血清SOD、SA、SAA在不同分期结直肠癌中表达及其早期诊断价值

陈正立 王园园 赵小洁 王国欣 耿玉兰

(河北医科大学第一医院 1检验一科，河北 石家庄 050030；2普外三科)

结直肠癌是发生在结肠黏膜上皮的恶性肿瘤，其具有病情发展缓慢、死亡率高等特点。结直肠癌隐匿期强，临床常表现为腹胀、消化不良及便血等〔1〕。据不完全数据统计〔2〕，全世界每年新增结直肠癌病例800万例左右，占恶性肿瘤的10%～15%。结直肠癌病因复杂，与基因、炎症病变、饮食习惯及结肠病症有关。研究表明〔3〕，早期发现并确诊结直肠癌早进行治疗，可有效切除癌变组织，改善预后，提高患者存活率。X线及内镜检查是目前临床上常用的诊断手段，其操作复杂，患者依从性低，且灵敏度较低，若需确诊仍需行有创病理组织检查〔4〕。而血清指标检测因操作方便简单、费用低和周期相对较短等优点，已被临床广泛推广。Michaeli等〔5〕研究表明，血清淀粉样蛋白(SS)A与结直肠癌发生、发展及恶化转移有密切关联，对不同分期结直肠癌诊断有一定的价值，但其敏感度和特异度相对较低，易受机体炎症反应干扰。研究发现，血清唾液酸(SA)主要分布于机体细胞膜表面，是细胞膜重要组成结构，当细胞发生癌变时，血清SA水平明显上调，其表达与癌症分期密切相关，且浓度不随年龄性别而改变〔6〕；随着医学技术深入，研究发现机体内自由基可诱导脂质过氧化反应，断裂DNA分子氢键而造成基因突变，进而对机体产生致癌作用〔7〕，而血清超氧化物歧化酶(SOD)是机体重要的抗氧化酶，其可有效消除机体过剩自由基而减少机体基因突变〔8〕。临床实践表明〔9〕，多个血清指标进行联合检测有利提高结直肠癌早期的诊断效能，因此本研究对结直肠癌患者和正常人群的血清SOD、SA和SAA进行联合检测，探讨三者单独及联合检测在结直肠癌早期诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 本研究已获得医院伦理委员会批准并获得患者及其家属知情同意，选取2015年12月至2018年7月河北医科大学第一医院收治的79例结直肠癌老年患者为研究组，其中TNM分期Ⅰ期13例，Ⅱ期23例，Ⅲ期20例及Ⅳ期23例。另外选取同期医院体检的79例健康志愿者为对照组。两组受试者年龄和体重指数(BMI)差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。纳入标准：经病理组织确诊为结直肠癌；学历小学以上，便于沟通交流者；年龄60～75岁；患者及其家属知情同意本研究。排除标准：肝、肾和心脏功能严重损害的患者；毒品或酒精滥用者；并发患有其他恶性肿瘤患者；不服从安排者。

表1 两组年龄、BMI比较

1.2血清SOD、SA与SAA检测 分别于入组时采集患者空腹肘静脉血约5 ml，采用BY-G18型高速离心机(北京白洋医疗器械有限公司)以2 000 r/min转速，温度5℃，离心时间10 min，获得血清，-70℃液氮条件下保存，备用。酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清SOD和SAA水平，比色法测定血清SA水平，本研究使用的试剂盒来自上海广锐生物科技有限公司。

1.3统计分析 使用SPSS19.0软件进行χ2检验、t检验、单因素方差分析，采用Hanley-McNeil方法比较受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)。

2 结 果

2.1血清SOD、SA与SAA比较 结直肠癌各TNM分期患者的血清SA和SAA与对照组相比明显上调(P<0.05)，SOD与对照组相比显著降低(P<0.05)。见表2。

表2 各组血清指标对比

与对照组相比:1)P<0.05

2.2血清SOD、SA与SAA单独诊断及联合诊断价值比较 以血清SOD、SA与SAA作为检验变量，有无结直肠癌为状态标量，以灵敏度为X轴，以特异度为Y轴绘制ROC曲线(见图1)。

