HBV相关性肝癌患者血清B7-H3、IL-21水平及MRI影像学变化与患者病情严重程度的关系

武文辉 崔立春 党升强 王剑

肝癌与多种肝炎病毒相关，如乙型和丙型肝炎病毒等[1]。共刺激分子B7-H3与多种炎症反应之间均存在密切的关联，并且在多种实体肿瘤中也有表达，同时白细胞介素-21(IL-21)与免疫调节及抗肿瘤也存在关联[2]。研究选取在我院治疗的HBV相关性肝癌，同时选取慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者以及健康志愿者作为对照，对所有受检人员血清B7-H3、IL-21进行了检测，以探究这些指标与患者病情严重程度的关系，现报告如下；

资料与方法

一、一般资料

选取2016年3月至2018年3月在我院治疗的HBV相关性肝癌患者94例，同时选取慢性乙型肝炎患者56例，乙型肝炎肝硬化60例以及健康志愿者70例作为对照，纳入标准：(1)肝癌符合《中国肝癌诊治指南》中的诊断标准，慢性乙肝或肝硬化符合《慢性乙型肝炎防治指南》中的诊断标准；(2)均经病理学确诊；(3)患者及家属知情同意。排除标准：(1)合并有HCV、HIV、梅毒、肝吸虫等其他病毒及寄生虫感染；(2)已行放化疗或免疫治疗者；(3)有严重心、肾、肺等重要脏器疾病。各受试者性别、年龄一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 各受试者一般资料比较

二、实验方法

HBV相关性肝癌患者、慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者在治疗前后抽取全血3 mL，健康志愿者同期抽取全血3 mL，将得到的血液立即放入含促凝剂的试管中，静置30 min，离心3 min。取1.0 mL血清保存在-80 ℃冰箱内，所有血清学标本均送至实验室检测，通过ELISA方法对B7-H3、IL-21进行定量测定。B7-H3 ELISA试剂盒其生产厂家为上海仁捷生物科技有限公司，IL-21 ELISA试剂盒其生产厂家为上海江莱生物科技有效公司。两种指标测定步骤一致，首先样本孔先加入待测样本12 μL，随后滴入40 μL样本稀释液，在加入样本的样本孔中再次加人100 μL酶标抗体，然后将反应孔封住，37 ℃孵育1 h，在洗板之后，各加底物A、B 50 μL，37 ℃避光孵育15 min，最后加入终止液 50 μL，15 min内测定。

MRI检查：检查者取仰卧位，将表面相控振线圈分成两组，围绕其上腹部进行扫描。每个序列的扫描均通过两次深吸气末闭气完成。通过测量软件包直接对ADC值进行测量。

三、统计学处理

结 果

一、各组血清B7-H3、IL-21及MRI ADC值比较

肝癌患者B7-H3明显高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者(P<0.05)；肝癌患者IL-21明显高于健康者(P<0.05)，而与慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者比较差异无统计学意义(P>0.05)；肝癌ADC值明显高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者(P<0.05)。见表2。

二、B7-H3与肝癌患者临床病理关系

Ⅲ～Ⅳ期肝癌患者血清B7-H3水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)，见表3。

表3 B7-H3与肝癌患者临床病理关系

三、IL-21与肝癌患者临床病理关系

HBV DNA阳性患者IL-21水平明显高于HBV DNA阴性患者(P<0.05)。见表4。

四、ADC值与肝癌患者临床病理关系

Ⅲ～Ⅳ期性患者ADC值明显低于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。见表5。

表2 各组血清B7-H3、IL-21及ADC值比较

注：a与健康者比较P<0.05；b与慢性乙型肝炎比较P<0.05；c与乙型肝炎肝硬化比较P<0.05

表4 IL-21与肝癌患者临床病理关系

表5 ADC值与肝癌患者临床病理关系

五、相关性分析

将肝癌患者B7-H3、IL-21与HBV DNA进行相关分析，结果显示B7-H3、IL-21与HBV DNA无相关性(P>0.05)。

讨 论

肝癌与HBV持续感染存在密切关联，HBV会使机体产生过度的细胞免疫反应，导致大面积的肝细胞损伤，造成重症肝炎，但患者此时细胞免疫功能低下不能有效清除病毒，易导致感染慢性化，会有转化为肝癌的危险[7]。

B7-H3是Ⅰ型跨膜蛋白，其是机体免疫应答的调节因子，与多种自身免疫性疾病有关[10]。肝癌患者B7-H3明显高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者，该结果的表明B7-H3在原发性肝癌患者组织中呈现高表达，在临床中可将其发展成为诊断及治疗的新靶点。HBV通过引起机体的免疫应答，使多种细胞因子参与该过程的免疫反应，并对免疫反应进行调节，而IL-21 作为炎症介质，参与并影响着乙型肝炎疾病发生、发展与转归，在与HBV相关的各种肝病中表达量均较高[11]。因此肝癌患者IL-21明显高于健康者，而与慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者比较差异无统计学意义，提示了IL-21与HBV的高相关性。ADC值作为准确反映病变组织器官的功能状况的指标 , 是一种较理想的无创性检查肝脏病变的方法。本研究表明，肝癌ADC值明显高于健康者、慢性乙型肝炎和乙型肝炎肝硬化患者，该结果说明了体内具有恶性肿瘤细胞的患者的ADC值较高，提示我们可将ADC值作为肿瘤判断的指标。

Ⅲ～Ⅳ期肝癌患者血清B7-H3水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者，由此结果可知随着肝癌患者病情加深，其血清B7-H3水平与其呈现正相关，在临床中可用其血清B7-H3水平参与临床分期的预判，提高其分期判断的准确度。HBV DNA阳性患者IL-21水平明显高于HBV DNA阴性患者，该结果说明经HBV感染的患者其体内IL-21较高，其含量升高主要因为机体对HBV产生免疫应答，并诱导炎症因子IL-21高表达。将肝癌患者B7-H3、IL-21与HBV DNA进行相关分析，结果显示B7-H3、IL-21与HBV DNA无相关性。

本研究创新点在于选取了较少有报道的B7-H3、IL-21，来研究其与HBV相关性肝癌患之间的相关性，进一步分析了B7-H3表达与IL-21之间的关系，为肝癌的诊断提供了较为灵敏的新指标。

综上所述，HBV相关性肝癌患者B7-H3、IL-21水平明显升高，B7-H3可能与临床分期有关，而IL-21与HBV DNA复制水平高低无关，可用于临床病理分期的判断。