GC-MS分析来自不同药性寄主的桑寄生挥发性成分

黄蜚颖，刘人源，柴子舒，苏本伟，朱开昕，陆海琳*，李永华

(1.广西中医药大学，广西 南宁 530200；2.钦州市中医药研究所，广西 钦州 535000)

桑寄生为桑寄生科钝果寄生属植物广寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser的干燥带叶茎枝，为2015版《中国药典》收录的常用药材，具有祛风湿、补肝肾、强筋骨、安胎元等功效[1]，主要分布于海南、福建、广东、广西[2]等地，古文献记载的“桑寄生”寄主应为桑[3-4]，药性“平”，指的应是寄主为桑的桑寄生的药性；《本草经集注》[3]提到桑寄生“根津所因处为异”，《本草纲目》[5]载“世俗多以杂树上者充之，气性不同”，指出，非桑树寄主的桑寄生药性(药效)不同；现代研究表明来自不同寄主的桑寄生其挥发油成分存在一定差异[6-7]。在民间，人们用来自不同寄主的寄生治疗不同疾病[8]。龚祝南等[9]在对桑寄生进行本草考证时提出寄主会影响寄生的药性，不同寄主的桑寄生可治疗不同的疾病，可见，古代本草对不同寄主来源的桑寄生存在药性差异是持认可态度的，但受研究条件的限制，古人虽然意识到了寄主会影响桑寄生的性味、疗效，但未能从物质基础层面探讨寄主对寄生产生影响的原因。辛宁等[10]对药性不同的药材的8大类化学成分进行统计分析，发现温性药比寒性药含挥发油类成分的比例相对较高。本课题组采集寄生于柳树和肉桂的桑寄生及其寄主药材柳枝、桂枝，拟对来自出产寒、热不同药性药材寄主的桑寄生的挥发油进行定性研究，寻找寄主与桑寄生的关系，以期为桑寄生的药性研究奠定物质基础。

1 材料

1.1 药品与试剂

柳树桑寄生及柳枝采于广西南宁，肉桂桑寄生及桂枝采于广西梧州，所有药材皆于12月份采集。经广西中医药大学药用植物教研室李永华研究员鉴定，桑寄生基原植物为桑寄生科钝果寄生属广寄生Taxilluschinensis(DC.)Danser，桂枝基原植物为樟科樟属肉桂CinnamomumcassiaPresl，柳枝基原植物为杨柳科柳属柳树SalixbabylonicaL。乙酸乙酯(太仓沪试试剂有限公司，批号：20160513)，无水硫酸钠(天津博迪化工股份有限公司，批号：20160126)。

1.2 仪器设备

美国Agilent 7890B-5977A气相色谱-质谱联用仪。98-1-B型电热套(天津市泰斯特仪器有限公司)，XMTD-8222电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)，16 K台式离心机(珠海黑马医学仪器有限公司)。

2 方法

2.1 样品制备

将采集到的桑寄生及寄主药材鲜品枝、叶分开，枝剪成约2 cm的小段，阴干，然后45 ℃烘3 h。称取一定量的药材(桑寄生按1∶2的枝叶比称取)，以1∶10的料液比，用水蒸气蒸馏法提取8 h，静置冷却后加入乙酸乙酯溶解、稀释，从提取器下端收集乙酸乙酯层，加适量无水硫酸钠除水，离心后取上清液用于进样分析。

2.2 气相色谱条件

气相色谱条件：HP-5 MS弹性石英毛细管色谱柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，载气He(≥99.999%)，流量(1.0 mL·min-1)，进样口温度270 ℃，桂枝的分流比为80∶1，其他样品为20∶1，进样量10 μL，溶剂延迟5.0 min，程序升温，起始温度为60 ℃，保持8 min，然后以3 ℃/min升至170 ℃，再以2 ℃/min升至270 ℃，保持10 min。

