黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮的敏感性测定及其田间防效

高苇 杨利娟 张春祥 王勇

摘要 明确天津地区黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮的敏感性及田间防效，为该病害的防治提供理论依据。采用离体叶片法测定黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮的敏感性，并进行田间防效试验。结果表明，24株黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮存在敏感性差异，EC50值为0.002 6～0.071 3 μg/mL。田间试验表明，10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂对黄瓜霜霉病防效均在85%以上。黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮具有较高敏感性，田间防效高，推荐使用有效剂量19.50～30.00 g/hm2。

关键词 黄瓜霜霉病;氟噻唑吡乙酮;敏感性;田间防效

中图分类号 S482.2文献标识码 A文章编号 0517-6611（2020）24-0142-02

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2020.24.039

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Susceptibility and Field Efficacy of Oxathiapiprolin against the Pathogen of Cucumber Downy Mildew

GAO Wei， YANG Lijuan， ZHANG Chunxiangetal

（Institute of Plant Protection，Tianjin Academy of Agricultural Sciences，Tianjin300381）

Abstract To clarify the susceptibility and control effect of oxathiapiprolin against cucumber downy mildew in a view of the application of this fungicide in the field. The susceptibility test was assayed by vitro leaf disc method and field efficacy trials were carried out. The results showed that different susceptibility was found among 24 downy mildew pathogen， the EC50 values of oxathiapiprolin ranged from 0.002 6 to 0.071 3 μg/mL. In field trials， the control effect of oxathiapiprolin 10% OD to cucumber downy mildew was higher than 85%. Cucumber downy mildew pathogen was sensitive to oxathiapiprolin， and 19.50-30.00 g/hm2 of oxathiapiprolin 10% OD was recommended in field.

Key words Cucumber downy mildew;Oxathiapiprolin;Susceptibility;Field efficacy

黄瓜霜霉病的病原为专性寄生菌古巴假霜霉（Pseudoperonospora cubensis），主要侵染黄瓜的叶片，是黄瓜生产中最为严重的病害[1]。在温湿度适宜的条件下，该病害极易暴发、传播速度快、流行性强，造成黄瓜大幅减产甚至绝收[2]。由于抗病品种的缺乏，对于该病害的防治主要以化学防治为主。目前生产上常用的杀菌剂主要有酰胺类杀菌剂（如甲霜灵）、甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂（如嘧菌酯）、丙烯酰吗啉类杀菌剂（氟吗啉）和双炔酰菌胺（如烯酰吗啉和双炔酰菌胺）等[3-4]。但黄瓜霜霉病病原是一种高度抗性风险病原菌，极易产生抗药性，许多内吸性杀菌剂如甲霜灵等长期使用而导致防效显著降低[5-7]。因此，为了有效地控制黄瓜霜霉病，新型杀菌剂的安全应用推广具有尤为重要的意义。

氟噻唑吡乙酮（Oxathiapiprolin）是由杜邦公司开发的新型哌啶类杀菌剂，是一种氧化固醇结合蛋白（OSBP）抑制剂，对卵菌纲病害如晚疫病、霜霉病等有特效[8-9]。2016年2月美国杜邦公司的95%氟噻唑吡乙酮原药、10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂（商品名增威赢绿）在中国获得正式登记，对黄瓜霜霉病、马铃薯晚疫病等病害具有显著的防效[10-12]。由于该药剂对病原菌的作用位点单一，开展其田间抗性监测为病害的持续有效控制及抗药性治理策略的制订提供重要的依据[13]。笔者于2016—2018年从天津黄瓜主产区采集黄瓜霜霉病病原菌，检测其对氟噻唑吡乙酮的敏感性，并进行田间试验，综合评价其防病效果，以期为黄瓜生产中科学用药提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

供试菌株：2016—2018年从天津市主要黄瓜种植区县采集新鲜的黄瓜霜霉病病叶，将其编号记录，带回实验室于4 ℃冰箱保存待用。使用前，将采集的黄瓜霜霉病叶片背面喷水避光于20 ℃的培养箱中保湿培养24 h。24 h后将其叶片背面的孢子囊刷下，用無菌水制成浓度为1×105个/mL的孢子囊悬浮液，以备接种待用。

供试作物：黄瓜品种津春5号。

供试药剂：97.6%氟噻唑吡乙酮原药和10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂，美国杜邦公司。将原药用二甲基亚砜（DMSO）溶解，加入无菌水稀释成1 000 μg/mL母液，母液中DMSO的含量不超过0.1%。50%烯酰吗啉可湿性粉剂，山东省菏泽北联农药制造有限公司。

