罗 影,吴启康,陈周秀
(1.西北民族大学化工学院,甘肃兰州 730124;2.牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江 157012)
全叶千里光 (Senecio cannabifolius var.integrifolius(Koidz.)Kitam.)是菊科千里光属植物,多年生根状茎草本,产自东北(吉林),生于草甸、湿草甸、林下,主要生长于俄罗斯远东地区和日本。全叶千里光又称返魂草、紫菀,是东北地区野外常见的中药植物,对肺部相关疾病有着很好的疗效,是中成药肺宁颗粒的主要成分。现代药理研究表明,全叶千里光挥发油具有抗氧化、抗微生物、抗感染、抗病毒、抗突变及抗肿瘤、抗过敏、酶抑制,以及驱虫、杀虫等多种生理活性[1-3]。因此,全叶千里光的活性物质的提取与鉴定分析,以及药理作用机制等需要进一步研究。试验采用加热回流法提取全叶千里光活性物质,分别研究不同料液比下其提取含量,为今后的研究与开发奠定基础。
全叶千里光,购于黑龙江省哈尔滨地区农家。全叶千里光收购后取叶花,除杆茎,花叶采用55℃烘箱干燥至恒质量,再采用中药粉碎机粉碎成粉末,过40目筛,放入密封袋中备用。
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称取3.000 g全叶千里光花叶粉末,包成脂肪包,放入100 mL圆底烧瓶中,按照不同料液比(1∶8,1∶12,1∶16,1∶20,1∶24) 加入石油醚浸泡6 h,水浴锅加热回流2 h,更换石油醚,重复回流第2次2 h,合并2次回流液。采用紫外分光光度计进行全谱波长扫描,确定提取液最佳的吸光度波长,于最佳吸光度波长下检测提取液的浓度。
由于按照不同料液比加入石油醚,提取液的体积不同,需按照公式进行换算为统一标准方可比较。数据采用SPSS进行分析,Origin绘图。
式中:试验倍数分别为8,12,16,20,24。
采用紫外分光光度计在190~1 100 nm处检测全叶千里光活性物质的吸光度,结果表明,于波长416 nm处,全叶千里光活性物质的吸光度最高,有着最好的折光性。因此,在后续试验研究中,采用波长416 nm检测全叶千里光活性物质的吸光度。
全叶千里光波长190~1 100 nm的吸光度见图1。
图1 全叶千里光波长190~1 100 nm的吸光度
按照1.3试验方法进行试验,分别检测1∶8,1∶12,1∶16,1∶20,1∶24,这 5个不同料液比下全叶千里光活性物质的吸光度,然后根据公式换算为10倍比例吸光度。
全叶千里光活性物质吸光度换算见表1。
表1 全叶千里光活性物质吸光度换算
根据换算之后的吸光度,吸光度越大表明全叶千里光活性物质含量越高,绘制柱形图。
不同料液比提取全叶千里光活性物质的换算吸光度见图2。
图2 不同料液比提取全叶千里光活性物质的换算吸光度
结果表明,随着料液比的增加,全叶千里光活性物质提取的含量逐渐增加,主要原因是石油醚的添加比例增加,使得全叶千里光活性物质得到很好的溶解,在回流操作过程中,根据同极性物质相互溶解原理,活性物质得到有效的提取。当料液比达到1∶16时,吸光度最高,活性物质的提取达到饱和,随后料液比增加,吸光度降低,由于大量的石油醚浸泡,破坏一些不稳定、容易分解的物质,造成活性物质的含量逐渐下降。因此可以确定当1∶16的料液比添加石油醚,可以有效提取到一些全叶千里光中的活性物质。
试验确定在加热回流法石油醚为提取有机溶剂时,全叶千里光活性物质的最佳吸收波长为416 nm,分别研究 1∶8,1∶12,1∶16,1∶20,1∶24 料液比下全叶千里光活性物质含量并进行对比,确定最佳的料液比为1∶16,为后续全叶千里光的研究与开发奠定基础。