2.3 质谱条件

电离方式EI，电子能量70 eV，离子源温度230 ℃，传输线温度 280 ℃，质量范围M/Z 50～550。

2.4 质谱数据库

NIST11.L、Flavor2.L质谱数据库。

2.5 挥发性成分定性和定量分析

按上述实验条件进样分析，通过 MSD ChemStation化学工作站检索NIST11.L标准质谱图库和 Flavor2.L质谱图库，确定桑寄生及其寄主药材挥发性成分的化学组成；通过化学工作站RTE积分器进行积分(最大峰数为100)，采用峰面积归一化法计算出各成分在挥发性成分中的相对含量。

3 结果

寒、热不同寄主桑寄生与寄主药材挥发油的总离子流图谱见图1，不同寄主桑寄生及寄主药材总离子流比较见图2。桑寄生及其寄主药材挥发性成分分析结果见表1、表2、表3。柳树桑寄生识别鉴定挥发性成分68个，相对含量最高的两个挥发性成分分别为反式-橙花叔醇和芳樟醇，柳树桑寄生与其寄主柳枝共有的特征性成分为15个，这15个挥发性成分相对总含量为7.520%；肉桂桑寄生识别鉴定挥发性成分52个，相对含量最高的两个挥发性成分分别为6，10，14-三甲基-十五烷-2-酮和8-庚癸烯，肉桂桑寄生与其寄主桂枝共有的特征性成分为9个，这9个特征性成分相对总含量为4.878%。

图1 桑寄生及其寄主挥发油GC-MS总离子流

A1.柳树桑寄生；A2.柳枝；B1.肉桂桑寄生；B2.桂枝

A1.柳树桑寄生；A2.柳枝；B1.肉桂桑寄生；B2.桂枝

序号tR(min)化合物分子式柳树桑寄生挥发性成分及相对含量柳枝挥发性成分及相对含量肉桂桑寄生挥发性成分及相对含量桂枝挥发性成分及相对含量16.199正己醛 C6H12O0.8860.8580.1010.01828.180反式-2-己烯醛 C6H10O0.070---38.848正己醇 C6H14O0.2391.298--410.008苯乙烯 C8H8---0.018512.227(1R)-(+)-α蒎烯C10H16---0.190613.041莰烯 C10H16---0.207713.764苯甲醛C7H6O---1.929814.271庚醇 C7H16O0.1840.184--914.608β-蒎烯 C10H16---0.0911014.7891-辛烯-3-醇 C8H16O0.9490.949--1115.4362-正戊基呋喃 C9H14O0.7310.731--1216.064辛醛 C8H16O0.0910.186--1317.3191-异丙基-2-甲基苯 C10H140.036--0.0161417.540右旋萜二烯 C10H160.067--0.1581517.661桉树脑 C10H18O-0.475-0.0511617.8623-乙基-2-甲基-1,3-己二烯 C9H160.042---1718.1133-辛烯-2-酮 C8H14O-0.308--1818.374间羟基苯甲醛 C7H6O2---0.5171918.379水杨醛 C7H6O2-0.287--

续表1 不同寄主桑寄生与寄主药材的挥发性化学成分 (%)

续表1 不同寄主桑寄生与寄主药材的挥发性化学成分 (%)

表2 柳树桑寄生与柳枝共有的特征性化学成分 (%)

表3 肉桂桑寄生与桂枝共有的特征性化学成分 (%)

4 讨论

柳树寄主药用部位为柳枝，《中药大辞典》[11]记载柳枝“性寒”，因此将柳树寄主的药性定义为寒性寄主；肉桂寄主药用部位有桂枝和肉桂皮，2015版《中国药典》[1]记载桂枝“性温”，肉桂皮性“大热”，因此将肉桂寄主的药性定义为温热寄主。

本研究发现，不同寒、热药性寄主柳树和肉桂桑寄生的挥发性成分组成及含量不同，寄主会通过它们之间特殊的寄生关系将寄主的特征性挥发性成分转运到桑寄生中去，其中柳树寄主转运过去的特征性挥发性成分有15个，这些成分的相对总含量为7.520%；肉桂寄主转运过去的特征性挥发性成分有9个，这些成分的相对总含量为4.878%。

本草古籍[3-5]中关于寄主对桑寄生药材药性的影响记载颇多，上述挥发性成分由寄主向寄生其上的桑寄生转运，是否对桑寄生的药性构成影响，有待进一步研究。