新型指纹图谱技术在中药分析中的应用进展

李琳

（黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨150000）

中药包括大量的中草药和中成药, 每一种中成药都可能含有许多假性活性成分[1]。由于中药是来源复杂的多成分系统,中药中含有大量的其他成分, 使得生物活性成分的筛选和分析极为困难[2]。一直以来,传统指纹图谱经常应用。本文主要阐释超临界流体色谱(SFC)、高速逆流色谱(HSCCC)、X- 射线衍射(XRD)等新型技术的研究现状。

新型技术研究进展:

传统技术多需采用仪器进行分析,分析成本过高,分析时间较长,对环境不够友好。现在产生了一些技术对目前技术进行了改进。下面按不同的技术原理可将指纹图谱分为以下种,既分配系数不同产生的迁移、基因探针杂交产生的带图纹、电荷的移动排列产生的反映。

上述方法通过查阅PubMed 数据库发现,在中药研究中应用SFC 技术有118 篇,HSCCC 技术86 篇,DFP 技术15 篇, NMR技术2093 篇,CE 技术717 篇, XRD 技术58 篇。研究还发现许多新型技术产生许多衍生技术例如DNA 分析技术包含RAPD、ISSR、AFLP 等,HSCCC 衍生技术有离线二维高速逆流色谱(2DHSCCC)、DPPH-HPLC、PH 区带精制逆流色谱法等。

1 分配系数不同产生的迁移

SFC 法检测方法多样, 能分离大多数GC、HPLC 不能分离的低挥发性、无紫外吸收的物质,可以对大部分物质进行高效率的分离[3]。多用在中药有效成分分离、手性药物成分分析、药物代谢成分分析等方面[4]。Huang Y 等[5]详述了采用SFC 分离中药中不同化合物的图谱条件(检测器、改性剂、温度等)。HSCCC 样品在螺旋管高速旋转下达到的分离效果[6]。

2 基因探针杂交产生的带图纹

DFP 在分子水平上对中药材表征,不受环境因素、形态、来源等影响,直接对原药材进行鉴定[7]。多用于中药制剂前期原料药的筛选阶段。Zhipeng Zhang 等[8]采用psbA-trnH 序列对黄柏种类进行追踪并对关黄柏和黄柏进行区分。通过HPLC 验证实验结果并发现DFP 在鉴定基因相似物种时比HPLC 更优异。

3 电荷的移动和排列产生的反映

NMR 在鉴别异构体上比传统技术有优势,样品可进行回收、普适性强、速度快、环保[9]。Li AP 等[10]采用NMR 与多元统计相结合检测野生和栽培的黄芪的代谢产物,发现区分二者的指标。该方法可用于区分年份和栽培方式。

现在CE 上产生了毛细管筛分电泳(CSE)或毛细管凝胶电泳(CGE),具有操作自动化、灵敏度更高、分析更准确等优点,多用于复杂药物的定性定量分析、药性识别、帮助建立指纹图谱[11]。Sun G, Yin R[12]对12 批柏子养心丸采用毛细管区带电泳(CZE)技术,建立指纹图谱。XRD 是一种研究晶型的新技数,可筛选优势药物晶型。XRD 多在矿物药和动物药中应用[13]。

现在产生的新型技术较传统技术来说, 因流动相和流动相的特殊性, 更能针对物质的性质进行分离, 分离度更高如SFC、HSCCC、HPCE 等技术。因大部分新型分析技术在分子或结构上进行研究在分析水平更深入, 相较于传统技术在分析药物时不易受外界因素的干扰,分析结果较为准确。现在人们对环保问题较为重视,新型技术的固定相与流动相较为特殊,因此还具有绿色环保的优势。