1.2 方法

1.2.1 黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮的敏感性测定。

采用离体叶盘法测定2016—2018年在天津区县采集24株黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮的敏感性。将配制好的氟噻唑吡乙酮母液加入无菌水10倍梯度稀释为102、10、1、0.1和0.01 μg/mL的待测药液。在直径9 cm的培养皿中倒入15 mL无菌水，上面放置20片直径6 mm的叶盘，使其叶背朝上漂浮于无菌水上，采用喷雾塔将每个平皿定量喷施5 mL待测药液，晾干后悬滴接种20 μL浓度为1×105个/mL的霜霉病孢子囊悬浮液，置于20 ℃培养箱中黑暗培养7～14 d，待对照充分发病后调查各处理叶盘发病情况。根据叶盘上病斑的发病面积进行病级划分[14]。计算病情指数和防效，并通过DPS 7.05数据分析软件进行药剂浓度与药剂相对防效之间的线性回归分析，求出药剂的毒力回归方程、相关系数以及有效抑制中浓度（EC50）。

1.2.2 10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂对黄瓜霜霉病的田间防效测定。

试验在天津市黄花店包营村设施黄瓜棚中进行。共设5个处理：处理①～③为10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂按药剂推荐使用剂量19.50、24.75、30.00 g/hm2，药剂对照为50%烯酰吗啉可湿性粉剂300.00 g/hm2，并设清水对照。每处理重复3次，不同处理随机排列，每小区面积20 m2。黄瓜叶片上有零星霜霉病发生时采用背负式手动喷雾器进行茎叶喷施，施药量1 800 L/hm2，共施药3次，每次间隔期7 d。第3次施药后7和14 d，按各叶片上病斑面積占整个叶片面积的百分率调查各处理叶片发病病级[15]，并计算病情指数及防效。

2 结果与分析

2.1 黄瓜霜霉病菌对10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂的敏感性

采集天津静海、西青、宝坻和武清4个黄瓜种植区县的24株黄瓜霜霉病病原菌，并通过离体叶盘法测定菌株对氟噻唑吡乙酮的敏感性。结果表明，不同来源的黄瓜霜霉菌株对氟噻唑吡乙酮均具有较强的敏感性，且存在一定的差异。分离到的24株菌株对10%氟噻唑吡乙酮的EC50在0.002 6～0.071 3 μg/mL，平均值为（0.018 5±0.017 5）μg/mL。其中，EC50在0.005～0.010 μg/ml菌株的分离频率最高，达29%，EC50值低于平均值0.018 5 μg/mL的菌株达70.83%（图1）。

2.2 10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂对黄瓜霜霉病的田间防效

田间药效试验结果发现，10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂对黄瓜霜霉病具有较好的田间防效。在黄瓜霜霉病发病初期连续喷施10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂3次（每次间隔7 d），3次药后7 d黄瓜霜霉病的防效得到显著

控制，清水对照的病情指数上升到31.64，而10%氟噻唑吡乙

酮可分散油悬浮剂处理小区病情指数在3.39～4.81，防效在

84.81%～89.29%，且防效高于对照药剂50%烯酰吗啉可湿性粉剂处理，方差分析结果表明，10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂24.75和30.00 g/hm2处理小区的防效显著高于50%烯酰吗啉可湿性粉剂300.00 g/hm2处理小区，10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂19.50 g/hm2处理小区防效与50%烯酰吗啉可湿性粉剂300.00 g/hm2无显著差异。10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂3个剂量处理小区间，高剂量处理小区防效显著高于低剂量处理小区，且均与中剂量处理小区间无显著差异。3次药后14 d，清水对照的病情指数上升到47.89，而10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂处理小区病情指数在5.19～7.61，防效在85.93%～9039%，显著高于对照药剂50%烯酰吗啉可湿性粉剂300.00 g/hm2处理小区的防效，且10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂3个剂量处理小区间防效无显著差异（表1）。

3 结论与讨论

该研究采用离体叶盘法测定天津地区黄瓜霜霉病菌对氟噻唑吡乙酮的敏感性，结果表明，氟噻唑吡乙酮对该地区黄瓜霜霉菌具有较强的敏感性，通过田间药效试验发现10%氟噻唑吡乙酮可分散油悬浮剂在使用剂量19.50～30.00 g/hm2下，对黄瓜霜霉病的防效显著，且持效期长，优于对照药剂50%烯酰吗啉可湿性粉剂，可以作为黄瓜霜霉病防治的首选药剂[12，16]。

黄瓜霜霉病一直是黄瓜生产中危害严重的叶部病害，随着其抗病品种的不断选育应用，其病原不断出现新的致病型与小种，导致该病害的侵染危害始终没有得到有效的控制[17-18]。因此，黄瓜霜霉病的控制还需要依赖于化学药剂防治。FRAC认为黄瓜霜霉病菌是抗药性风险较高的10种病原菌之一[19]，在黄瓜霜霉病防治中广泛应用，如苯基酸胺类（PAs）、羧酸酰胺类（CAAs）和甲氧基丙烯酸酯类（QoIs）等不断出现抗性菌株，从而导致了田间该病害难于及时有效的控制[20]。因此，新作用位点和化学结构的杀菌剂对黄瓜霜霉

