王祥锟
一例猫毛滴虫病的诊治研究
王祥锟
(菏泽学院 山东 菏泽 274015)
为了治疗近几个月来多起猫滴虫病例,以及更好的预防猫滴虫病。特此根据临床诊治研究,总结出猫滴虫病的流行病学、临床表现及诊治要点,以期提高该病早期诊断能力,缩短病程,减少传播,使猫咪早期康复,健康成长。
1.1 病例 点点,暹罗猫,2月龄,雄性,未绝育,体重0.6kg,平时饲喂猫粮和罐头,自由饮水,近日发现黄色稀便严重,精神差,有食欲,自喂口服药庆大和思密达后无效。
1.2 临床症状 形体消瘦,精神极差,被毛枯乱,一级便,尾部腹侧及肛门周围被大便污染严重,气味腥臭,排便频率增加,半成形、液体状粪便,有时便中带有鲜血或粘液。感染猫结肠活检常表现为轻至重度的炎性病变、淋巴细胞和浆细胞浸润。眼结膜和齿龈苍白,鼻镜干燥,皮肤弹力差,呈明显的脱水征。触诊腹壁紧张。腹部超声检查表现大肠皱褶和局部淋巴结肿大。
1.3 病理变化 与猫胎儿三毛滴虫感染有关的病灶位于结肠内。病原在该病例的猫中有被观察到,但并不是在所有的肠道切面。因此,如果进行结肠镜检查,应取多个样本进行组织病理学检查。胎儿三毛滴虫常附着于黏膜表面,并与轻度至中度的淋巴细胞浆细胞性和中性粒细胞性浸润有关;隐窝上皮细胞出现肥大,增生并且分裂活性增加;杯状细胞减少;隐窝微脓肿;肠道表面黏膜变薄。在一些猫身上,胎儿三毛滴虫可能在结肠隐窝腔内发现,侵入固有层。原位分子杂交技术可用于区分活检样本中的胎儿三毛滴虫和人无毛滴虫。
猫滴虫病由胎儿三毛滴虫引起,胎儿三毛滴虫是一种体积微小的单细胞原生动物。其可感染牛生殖系统,也可引起猫的腹泻。胎儿三毛滴虫是毛滴虫目,毛滴虫属中的一种原生生物,可感染多种动物,虫体呈纺锤形或梨形。大小为10~20µm×3~15µm。具有3根前鞭毛和1根后鞭毛,尾部游离,虫体中部有一柱状构造,起始于虫体前端,穿过虫体中线向后延伸,被认为具有支持细胞胞体的作用,其末端突出于虫体尾端。主要寄生于猫的大肠并在肠道内以二分裂的方式增殖,其往往影响结肠,对回肠和盲肠也有影响,但不经常侵入结肠隐窝,而是附着在结肠表面的上皮层。显微镜下观察,胎三毛滴虫呈快速而无序的运动状态。
图1 显微镜下的三毛滴虫(10×40)
图2 运动的滋养体(10×40)
3.1 品种偏好 纯种和混种猫,公或母都有毛滴虫病。常见的纯种猫包括玩具虎猫,暹罗猫,孟加拉猫,北美短尾猫和缅因猫。
3.2 易感年龄 年龄小于2岁(平均年龄9个月)的通常易患猫的猫滴虫病。
3.3 传播途径 胎儿三毛滴虫在世界范围存在,可通过直接触传播。另外还可经粪-口途径间接传播,主要经共享的猫砂,猫垫、刷子或母婴传播。
3.4 病因及风险因素 病因主要有猫咪生活的环境卫生条件差;经常喂食生食或不干净的食物;未进行定期驱虫;生活区域内有大量的猫。在感染毛滴虫过程中可能会出现并发疾病,如猫炎症性肠病,猫传染性腹膜炎,猫肠道冠状病毒,猫白血病病毒或猫免疫缺陷病毒感染;或者混合感染贾第虫鞭毛虫,等孢子球虫和隐孢子虫等寄生虫病。如以上并发症发生,会延长患猫病程,增加治愈难度。
