硒酵母联合甲巯咪唑治疗Graves病伴轻度突眼的临床效果

李丹丹，刘扬，元荣荣，于彤，庞妩燕

(河南大学淮河医院 内分泌科，河南 开封 475000)

甲状腺相关眼病(thyroid associated ophthalmopathy，TAO)是一种危及视力且损伤外貌器官的特异性自身免疫性疾病，又称Graves眼病，是一种与Graves病相关的自身免疫性疾病[1]。硒是人体所必需的一种营养元素，甲状腺是硒含量最高的器官，硒在甲状腺激素的合成代谢过程中扮演重要角色[2]，对免疫系统也有重要的影响。当硒的含量减少时，很容易引发机体免疫系统紊乱及炎症反应。目前关于硒辅助治疗甲状腺相关眼病的报道较少，本研究通过观察Graves病伴轻度突眼患者应用硒酵母辅助治疗6个月后体内甲状腺激素水平、相关抗体以及细胞因子水平的变化，探讨硒酵母辅助治疗在Graves病伴轻度突眼患者中的临床效果。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2016年1月至2017年12月在河南大学淮河医院内分泌科门诊就诊的Graves病伴轻度突眼患者，疾病的诊断参考2016年《ATA指南》：“甲状腺功能亢进症和其他原因导致的甲状腺毒症的诊断和管理”，每例患者均详细询问病史，完善眼球突出度、视野等常规眼科检查、影像学检查(眼眶CT)、甲状腺功能及甲状腺相关抗体水平测定、甲状腺ECT显像、甲状腺摄碘率等明确Graves病及Graves眼病诊断。排除糖尿病及糖调节异常、严重的心脑血管疾病、肝肾疾病、炎性假瘤、甲状腺结节或其他自身免疫性疾病等。共入组80例患者，按治疗方案分为对照组和观察组，各40例。对照组：男15例，女25例；年龄为30～58岁，平均(39.2±2.5)岁；病程为8个月～5 a，平均(3.7±0.8)a。观察组：男18例，女22例；年龄为18～67岁，平均(41.4±1.3)岁；病程为6个月～5 a，平均(3.4±0.4)a。两组年龄、性别、甲状腺激素水平、甲状腺自身抗体水平、眼球突出度等一般资料比较，差异无统计学意义(均P>0.05)。本研究资料收集及血样采集均经研究对象知情同意，研究方案经医院伦理委员会审核批准。

1.2 治疗方法对照组口服甲巯咪唑(德国默克公司)，每日10～30 mg，根据患者甲状腺功能下降情况，调整服药剂量。观察组在甲巯咪唑治疗基础上联合硒酵母胶囊(牡丹江灵泰药业股份有限公司)100 μg，每日2次。两组均治疗6个月。

1.3 观察指标采用美国贝克曼库尔特UniCel DxI 800全自动化学发光免疫分析仪分别测定观察组及对照组治疗前及治疗6个月后血清游离三碘甲状腺原氨酸(free trnodothyronine，FT3)、游离甲状腺素(free thyroxine，FT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone，TSH)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(anti- thyroid peroxidase antibodies，TPO-Ab)、甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibodies，TG-Ab)及促甲状腺激素受体抗体(anti-thyrotropin receptor antibody，TR-Ab)水平。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测转化生长因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)的表达：用Rneasy Mini Kit试剂盒(美国Qiagen公司)提取细胞总RNA，按逆转录试剂盒(美国Promega公司)说明书合成cDNA，再以该cDNA 为模板进行实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real-time PCR，RT-PCR)。扩增引物由上海生工生物工程有限公司合成，目的基因TGF-β1 上游引物为5’-GACCGCAACAACGCAATCTATG-3’，下游引物为5’-TATTCCGTCTCCTTGGTTCAGC-3’，产物长度为300 bp。内参β-actin 上游引物为5’-TGTCCCTGTATGCCTCTGGT-3’，下游引物为5’-GGTCTTTACGGATGTCAACG-3’，产物长度为459 bp。RT-qPCR 检测按SYBR Premix Ex Taq(Perfect Real Time) 试剂盒(美国Taraka公司)说明书进行操作。在ABI 7900 型荧光定量PCR仪上进行扩增，96孔板加样，设计复孔和标准曲线。用Sequence Detection System 软件分析各检测样本的Ct值，计算2-ΔΔCt，评价TGF-β1的表达水平。两名眼科医生应用眼球突出度测量仪测量同一患者的眼球突出度，两个测量结果的平均值为该患者的眼球突出度。

2 结果

2.1 甲状腺激素水平及眼球突出度的变化治疗前两组甲状腺激素水平和眼球突出度比较，差异无统计学意义(均P>0.05)，治疗6个月后，两组FT3、FT4水平及眼球突出度均较治疗前下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗6个月后，两组TSH水平均升高，且观察组高于对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。见表1。

