贵州原发性高血压人群相关药物基因多态性研究*

任凌雁，靳 倩，廖 喆，袁 露，令狐克燕，李安洁，骆姝琳

(贵州省人民医院检验科，贵阳 550002)

原发性高血压是一种多基因遗传疾病，由环境因素和遗传因素共同决定，其中遗传因素对个体血压变化的影响占所有影响因素的30%～50%。目前，临床常用的降压药物包括利尿剂、β肾上腺素受体阻滞剂、钙拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂(ACE)、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂和α肾上腺素受体阻滞剂。其中，利尿剂、β肾上腺素受体阻滞剂、ACE抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂的使用受原发性高血压患者的遗传因素影响较大，与基因多态性有关[1]。近年来，贵州地区原发性高血压患者发病呈上升趋势，用药效果个体差异较大，究其原因可能与抗药物基因多态性有关。贵州是一个多民族聚集地，多民族的基因交流使得贵州地区人群遗传基因分布具有复杂性，因此本文分析159例贵州地区原发性高血压患者抗高血压药物基因，旨在获得贵州原发性高血压人群抗高血压药物基因分布特点。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年12月至2016年12月在本院就诊的原发性高血压患者159例，男99例，女60例。纳入标准：(1)年龄大于18岁，性别不限；(2)根据中国高血压防治指南(2018 年修订版)中血压的测量方法，连续3次非同日坐位收缩压(SBP)≥ 140 mm Hg和(或)舒张压(DBP)≥90 mm Hg。排除标准：(1)继发性高血压；(2)急性心脑血管事件发生3个月内；(3)合并严重心肌病、风湿性心脏病、先天性心脏病和严重肝肾疾病。

1.2方法

1.2.1基因组DNA提取 抽取高血压患者静脉血2 mL，利用厦门至善全自动DNA提取仪提取基因组DNA。

1.2.2基因检测 使用无锡瑞奇AGTR1、CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1检测试剂盒(PCR- 熔解曲线法)，无锡瑞奇CYP2C19基因检测试剂盒(PCR- 熔解曲线法)对AGTR1、CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因进行检测。

1.3统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行统计分析，计数资料以例数或百分比表示，组间比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1各基因位点检测结果 检测的159例贵州原发性高血压患者抗高血压药物相关的7个基因多态性位点分布频率见表1。

表1 贵州原发性高血压患者抗高血压药物相关的 7个基因多态性位点分布频率[n(%)]

2.2各基因位点等位基因频率在不同性别中的分布 159例贵州原发性高血压患者中，男性和女性抗高血压药物相关的7个基因多态性位点等位基因分布频率见表2。其中，CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*等位基因频率在男女间分布比较，差异无统计学意义(P>0.05)；AGTR1等位基因频率在男性和女性患者间比较，差异有统计学意义(P<0.01)，见表2。

表2 不同性别患者抗高血压药物相关的7个基因 多态性位点分布频率比较[n(%)]

a：P<0.01，与男性比较

2.3贵州地区高血压患者相关药物基因频率与中国健康人群比较 将159例贵州原发性高血压患者抗高血压药物相关的7个基因多态性位点等位基因分布频率与中国健康人群[2- 3]比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 贵州地区高血压患者与中国健康人群抗高血压 药物相关基因分布频率比较(%)

3 讨 论

在高血压治疗过程中抗高血压药物疗效和不良反应的个体差异是目前的普遍现象。造成个体药物反应差异的主要原因是药物代谢酶、转运体和受体(药物作用靶点)的遗传变异。根据个体与药物治疗相关的代谢酶、转运体和受体的遗传变异制订不同的治疗方案，实现药物治疗个体化不仅可以减轻不良反应，而且可以达到较好的降压效果，具有十分重要的临床意义及社会价值。

本次研究中所检测的AGTR1、CYP2C9*3、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*3是4类常用降压药：利尿剂、β肾上腺素受体阻滞剂、ACE抑制剂和血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂的相关基因位点，基因位点多态性可能会影响患者降压疗效。其中，血管紧张素Ⅱ的1型受体(AGTR1)主要介导肾素- 血管紧张素系统，A1166C位点在高血压的药物治疗中具有重要意义。研究表明，使用氯沙坦治疗后，AA基因型个体的有效率明显高于AC和CC基因型个体[4]。在本次研究中，AGTR1(A/C)野生型纯合子频率为80.50%，突变杂合子频率为18.87%，突变纯合子频率为0.63%，与中国健康人群相比，AGTR1(A/C)野生型等位基因频率接近，但是突变型等位基因频率高于中国健康人群。此外，本研究中AGTR1(A/C)在男女分布上也有不同，男性突变型等位基因频率为4.04%，而女性突变型等位基因频率为20.00%，二者比较，差异有统计学意义(P<0.01)。推测AGTR1(A/C)的突变可能与女性发病相关，与许景峰等[5]研究相符。

