党维霞
(宁夏固原市市场监管检验检测中心 宁夏 固原 756000)
赤芍为毛茛科植物芍药(Paeonia lactiflora Pall)或川赤芍Paeonia veitchⅡ Lynch的干燥根,作为中药材具有散瘀止痛、清热凉血的作用[1]。随着中医药的发展及人们对中医中药的深入了解,对中药材的需求量大大增加,导致滥采滥挖现象频出,野生赤芍资源锐减,供不应求;因此,人工种植赤芍可解赤芍药源匮乏的燃眉之急。近年来宁夏六盘山也大面积种植芍药,但该地区人工种植的赤芍质量是否符合药典规定并无考证;基于此,本研究对人工种植的赤芍的质量参照《中国药典》2015年版一部赤芍项下的检测项目采用高效液相色谱、薄层色谱及色谱柱等方法进行考察,现进行汇报如下:
赤芍对照药材、芍药苷对照品均购自中国药品生物制品检定研究院,批号为121093-200402、110736-201640;含量使用甲醇为色谱纯,水为超纯水,其它试剂均为分析纯。仪器:Canon 60D照相机,OLYMPUS-SZX10显微镜,BP121S电子天平,METTLER TOLEDO XS205DU电子天平;KQ3200超声波清洗机,Agilengt 1260高效液相色谱,CAMAG-TLCSCAN-NER4薄层扫描仪,Agilent VWD检测器,Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱。
样品 GY011、GY012、GY013 采自泾源县六盘山镇种植基地;GY021、GY022、GY023采自隆德县种苗园;GY031、GY032、GY033、GY034 采自固原市原州区河川乡种植基地,所有样品均经固原市市场监管检验检测中心副主任中药师张文懿鉴定为正品。
1.3.1 制备供试品溶液 样品粉末0.5g溶于10ml乙醇,振摇5分钟,滤过,滤液蒸干,残渣加2ml乙醇溶解即可。
1.3.2 制备对照药材溶液 取赤芍对照药材1g,对照药材溶液制备方法同1.3.1。
1.3.3 制备对照品溶液 去对照品溶于乙醇制成2mg/1ml溶液。
1.3.4 展开 吸取供试品溶液、对照药材溶液、对照品溶液各4μl 分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(40:5:10:0.2)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以5%香草醛硫酸溶液,加热至斑点显色清晰。
1.4.1 制备对照品溶液 称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36h的芍药苷对照品4.7mg,加甲醇于10mL量瓶中定容。
1.4.2 制备供试品溶液 取本品粗粉约0.5g,置具塞锥形瓶中,同时加甲醇25ml,称重,浸泡4h,超声处理20min,放冷,再称重,减失的重量用甲醇补足,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
1.4.3 色谱条件 Kromasil C18,流动相为甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(40:65),检测波长为230nm,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,进样量:10μl,重复测量3次。
赤芍呈圆柱形,稍弯曲,长5~40cm,直径0.5~3cm。表面粗糙,棕褐色;有皱纹、纵沟、横长的皮孔样突起及须根痕;部分表现为外皮易脱落。质地硬而脆,易折断,断面呈现粉红或粉白色,皮部窄,木部放射状纹理明显,部分出现裂隙;见图1。气微香,味微苦、酸涩。
图1 赤芍
横切面木栓层显微镜下显示为数列棕色细胞,栓内层薄壁细胞呈现为切向延长;韧皮部较窄,形成层成环;木质部射线较宽,导管群作放射状排列,导管旁有木纤维;薄壁细胞含淀粉粒及草酸钙簇晶;见表2。
图2 赤芍显微图片
供试品与对照药材、对照品色谱的相应位置上显相同的蓝紫色斑点;详见图3。
图3 簿层色谱图
色谱结果显示,芍药苷的保留时间约为7.772min,理论板数4004>3000;芍药苷含量高于药典规定,见表。
表 不同产地的人工种植含量(%)
通过对本研究抽样的各批次赤芍的性状、显微、薄层及赤芍苷的色谱鉴别,受检的所有批次赤芍性状、显微、薄层色谱均符合药典规定,芍药苷平均含量11.5%。由此可见,宁夏六盘山地区栽培的赤芍符合药典要求,具有药用价值,且品质优良。且赤芍对土壤要求不严,耐旱,六盘山的土壤、气候条件正好相符。
综上所述,宁夏六盘山地区人工栽培赤芍外形好,产量大,且有效成分含量等多种指标均符合药典规定,且芍药苷含量远高于药典,因此,可在宁夏六盘山地区进行赤芍的规范化种植,以此来缓解野生资源紧缺的现状。