表1 两组治疗前后甲状腺激素水平及眼球突出度比较

注：与同组治疗前比较，aP<0.05；与对照组治疗后比较，bP<0.05；FT3—血清游离三碘甲腺原氨酸；FT4—血清游离甲状腺素；TSH—促甲状腺激素。

2.2 甲状腺相关抗体水平治疗前两组TPO-Ab、TG-Ab、TR-Ab水平比较，差异无统计学意义(均P>0.05)。治疗6个月后，两组TPO-Ab、TG-Ab、TR-Ab水平较治疗前下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。见表2。

表2 两组治疗前后甲状腺相关抗体水平比较

注：与同组治疗前比较，aP<0.05；与对照组治疗后比较，bP<0.05；TPO-Ab—甲状腺过氧化物酶抗体；TG-Ab—甲状腺球蛋白抗体；TR-Ab—促甲状腺激素受体抗体。

2.3 TGF-β1水平治疗前，对照组TGF-β1水平为0.84±0.01，观察组TGF-β1水平为0.82±0.01，两组TGF-β1水平差异无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月后，对照组TGF-β1水平为0.78±0.01，观察组TGF-β1水平为0.56±0.01，两组TGF-β1水平较治疗前下降，且观察组低于对照组，差异有统计学意义(均P<0.05)。

3 讨论

Graves病是一种病因复杂的器官特异性自身免疫性疾病，与遗传、免疫、感染、环境等多因素密切相关。25%～50%的Graves病患者伴有不同程度的Graves眼病。目前针对甲状腺相关眼病的治疗主要根据2016年欧洲甲状腺协会(ETA)及欧洲Graves眼病专家组(EUGOGO)发布的《Graves眼病管理指南》[3]。Graves眼病的治疗包括一般治疗[4]、局部治疗[5]、免疫治疗[6-8]、放射治疗[9-10]、抗氧化剂治疗[9]、手术治疗[11]等。虽然有许多新的治疗方法不断出现，但由于缺乏安全性数据和花费较高等问题，糖皮质激素、眶部放疗和眶减压手术仍是目前临床上用于治疗Graves眼病的三大方法[12]。Graves眼病的治疗仍然是一个难题，许多患者的治疗结果不尽如人意，无论是药物治疗还是眼眶手术都不能避免后遗症的发生，因此迫切需要寻找新的有效的Graves眼病临床治疗方法，特别是用于早期Graves眼病患者以阻止病情的进展。

近年来，硒在甲状腺疾病中的作用越来越受重视。硒是维持机体甲状腺功能正常所必需的元素，可以通过脱碘酶等硒蛋白发挥生物学功能，对甲状腺激素的合成和功能发挥起重要作用。硒缺乏会导致甲状腺自身免疫功能紊乱，引起自身免疫性甲状腺疾病。同时由于硒元素参与了细胞周期的调节，硒缺乏可能会诱发甲状腺癌的发生发展[13]。硒还可与抗甲状腺药物发挥协同作用，减少 Graves 病及 Graves 眼病患者促炎细胞因子的产生，降低机体的自身免疫反应程度，从而有利于病情控制，减轻眼部症状，延缓疾病进展[14]。本研究观察了Graves病伴轻度突眼患者应用硒酵母胶囊联合甲巯咪唑治疗6个月后，FT3、FT4水平及眼球突出度的下降程度在观察组更明显，TSH水平的升高同样在观察组更明显，提示对Graves病合并轻度突眼的患者适当补硒治疗有利于病情的控制，可使甲状腺功能更快恢复正常，并缓解Graves病合并轻度突眼患者眼部症状。

Graves病以及Graves眼病作为器官特异性自身免疫性疾病，体内产生高滴度的自身抗体， 如 TPO-Ab、TR-Ab、TG-Ab 等，这些抗体参与了 Graves 病与Graves眼病的发生发展，随着病情的发展，这些抗体的水平也会相应地发生变化。在本研究中，治疗6个月后，两组TPO-Ab、TR-Ab、TG-Ab水平均较治疗前有明显的下降，与对照组比较，观察组抗体水平下降更明显，提示硒缺乏可能导致了Graves 病伴轻度突眼患者机体的免疫功能紊乱，适当补充硒元素可以发挥免疫调节作用，降低Graves 病伴轻度突眼患者体内自身抗体水平[15]。TGF-β1是TGF-β 超家族成员之一，主要由 Th3 细胞和单核细胞产生，具有干预 Naive T 细胞分化，抑制巨噬细胞激活和效应性 T 细胞增殖[16]，下调免疫应答、调节细胞生长和分化的作用，在Graves眼病的发生和发展过程中也发挥重要作用[17]。硒可以抑制Graves 病患者的免疫应答过程，减轻Graves 病伴轻度突眼患者的眼部症状，改善其生活质量，减少眼部受累，并延缓其病程[18]。本研究结果也发现，硒酵母联合甲巯咪唑治疗可明显降低Graves病合并轻度突眼患者体内的TGF-β1水平。

综上，硒元素在 Graves 病以及Graves 病合并轻度突眼患者中具有免疫调节作用，可以更好地控制甲状腺激素水平，缓解Graves 病合并轻度突眼患者的临床症状，值得临床应用推广。