崔贵医 庞志刚
【摘 要】 目的:探讨沉默OTUD1基因对人胆囊癌细胞增殖及迁移的影响。方法:选取2013年4月到2019年9月我院收治60例的采用慢病毒感染与siRNA干扰技术沉默人胆囊癌细胞GBC-SD中OTUD1基因患者作为siRNA组,同时选取60例空白对照组作为GBC-SD组,运用CCK-8法对上述两组患者24h、48h、72h细胞吸光度值(A450)进行检测,并运用Transwell小室细胞迁移与侵袭实验对穿膜细胞数进行检测,观察两组患者的A450、穿膜细胞数情况。结果:siRNA组24h、48h、72h的A450分明显低于GBC-SD组,差异显著(P<0.05);在Transwell小室细胞迁移与侵袭实验中,siRNA组24h的穿膜细胞数显著较少,与GBC-SD组相比差异显著(P<0.05)。结论:沉默OTUD1基因能够有效的阻止人胆囊癌细胞增殖与迁移。
【关键词】 沉默OTUD1基因;胆囊癌;细胞增殖;细胞迁移
【中图分类号】R735.7 【文献标志码】A 【文章编号】1005-0019(2020)03-051-02
胆囊癌在临床中较为常见,依据临床研究显示,该疾病的预后质量多较差,主要与肿瘤侵袭、转移存在密切关联,因此若能够有效的控制癌细胞的侵袭与转移,能够有效的改善患者的预后质量[1]。沉默OTUD1基因是一个含有OTU结构域的去泛素化酶,通过临床研究可知[2],沉默OTUD1基因与胆囊癌的恶化、不良预后及生存期缩短具有密切关联,因此需要有效的明确沉默OTUD1基因水平,明确其抑制胆囊癌细胞增殖与侵袭的机制,从而改善患者的预后[3]。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取2013年4月到2019年9月我院收治60例的采用慢病毒感染与siRNA干扰技术沉默人胆囊癌细胞GBC-SD中OTUD1基因患者作为siRNA组,同时选取60例空白对照组作为GBC-SD组。siRNA组男女各37例与23例,年龄为41-61岁,平均年龄为(51.1±4.9)岁;GBC-SD组男女各39例与21例,年龄为42-61岁,平均年龄为(51.5±5.1)岁。两组患者之间的线性资料差异具有可比性(P>0.05)。
1.2 方法
(1)提取患者的癌细胞组织,运用CCK-8法对上述两组患者24h、48h、72h细胞吸光度值(A450)进行检测。
(2)Transwell小室细胞迁移实验。将Transwell小室放置于24孔细胞培养板中,将小室内作为上室,将培养板内作为下室,之后将GBC-SD组的无血清培养液放置于上室内,将含10%胎牛血清的DMEM培养液放置于下室内,根据检测穿膜细胞数对细胞迁移能力进行判断。
(3)Transwell小室细胞侵袭实验。将Matrigel胶涂抹于上室,将FN胶涂抹于下室,根检测穿膜细胞数对细胞的侵袭能力进行判断。
1.5 观察指标
①24h、48h、72h细胞吸光度值(A450)。
②Transwell小室细胞迁移与侵袭实验中的穿膜细胞数情况。
1.6 统计学处理
使用SPSS18.0统计软件进行分析,A450、穿膜细胞数为计量资料,使用LSD-t检验,P<0.05提示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 24h、48h、72h细胞A450比较
siRNA组24h、48h、72h的A450明显低于GBC-SD组,差异显著(P<0.05),见表1。
2.2 Transwell小室细胞迁移与侵袭实验中的穿膜细胞数比较
在Transwell小室细胞迁移与侵袭实验中,siRNA组24h的穿膜细胞数显著较少,与GBC-SD组相比差异显著(P<0.05),见表2。
3 讨论
胆囊癌在临床中较为常见,较易对周围脏器形成累及,并且将会向淋巴结等器官进行转移,从而产生更加严重的不良影响,因此需要采取有效的措施阻止癌细胞的增殖与迁移。随着研究的不断深入,临床人员发现沉默OTUD1基因与胆囊癌的恶化、不良预后及生存期缩短具有密切关联,即随着OTUD1基因表达量的不断提升,患者的病情将会随之加重,并且预后质量也将不断变差[4]。在本研究中,通过使用siRNA干扰技术对OTUD1基因进行沉默,能够使其表达量不断降低,从而能够改善患者的预后质量。依据结果显示,通过对OTUD1基因进行沉默,患者的A450、穿膜细胞数明显降低,由此说明siRNA沉默OTUD1基因的表达后,能够有效的抑制胆囊癌细胞的增殖与迁移,与国外相关学者的研究结果类似。
综上所述,本研究认为沉默OTUD1基因能够有效的阻止人胆囊癌细胞增殖与迁移,能够有效的对患者的预后情况进行改善,具有良好的效果。但临床相关人员仍然需要加强对OTUD1基因的研究,以获得更进一步的效果。
参考文献
[1] 任立刚.Cx43基因修饰对人胆囊癌GBC-SD细胞增殖和迁移能力的影响[J].中国实验诊断学,2015,19(11):1826-1829.
[2] 蔡炜龙,余胜,汪伟民,许洪宝,楼能.siRNA沉默CD44表达对人胆囊癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响[J].浙江医学,2019,41(11):1133-1137.
[3] 段巨涛,张琦.电转法介导沉默ABCE1基因对人胆囊癌细胞基因表達及增殖能力的抑制作用[J].中国中西医结合外科杂志,2017,23(05):523-527.
[4] 张生彬,曹翠霞,邹晓明,云哲琳,石雪英.NDRG1基因过表达对胆囊癌GBS-SD细胞增殖及凋亡的影响[J].基因组学与应用生物学,2018,37(12):5640-5647.