周雪姣 邓永梅 张 倩
首都医科大学附属北京天坛医院神经内科,北京 100160
颅内动脉狭窄(IAS)是指多种因素导致颅内局部动脉血管官腔直径变小但未完全闭塞,血流阻力增高,影响血流速度和血流量的病理性改变。由于IAS早期常常无任何临床症状和体征,发生发展过程较为隐匿,故又称之为无症状性颅内动脉狭窄(AIAS)。研究显示,我国健康成人及年龄>40 岁的成人AIAS 患病率分别为6.9%[1]、13.2%[2]。可见,AIAS 患者数量庞大。
在一定诱因下,AIAS 可进展为缺血性脑卒中、短暂性脑缺血发作(TIA)、血管性痴呆(VD),表现出听力障碍、耳鸣、眩晕、失明、运动障碍、吞咽困难、共济失调等神经功能缺损体征及症状[3],严重影响生活质量。从AIAS 发展至脑卒中、TIA、VD 的过程漫长,故有充分时间识别高危人群,预防控制疾病的进展,阻断IAS 发展,降低脑血管事件的发生率。大量研究证实AIAS 是在分子多层级联介导中形成动脉粥样硬化,其中血小板在动脉粥样硬化过程中有着重要作用[4-6]。血小板中有丰富的miRNA[7],其中表达量较高且研究较多是miRNA-223[8]。miRNA-223 的表达量是否与AIAS 疾病进展有关,目前尚无相关报道。本研究回顾性分析122 例AIAS 患者临床资料及外周血miRNA-223 相对表达量,力求找出脑卒中的危险因素并提出干预措施,为脑卒中的防治提供依据。现将结果报道如下:
选取2016 年1 月~2017 年12 月在首都医科大学附属北京天坛医院(以下简称“我院”)进行健康体检,且进行颅多普勒仪检测的人群作为研究对象。纳入标准:①符合IAS 诊断标准[9];②年龄18~65 岁;③血红白蛋正常;④有外周血miRNA-223 表达量检测结果。排除标准:①无法获取颅内动脉血流相关信号者;②有脑卒中史及TIA 史者;③孕妇及哺乳期妇女;④贫血病史;⑤资料不全者;⑥动脉夹层或血管炎等引起血管狭窄者;⑦有临床症状和体征者。本研究经我院医学伦理委员会批准,入组对象均签署知情同意书。
符合上述标准的患者共122 例。通过查阅病案科,收集入组对象体检时的年龄、性别、体重指数(BMI)、既往病史、个人史、生化指标、颅内多普勒彩超结果等临床资料。对入组对象进行为期1 年的随访,随访期间出现缺血性脑卒中者纳入阳性组共21 例,其他纳入阴性组共101 例。两组人群年龄、性别等一般资料比较差异无统计学意义(P >0.05),具有可比性。见表1。
miRNA-223 表达量的测定方法:①样本采集。采集所有入组对象的空腹肘静脉血5 mL,置于EDTA 管,室温静置10 min,1500 r/min 离心10 min (离心半径15 cm),取上层血清置于另一支无菌抗凝管中,-80℃冷冻保存备用。②miRNA 提取及逆转录反应。采用miRNA Vana PARIS 试剂盒[赛默飞世尔科技(中国)有限公司,批号:AM1556],按照说明书操作提取血清总RNA。采用TaqMan miRNA 试剂盒[赛默飞世尔科技(中国)有限公司,批号:18091200]进行逆转录反应。引物:正向5′-CAGAAAGCCCAATTCCATCT-3′,反向5′-GGGCAAATGGATACCATCC-3′;完成逆转录反应。③荧光定量PCR 法检测。内参为U6,40 个循环(95℃1 min、60℃1 min、72℃1 min)延伸72℃(7 min),计算miRNA-223 的表达量。
表1 两组一般资料比较
采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析,计量资料用均数±标准差()表示,两组间比较采用t 检验;计数资料用率表示,组间比较采用χ2检验;多因素相关性分析采用Logistic 回归分析。以P <0.05 为差异有统计学意义。
阳性组患者有高血压、饮酒、吸烟者占比高于阴性组,三酰甘油(TG)的含量高于阴性组,miRNA-223的相对表达量低于阴性组,差异有统计学意义(P <0.05)。阳性组BMI,糖尿病史及白蛋白、同型半胱氨酸(Hcy)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(CHOL)水平,血管狭窄程度,血管病变支数与阴性组比较,差异均无统计学意义(P >0.05)。见表2。