CYP2C9是细胞色素P450家族中的重要成员，可催化约12%的临床常用药物，ACE就是其中之一。CYP2C9基因多态性主要为CYP2C9*1(Arg144/Ile359)、CYP2C9*2(Cys144/Ile359)、CYP2C9*3(Arg144/Leu359)。在中国汉族人群中CYP2C9基因型主要以CYP2C9*3为主。CYP2C9*3可表现为酶活性降低，从而影响ACE的药效发挥。本次研究中没有检测到CYP2C9*3(A/C)纯合突变，杂合突变频率也较低，仅为7.55%，而云南汉族人群[6]CYP2C9*3的杂合突变频率为7.4%，纯合突变率为1.0%；皖南汉族人群[7]的杂合突变和纯合突变频率分别为5.19%、0.74%，与本研究相似。

ACE(I/D)基因编码血管紧张素转换酶，为肾素- 血管紧张素系统的关键酶，ACE基因存在多种遗传多态性，其中第16内含子中存在的287 bp的Alu插入片段(I)和缺失片段(D)的多态性与高血压药物治疗相关。研究表明，DD纯合型个体使用贝那普利和福辛普利的疗效显著，Ⅱ纯合型个体使用依那普利和咪达普利的疗效显著，ID杂合型个体使用血管紧张素抑制剂类药物治疗，均有效[8]。本研究中，ACEⅡ型、ID型、DD型分布频率分别为41.51%、47.17%、11.32%，与贵州汉族、布依族高血压人群的基因型分布大体一致[9]，但是DD型分布频率略高于贵州汉族、布依族高血压人群，为后期DD型患者高血压用药提供临床依据。

经CYP2D6催化代谢的药物多达80多种，如β肾上腺素受体阻滞剂。不同个体CYP2D6的活性相差较大，在中国人群中最常见的多态性为CYP2D6*10，约51.6%的中国人携带此遗传变异。该多态性导致CYP2D6的酶活性降低，且极不稳定，从而影响药物代谢[10]。本次检测的CYP2D6*10(C/T)在男性与女性患者的分布频率上无明显差异，等位基因频率与中国健康人群接近，有57.55%的高血压患者携带突变，提示可以为后期研究贵州地区高血压患者个体化使用β肾上腺素受体阻滞剂奠定研究基础。

ADRB1(G/C)基因可编码β1肾上腺素受体，该基因存在多态性。ADRB1(G/C)基因多态性与高血压药物治疗相关，野生型纯合子对该药不敏感，而突变致该类药与ADRB1结合能力增强故对该类药敏感。本研究检测到约80%的高血压患者携带该突变，略高于中国汉族高血压人群及中国健康人群[2，5]。但是仍检测到近20%的高血压患者未发生突变，该部分患者与β1肾上腺素受体类降压药的疗效相关性值得进一步研究。

利尿剂类药物(如吲达帕胺)主要经CYP2C19参与肝脏代谢，CYP2C19存在基因多态性，其中检测*2、*3两个位点可覆盖中国大部分人群[11]。本次检测中未发现CYP2C19*3纯合突变型，推测可能与样本量较小有关。此外，贵州高血压患者等位基因频率的分布与中国健康人群一致，但是没有更多文献对CYP2C19与抗高血压药物相关性进行报道，因此在后期用药研究中将持续关注。

贵州是多民族汇聚地，多个民族的基因交流可能使得贵州人群基因有着独特的分布特点。本次研究对199例贵州地区行4大类降压药疗效相关基因行检测，分析贵州地区抗高血压药物相关基因在原发性高血压人群中多态性分布。虽然结果显示贵州原发性高血压人群在抗高血压药物基因分布上与中国健康人群接近，推测可能与标本量较小有关，后期需增加样本量为建立贵州原发性高血压患者基因库打下基础，从而为贵州地区高血压患者用药情况作出合理评价，最终提供个性化用药指南。