过程分为实验室小试与池塘网箱试验。

一、实验室材料与方法

1.试验材料

(1)试验器材：玻璃水族缸共3个，大小相同，规格1.2米×0.6米×0.5米，编号分别为BHL-001、BHL-002、BHL-003，分别用于阿苯达唑溶液的药敏试验；温度计、电子天平、增氧机、pH试纸、测氧瓶、滴定管、移液管、锥形瓶、吸耳球、烧杯、玻璃棒等。

(2)试验鱼种：由山西黄河鱼病研究所生态养殖场提供，经本所技术员鉴定无病无伤、规格整齐的健康斑点叉尾鱼种，体长20～23厘米，平均体长21.5厘米，平均体重220克/尾，共30尾。

(3)药品来源：阿苯达唑(98%原粉)由山西乾泰动物药业有限公司提供，冰醋酸购置于运城市新兴化工试剂商店。

(4)阿苯达唑溶液配制：用电子天平称取10.2克阿苯达唑，溶解于89.8克的冰醋酸中，并用玻璃棒不断搅拌，待粉末状药剂完全溶解后制成规格100∶10的阿苯达唑溶液。

2.药敏试验前准备工作

(1)水族缸注水：分别在BHL-001、BHL-002、BHL-003水族缸内注入经曝气后的自来水240升，打开增氧泵。

(2)投放鱼种前的水质监测：水温28～32℃、溶氧5.0毫克/升、pH≥7.5，3个水族缸内水的理化指标基本相同，符合养鱼标准。

(3)投放鱼种：5小时后分别在水族缸中放入备好的斑点叉尾鱼种各10尾，暂养3日，暂养期间进行日常管理但不投喂，并以充分曝气的自来水为水源。

3.药敏预备试验

(1)试验场所：于2019年7月在山西黄河鱼病研究所实验室进行，目检3个水族缸内鱼种基本正常，未见异常现象。

(2)试验药物浓度：阿苯达唑溶液按0.05、0.1、0.15毫克/升进行药敏试验。药物稀释前按240升水计算出每个水族缸内的准确剂量。

(3)药物稀释与备用：用吸管吸取阿苯达唑溶液12、24、36毫克分别放入3个大小同等的烧杯内，加入200倍的水充分将药物稀释，准备使用。

4.药敏正式试验

(1)药物施用：用备好的药液均匀洒入3个水族缸内，其中阿苯达唑溶液施入BHL-001、BHL-002、BHL-003，药液剂量分别为12、24、36毫克。

(2)药敏试期管理：试验开始后，前12小时每2小时观察1次，记录试验鱼的表现和中毒症状及水温、溶氧、pH等指标，并于12、24、48、72、96小时分别记录试验鱼的死亡数，试验期间不投饵，及时清除排泄物和死亡个体。在药敏试验期间严格保证试验水的溶解氧，防止试验鱼缺氧死亡。每隔6小时测定溶氧1次，需保证水族缸内溶氧≥5毫克/升，避免缺氧死亡。

(3)试验鱼死亡的判断：试验鱼在中毒后鳃盖停止活动，用玻璃棒或小镊子轻轻刺激试验鱼尾柄部位，5分钟内仍无反应即可确定为个体死亡。

5.毒性试验结果分析

表1 阿苯达唑对斑点叉尾的毒性试验

表1 阿苯达唑对斑点叉尾的毒性试验

注：试验鱼数均为10尾。

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6.实验室小试小结

二、池塘现场试验

1.试验前准备

(1)试验场所：陕西省合阳县黄河滩涂两个粗养四大家鱼池塘，塘内有鲢鱼、鲤鱼、草鱼及鳙鱼，池塘分别为5亩水面，水深1米，池塘代号为HG-001、HG-002。

(2)池塘水源：水源为地下井水，池水pH≥7.5、溶氧≥5.0毫克/升、水温32℃，镜检以绿藻为主，少量隐藻，未检到有害物质，两个池塘的水质指标基本相同。

(3)网箱设置：分别在两个池塘中央各放置1个5米×5米×1米的网箱。

2.正式试验

(1)药物浓度与试验剂量：试用药物为10%阿苯达唑溶液，两个池塘的用药剂量分别为0.1、0.15毫克/升，即HG-001用333.5克，HG-002用500.25克。

(2)药物施用：将备好的药液加入适量的池水充分溶解，均匀全池泼洒，打开增氧机两小时，以确保药物的均匀度。

(3)死亡鉴定：鱼儿停止活动、身体僵硬、漂浮水面为死亡依据，并将死鱼及时捞出。

3.池塘网箱试验结果

试验塘HG-001、HG-002分别从12时开始施入不同剂量的阿苯达唑溶液，18时观察两个试验塘吃食均正常，未发现异常现象。第2天6时两个试验塘吃食良好，也未发现其他不良症状，12时观察HG-001吃食正常，HG-002吃食缓慢，吃食数量减少，未有不正常现象；18时HG-001吃食良好，HG-002完全停食，有个别鱼出现上下窜动和侧游不良症状。第3天6时HG-001吃食良好，HG-002死亡18尾，飘出水面，还有部分鱼上下窜动和侧游等不良症状；12时HG-001吃食缓慢，吃食数量减少，无其他异常行为，HG-002死亡7尾；18时，HG-001完全停食，有部分鱼狂游，但未见死亡，HG-002捞出死鱼15尾。第4天6时HG-001捞出死鱼13尾，HG-002捞出死鱼17尾；12时HG-001捞出死鱼9尾，HG-002捞出死鱼9尾；18时，HG-001捞出死鱼8尾，HG-002捞出死鱼14尾。第5天6时HG-001捞出死鱼11尾，HG-002捞出死鱼20尾，全部死亡，死亡率100%；12时HG-001捞出死鱼6尾；18时，HG-001捞出死鱼8尾。第6天6时HG-001捞出死鱼24尾，12时HG-001捞出死鱼9尾，18时HG-001捞出死鱼12尾，全部死亡，死亡率100%。不同剂量阿苯达唑溶液对斑点叉尾的致死率详见表2。

表2 阿苯达唑对斑点叉尾池塘网箱试验记录

表2 阿苯达唑对斑点叉尾池塘网箱试验记录

注：吃食正常用“＋＋”表示，吃食减少用“＋”表示，停食用“－”表示，活动正常用“√”表示，活动异常用“×”表示。

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4.池塘试验小结

三、总结

无论实验室小试还是池塘网箱试验，都证实了阿苯达唑对斑点叉尾有毒。我们根据药物作用的四大过程(吸收、分布、代谢、排泄)，可判断阿苯达唑利用内服或外泼的方法会对斑点叉尾产生相同的毒性。但国标水产药典产品中6%的阿苯达唑粉在使用说明书中未注明对斑点叉尾禁用或慎用的相关信息，因此提醒大家阿苯哒唑在斑点叉尾养殖中应慎用或禁用。