图1 血清SOD、SA与SAA单项检测及联合诊断的ROC曲线

根据ROC曲线可得，血清SOD诊断的临界值为152.25 U/ml，其对应的灵敏度为70.89%，特异度为84.81%，AUC为0.787(95%CI0.746～0.876)；血清SA诊断的临界值为420.78 mg/L，其对应的灵敏度为64.56%，特异度为87.34%，AUC为0.745(95%CI0.668～0.823)；血清SAA诊断的临界值为2.35 mg/L，其对应的灵敏度为79.75%，特异度为77.21%，AUC为0.647(95%CI0.561～0.733)。在最佳临界切点时，联合检测的灵敏度为92.40%，特异度为86.08%，AUC为0.861(95%CI0.802～0.919)。联合检测灵敏度显著高于各指标单独检测(P<0.05)，且联合诊断的AUC显著高于各项指标单独检测(P<0.05)，联合诊断时，当任一指标为阳性即可确诊结直肠癌。

3 讨 论

随着医学诊断技术的进步与发展，临床医护人员对结直肠癌诊断、预后评估等阶段进行深层次研究。现阶段常用的结直肠癌诊断方法有肛管指诊、直肠镜检、病理检查和血清检查等。其中，肛管指诊及直肠镜检患者依从性较低，且灵敏度和特异度较低；而病理检查技术要求苛刻、操作烦琐且有创伤〔10〕。血清学指标诊断结直肠癌因其方便、快捷且灵敏度和特异度高已成为研究热点。

血清SOD是机体自身产生的内源酶，可有效消除氧自由基，抑制机体自由基连锁反应，保护机体免受炎症或肿瘤的伤害〔11〕。研究发现SOD与多种肿瘤的发生及病情进展或恶化有密切关联，且结直肠癌等肿瘤的发生、进展与机体氧化应激相关，恶性肿瘤患者机体代谢旺盛，体内自由基异常增多而消耗SOD水平〔12〕。Skrzycki等〔13〕报道称结直肠癌患者血清SOD较健康人群异常减少，结直肠癌患者血清SOD血清表达水平与癌症分期、淋巴结转移、骨转移、手术根治术及药物化疗紧密相连，对结直肠癌的诊断及预后判断有重要意义。本研究结果证实血清SOD与结直肠癌发生、进展相关这一观点。进一步分析其诊断效能，血清SOD诊断结直肠癌敏感度和特异度分别为70.89%和84.81%，其灵敏度较低，分析认为，SOD水平机体炎症反应、氧化应激反应紧密相连，易造成假阴性而漏判〔12〕。

SA参与构成细胞膜，在机体代谢、生理反应中发挥作用〔6〕。马瑞敏等〔14〕研究表明，SA具有肿瘤细胞抗原性，与正常细胞癌变、癌细胞转移、浸润等紧密联系，属于广谱血清肿瘤标志物。正常人体内血清SA水平很低，但细胞癌变后，在唾液转移酶及唾液酸化反应作用下，机体SA浓度显著上升〔15〕。Ferrerbatallé等〔15〕研究显示，当健康组织细胞损伤或基因突变时，细胞膜表面糖脂分泌增多，血清SA异常提高。SAA是在机体炎症因子或癌症坏死因子诱导肝细胞而合成分化的急性时相结构蛋白，其可有效反映机体炎症程度及癌变情况〔5〕。研究发现〔16〕，SAA在肿瘤患者体内异常增高，其检测可辅助结直肠癌早期诊断、术后恢复评估，但其灵敏度和特异度相对较低。本研究SA灵敏度、特异度与曹修娥等〔17〕诊断卵巢癌的诊断效能相近，二者诊断效能灵敏度均较低，分析认为血清SA水平与机体炎症程度亦有关系，癌症诊断易受到干扰而造成漏判现象〔5〕；血清SAA灵敏度与刘丹等〔18〕研究SAA单独诊断结直肠癌时比较高，特异度接近，分析认为SAA易受到患者机体免疫反应及炎症影响，且其在多种肿瘤患者体内均能检测出来〔16〕。

血清SOD、SA及SAA均是结直肠癌诊断的有效指标，单独检测灵敏度和特异度均较低，因此需联合多种血清肿瘤标志物以提高结直肠癌诊断效能。本研究将血清SOD、SA及SAA三者联合检测，只要其中任何一个条件判定为阳性，即可确诊为结直肠癌。结果发现，联合应用的灵敏度显著高于单独的血清SOD、SA及SAA诊断效能，且能保持较高的特异度。以组织病理检测为金标准，联合诊断的准确度和一致性最高，进一步采用ROC曲线分析发现，三种血清因子联合诊断的AUC明显高于各血清指标单独检测，具有临床诊断意义。分析原因，血清SOD、SA及SAA在诊断结直肠癌时，均有部分干扰导致漏判，出现假阴性结果，而三者联合应用，降低漏判发生概率，提高检测灵敏度。