关于微生态活菌制剂取消安全试验的探讨

刘宇 罗丹 刘洋

（1．东北制药集团沈阳第一制药有限公司 制剂检验中心，辽宁 沈阳 110027；2．东北制药集团沈阳第一制药有限公司103分厂，辽宁 沈阳110027）

微生态制剂，是指运用微生态学原理，利用对宿主有益无害的益生菌或益生菌的促生长物质，经特殊工艺制成的制剂。其中活菌制剂口服进入肠道后，可促进肠道内其他正常菌的生长繁殖。地衣芽孢杆菌活菌制剂的菌株从人体内分离而得，为我国首次分离的无毒菌株的活菌制剂，经研究证明是无毒，安全、有效的国家一类新药。

地衣芽孢杆菌活菌制剂的安全性检查，根据《中国药典》2015 版三部微生态活菌制品总论中（第45 页）安全试验进行，方法为小鼠口服灌胃。安全试验是通过动物试验进行的非特异性毒性检查，应根据制品的使用途径和人用剂量确定试验方法。安全试验通过给予动物一定剂量的药物，在规定时间内观察动物出现的异常反应或死亡情况，以判断药品中是否存在意外的不安全因素。微生态活菌制品安全试验为口服灌胃给药，每次都需要将灌胃针由小鼠口角插入，最终深入胃部，为小鼠被动强行给药。如果在给药过程中小鼠剧烈挣扎，很容易刺伤食管和内脏，即使实验员再小心操作也无法完全避免小鼠受伤的情况发生，而且实验过程中部分小鼠因受惊会出现炸毛、痉挛等痛苦表现，给小鼠带来极大的伤害。根据要求实验小鼠体重必须在18～22g范围内，小鼠生长快，体重很容易超标，大部分企业因考虑到实验成本不可能继续饲养，超重的小鼠不满足实验要求，只能被淘汰处死，这是对实验动物资源的一种浪费，也不符合实验动物伦理要求。况且，每次安全试验要求5只小鼠，安全试验目前尚无替代方法，每年累计需要使用成百上千只小鼠，既然微生态活菌制剂是安全的、对宿主无害的制剂，是否可以考虑取消活菌制剂的安全试验？

地衣芽孢杆菌活菌制剂（2013-2018年）安全试验检验结果均无异常，小鼠均健康存活体重增加，符合规定。通过对2200批产品检验结果历史数据统计可见，生物学检验项目、鉴别实验、杂菌检查和安全试验均符合规定，无一例不合格结果。安全试验即异常毒性试验，是指外源性毒性物质及意外的不安全因素，通常由生产过程中引入或其他原因所致，不同于药物本身的毒性特征。是考察药品在生产过程中引入或药物降解等导致的毒性，主要和生产工艺水平有关，并非考察药品本身毒性。WHO生物测定专家委员会曾于1997年开会讨论异常毒性检查的必要性问题，认为最初是在没有实施GMP情况下为以防万一设定该检验项。随着现在GMP已经发展成熟，药厂都没有出现异常毒性不合格的现象，WHO 也根据资料分期分批取消该项，专家认为异常毒性检查缺乏专属性和科学性，其结果各实验室间差异极大，与产品质量和实验动物都毫无关联，不足以反应产品质量。欧美等制药强国已经逐步取消该项检验，美国药典USP41 通则从2019 年1 月1 日已经取消2.6.9.Abnormal toxicity异常毒性检查法。

药企为了具备安全试验检验能力，需要建造独立实验动物楼，配备洁净区系统或屏障系统、小鼠IVC笼具、灭菌设备，专业的实验动物实验人员和饲养人员，实验设施维护和动物饲养也增加企业成本支出，如果取消安全试验，将大大减少实验动物的使用，降低制药企业的检验成本，节约人力物力，而且取消后药品检验周期由原来七天减少为五天，将缩短物流仓储周期，极大方便药品生产和销售，大大节省了时间成本，减少企业生产运营负担。

由于实验动物的突出贡献，其自身问题得到了世界的高度关注，英国在动物福利方面做了大量工作，在1986 年，制订了《动物（科学方案）法令》，同时英国动物学家通过大量的调查研究提出了“3R原则”，即减少每一次实验动物中所需要的动物数量，优化现有的实验以减少动物所受到的痛苦和伤害，使用其它的手段来取代动物实验。为了加强实验动物的管理工作，我国从1988年11月14日开始施行《实验动物管理条例》，至今已经三十年，各省市也进行了实验动物管理立法工作，已经与国际接轨。

微生态活菌制剂是安全的、对宿主无害的，而且安全试验目前无其他可替代方法，为满足实验动物3R原则“减少、替代、优化”要求，尽量减少实验动物的使用，最大限度地节约实验动物的资源，加快实验动物管理水平提高，减轻制药企业不必要的生产成本负担，实现药典标准与国际迅速接轨，取消微生态活菌制剂安全试验，指日可待，势在必行。