以高血压、吸烟、饮酒、TG 含量、miRNA-223 相对表达量为自变量,随访期间是否发生脑卒中为因变量,进行赋值情况,见表3。Logistic 回归分析结果显示,吸烟、饮酒、TG 含量≥1.98 mmol/L、miRNA-223相对表达量≤0.56 是导致AIAS 患者发生脑卒中的高危因素,其中miRNA-223 相对表达量≤0.56 影响最大(OR=6.278,95%CI:4.118~14.827,P=0.012),见表4。
表2 单因素分析结果
表3 可能影响AIAS 患者发生脑卒中的因素及赋值
表4 AIAS 患者发生脑卒中多因素Logistic 回归分析
在预测AIAS 患者发生脑卒中方面,使用miRNA-223 相对表达量好于TG 含量。见图1、表5。
图1 TG 含量及miRNA-223 相对表达量的脑卒中诊断效能比较
表5 TG 含量及miRNA-223 相对表达量ROC 曲线分析结果
1984 年,我国缺血性脑卒中的发病率仅为100.5/10 万,2004 年为213.2/10 万,2010 年为240.58/10 万[10-11],缺血性脑卒中的发病率明显上升,且在脑血管事件的占比越来越高。脑卒中已经成为我国居民死亡的首要原因及致残率最高的疾病,每年造成的经济负担高达400 亿元[12]。IAS 已经被公认为缺血性脑卒中的首要危险因素[13],由于IAS 前期大多无任何临床症状,加上我国重治疗、轻预防的医疗传统,使得IAS 难以被识别及发现,往往出现阳性症状和体征时才引起重视。研究显示有超过80%的脑卒中可通过干预危险因素而得到预防[14]。故识别AIAS 进展为缺血性脑卒中的高危因素,早期干预延缓或阻断疾病进展,可为脑卒中防治提供依据。
本研究发现吸烟、饮酒、TG 含量≥1.98 mmol/L、miRNA-223 相对表达量≤0.56 是AIAS 患者发生缺血性脑卒中的高危因素。吸烟产生的烟雾气体及微粒状物质可使载脂蛋白变性,抑制HDL-L 介导的胆固醇逆向转运,影响脂质代谢[15],加速动脉粥样硬化进展,导致狭窄程度增加或病变血管数量增多,从而引发缺血性脑卒中。对于吸烟的AIAS 患者,医护人员可通过电话定期进行健康教育,告知患者及家属吸烟可能会增加脑卒中的发生风险,说明吸烟可能会促进IAS 的进展,诱发缺血性脑卒中,而戒烟可有效控制IAS 的进展。对戒烟意志力不坚定者联合心理疏导,必要时进行行为干预,如联合戒烟门诊进行强制性戒烟,家属时刻提醒监督。
乙醇是酒的主要成分,饮酒后乙醇会在体内被乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶、乙醛脱氢酶-2(ALDH-2)代谢。正常情况下,ALDH-2 保护脑组织不参与乙醛代谢,只有在过量饮酒时,由于人体乙醛脱氢酶数量有限,无法短时间将乙醛代谢为无毒的乙酸,造成乙醛的累积,为了尽快代谢乙醛,机体会启动ALDH-2 进行代谢,消耗ALDH-2 引起脑组织损伤[16]。对于有饮酒嗜好的AIAS 患者,医护人员可通过定期电话随访进行健康教育,告知患者及家属过量饮酒可能会增加脑卒中的发生风险,需尽早戒酒。
血脂异常是动脉粥样硬化的危险因子[17-19]。脂代谢异常会降低血管内皮依赖性的舒张功能及血管内皮抗氧化能力,大规模的降脂干预可有效降低脑卒中的发病率[20-21]。对于血脂异常的AIAS 患者,医护人员需为其制订合理的膳食结构。增加可溶性纤维的摄入,适量减少热量的摄入,多食白蛋白、豆类、蔬菜、水果等有助于降低血脂的食物,少食油腻、油炸等富含油脂的食物,平衡机体能量的摄入与支出,必要时也可进行运动锻炼。
miRNA-223 在不同物种间具有高度保守性,动物实验推测miRNA-223 可能参与动脉粥样硬化及血管内皮细胞损伤修复过程[8]。有研究显示,miRNA-223的表达量与抗血小板的药物抵抗呈负相关,提示对于这类患者可能需加大抗血小板药物的剂量方可达到预期效果[22]。本研究样本量有限,需更大样本来进一步证实。
综上所述,吸烟、饮酒、TG 含量过高、miRNA-223相对表达量低是AIAS 患者发展为缺血性脑卒中的高危因素,需加强人群的健康教育、戒烟戒酒、健康饮食、定期做好相关指标检查,必要时给予药物治疗。