病的田间防治具有重要意义。

氟噻唑吡乙酮是杜邦公司研发的首个哌啶基噻唑异噁唑啉类杀菌剂，其作用位点新颖，对霜霉病、晚疫病等卵菌纲病害病原多个生长发育阶段均有抑制作用，在瓜类霜霉病、葡萄霜霉病、番茄晚疫病和辣椒疫病的田间防治中具有显著的防效[8]。但由于氟噻唑吡乙酮是作用位点单一类型杀菌剂，且黄瓜霜霉病病原极易产生抗药性，因此，田间应用时应及时掌握其对黄瓜霜霉病菌的抗性发展水平，与其他类型杀菌剂交替使用，延缓抗药性的产生。

参考文献

[1] SAVORY E A，GRANKE L L，QUESADAOCAMPO L M，et al.The cucurbit downy mildew pathogen Pseudoperonospora cubensis[J].Molecular plant pathology，2011，12（3）：217-226.

[2] LEBEDA A，COHEN Y.Cucurbit downy mildew（Pseudoperonospora cubensis）biology，ecology，epidemiology，hostpathogen interaction and control[J].European journal of plant pathology，2011，129（2）：157-192.

[3] GISI U，SIEROTZKI H.Fungicide modes of action and resistance in downy mildews[J].European journal of plant pathology，2008，122（1）：157-167.

[4] 陈永明，谷莉莉，林双喜，等.黄瓜霜霉病的研究进展及登记防治农药的分析[J].农学学报，2018，8（8）：9-15，100.

[5] BLUM M，WALDNER M，OLAYA G，et al.Resistance mechanism to carboxylic acid amide fungicides in the cucurbit downy mildew pathogen Pseudoperonospora cubensis[J].Pest management science，2011，67（10）：1211-1214.

[6] ZHAO X J，REN L，YIN H，et al.Sensitivity of Pseudoperonospora cubensis to dimethomorph，metalaxyl and fosetylaluminium in Shanxi of China[J].Crop protection，2013，43：38-44.

[7] 王文橋，韩秀英，吴杰，等.河北省和山东省黄瓜霜霉病菌对氟吡菌胺的抗性及常规药剂对黄瓜霜霉病的田间防效[J].植物保护学报，2019，46（2）：385-392.

[8] 顾林玲，柏亚罗.氟噻唑吡乙酮的开发及应用[J].现代农药，2017，16（4）：42-45，50.

[9] MIAO J Q，DONG X，LIN D，et al.Activity of the novel fungicide oxathiapiprolin against plantpathogenic oomycetes[J].Pest management science，2016，72（8）：1572-1577.

[10] 王廷廷.新型杀菌剂氟噻唑吡乙酮专利布局[J].农药市场信息，2016（15）：29-31.

[11] 刘莲枝，段江华.增威赢绿防治马铃薯晚疫病效果试验[J].云南农业科技，2019（4）：10-11

[12] 吉沐祥，吴琴燕，王建华，等.10种生物和化学杀菌剂防治葡萄霜霉病的药效评价[J].农学学报，2017，7（3）：17-23.

[13] MIAO J Q，DONG X，CHI Y D，et al.Pseudoperonospora cubensis in China：Its sensitivity to and control by oxathiapiprolin[J].Pesticide biochemistry & physiology，2018，147：96-101.

[14] 孟润杰，韩秀英，吴杰，等.河北省黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性动态及七种药剂的田间防效[J].植物保护学报，2017，44（5）：849-855.

[15] 席敦芹.不同药剂对黄瓜霜霉病的防治效果[J].安徽农业科学，2010，38（17）：9057，9148.

[16] 王永存，李聪晓，刘桂芳.10%氟噻唑吡乙酮对黄瓜霜霉病防治效果研究[J].农业灾害研究，2016，6（6）：60-61.

[17] COHEN Y，VAN DEN LANGENBERG K M，WEHNER T C，et al.Resurgence of Pseudoperonospora cubensis：The causal agent of cucurbit downy mildew[J].Phytopathology，2015，105（7）：998-1012.

[18] OJIAMBO P S，GENT D H，QUESADAOCAMPO L M，et al.Epidemiology and population biology of Pseudoperonospora cubensis：A model system for management of downy mildews[J].Annual review of phytopathology，2015，53：223-246.

[19] FRAC.FRAC list of plant pathogenic organisms resistant to disease control agents.Fungicide resistance action committee，crop life international [EB/OL].（2006-12-10）[2020-02-05].http：www.frac.info.

[20] COHEN Y.The novel oomycide oxathiapiprolin inhibits all stages in the asexual life cycle of Pseudoperonospora cubensiscausal agent of cucurbit downy mildew[J].PLoS One，2015，10（10）：1-22.