套袋对大樱桃果实发育期花色苷形成的影响试验

刘 瑾 曹金石 呼丽萍

果实的外观色泽可以反映出果实的成熟度和风味，从而直接决定其商业价值。樱桃果实着色是花色苷积累的结果。花色苷属于类黄酮物质，是植物体内一类重要的次级代谢产物，广泛存在于高等植物的所有组织和器官中，是使植物呈现蓝色、紫色和红色的一种水溶性色素。除了决定色泽外，花色苷还具有多种生物学功能及保健功能。

本试验在果实硬核期前至果实成熟这段发育期，分阶段采集套袋和不套袋的的果实，通过测定不同时期的花色苷含量，分析套袋和不套袋樱桃果实不同发育阶段花色苷含量的差异，探明花色苷大量形成的关键时期，以明确套袋处理对果实着色的影响。

1 试验材料与方法

1.1 试验地点 位于天水市果树研究所中日友好樱桃园，面积6.5亩，海拔1 318 m，年平均气温10.8℃，平均年日照时数2 013.2小时，平均年降水量500～600 mm，无霜期185天左右，土壤为河床淤积沙质壤土，2012年定植，砧木为ZY-1，苗木定植东西行向，栽植株行距3.5m×4 m，采用纺锤形整形修剪，丰产沟栽植，2016年开始结果，管理水平较好。

1.2 供试品种 选择常见品种“美早”作试验。

1.3 试验方法

1）样品采集。美早套袋及不套袋处理的果实分别于落花（4月10日）后第26天、30天、34天、41天、47天、53天、60天分7个时期取样。供试品种在生理落果后转色期前 （5月10日）用小白袋（台果）进行果实套袋，在相应套袋果附近留不套袋果实为对照，采集的样品果实去核后液氮速冻，-80℃低温冰箱保存备用。

2）供试试剂。无水甲醇、浓盐酸、冰乙酸、氯化钾、乙酸钠均为分析纯试剂。试剂用水均为去离子水。

3）仪器与设备。SP-1920比例双光束紫外可见分光光度计，上海光谱仪器有限公司生产。H1850R台式高速冷冻离心机，湘仪离心机仪器有限公司生产。

PHS-3E pH计，上海仪电科学仪器股份有限公司生产。KQ-500DE型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司生产。

4）花色苷检测方法。大樱桃果实中花色苷的质量分数测定采用pH值示差法。取2g果肉，用研钵加入无水甲醇研成果浆，倒入烧杯中，在数控超声波清洗器上振荡10分钟，装入50 mL离心管中，在台式高速冷冻离心机15℃条件下5 000 rpm离心5分钟，取上清液，如上清液还有颜色可加入无水甲醇继续离心，直至上清液无色透明。取5mL花青素样品液，用0.025 mol/L的氯化钾缓冲溶液 （pH=1）和0.4mol/L的乙酸钠缓冲溶液 （pH=4.5）稀释到50 mL，在暗处反应20分钟后，用紫外可见分光光度计分别在510 nm及700 nm下检测其吸光度值，根据如下公式计算出样品中花色苷的质量分数。

花色苷质量分数（mg/100g）=C·1000·V/M式中：A为吸光度值；C为花色苷质量浓度，单位g/L；MW为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷分子量，449.2 g/mol；DF为稀释因子，此处为10；ε为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷摩尔消光系数，26 900 L/(mol·cm)； l为光程， 1 cm； V 为花色苷样品液总体积，单位L；M为样品初始质量，单位g。

1.5 数据处理 试验结果用Excel软件统计，并用SPSS 18.0分析数据。

2 试验结果与分析

表1 套袋和不套袋美早果实不同发育期间花色苷的含量mg/100 g

由表1可知，套袋和不套袋果花色苷在花后第41天开始积累，套袋果比不套袋果花色苷积累速度慢，但在花后第47天后，套袋果花色苷迅速合成，随着果实的发育成熟，套袋果和不套袋果花色苷含量一直呈线性上升，在花后第60天套袋处理的果实花色苷含量最高，达到了29.641 mg/100 g。在花后第53天，不套袋果达到九成熟，花色苷含量比不套袋果高8.19%，花后第60天套袋果充分成熟，且最终含量比不套袋果高18.52%。

3 小结

果实色泽是果实品质和商品性的重要指标，甜樱桃果实着色正是花色苷积累的结果。随着果实成熟度越来越高，花色苷的含量逐渐升高。果实套袋后，袋内光照大大减弱，而光照一般通过两个方面来影响花色苷的合成。首先，套袋影响了果实的光合作用，进而影响了花色苷的底物来源；其次套袋影响了光强和光质，进而影响了花色苷合成途径中光调节酶的活性，从而影响了花色苷的合成。本试验结果表明，套袋果比不套袋果花色苷积累速度慢，在果实发育后期套袋果花色苷含量达到了最高，这与果实成熟度有关，套袋果比不套袋果延迟采摘，果实发育更加充分。