4.1 粪检法 (1)腹泻粪便样本多次直接粪便镜检。取新鲜粪便(正常体温,<2h内的粪便)与生理盐水(0.9%)混合滴片直接显微镜检查。陈旧的样本,滋养体失去了活力并且发生退化,就会无法辨认。可以在2g粪便中加入3ml的生理盐水来延长毛滴虫的存活时间。取少量粪便(火柴头大小)放在一个温暖的玻片上,然后滴一滴生理盐水与粪便混合。或者在直肠中插入棉签拭子,可以收集少量的新鲜粪便。滴片不能太厚,因为容易遗漏滋养体。一个简单的经验法则是观察者应该能够通过这个粪便滴片能阅读报纸上的文字。(2)在玻片上盖上盖玻片,显微镜下放大100x进行观察运动的生物,并放大400x进行确认。对粪便滴片进行全面检查,有发现运动的滋养体后,可通过盖玻片边缘滴一滴碘,或者制备新的粪便滴片加碘来进行生物形态学鉴定。推荐一种类似“浓茶”的弱碘溶液。(3)直接粪便涂片的主要限制是样本量,寄生虫阴性结果在粪便量少时并不少见。直接粪便患有自发性疾病的猫,粪便滴片检查对诊断毛滴虫敏感性相对较低(14%)。此外,在没有固定和染色粪便的情况下,三毛滴虫的滋养体很难与非致病性的肠道毛滴虫,如人五毛滴虫区分开来。三毛滴虫也需要和贾滴虫区分开来。贾第虫滋养体有一个凹的腹侧盘和落叶样运动。相比之下,三毛滴虫为纺锤形,有一个波动膜,有整个身体的长度,并且以更不规则和不平稳的方式移动。与贾第虫不同的是,三毛滴虫没有包囊阶段,这点强调了粪便漂浮法对三毛滴虫病的诊断具有局限性。毛滴虫不会在冷藏中存活,很少在成形粪便样本中发现。
4.2 微生物培养 用一种袋装的猫三毛滴虫试剂盒进行粪便培养。如果多个粪便滴片直接检查滋养体为阴性,可以考虑采用一种诊断猫三毛滴虫感染的商业试剂盒。大约取0.05g(火柴头大小)的新鲜粪便放置于InPouch里进行培养,或用一个生理盐水沾湿的棉签放在直肠内采粪便样本,然后在InPouch培养基中轻轻搅动以进行培养。应在室温下黑暗中采用直立位置进行培养,每48h检查一次,用20x或40x物镜检查是否有运动的滋养体(图2),最多观察10d。在室温培养之前,在37 (98.6°F)的InPouch培养基上培养24h有助于早期诊断,因为温暖的温度更有利于滋养体复制。在显微镜评估之前,可以用制造商提供的塑料夹子轻轻的将Inpouch培养基安置到光学显微镜的台面上进行显微镜观察。导致培养阴性的原因包括采用陈旧、干燥或非腹泻或冷藏的粪便,在这些粪便中,滋养体不太可能存活,或使用抑菌润滑剂采集的粪便,或在InPouch培养基中放入了过多粪便,导致细菌或酵母菌过度生长。
4.3 聚合酶链反应(PCR) PCR检测是诊断猫三毛滴虫感染最敏感的方法,也是这三种中最贵的诊断方法。PCR检测比粪便培养更敏感,有55%粪便培养呈阴性或大便正常的样本进行PCR检测呈阳性。要求取新鲜粪便样本进行PCR检测。PCR特异性地针对胎儿三毛滴虫并且不会扩增出贾第鞭毛虫和人五毛滴虫的DNA。
5.1 治疗 (1)驱虫:罗硝唑是治疗猫三毛滴虫的首选药物。剂量为30mg/kg,口服,q24h,连用7d。同时给予恩诺沙星(5mg/kg,口服,q24h,连用5d);芬苯达唑(50mg/kg,口服,q24h,连用5d);甲硝唑(75mg/kg,口服,q24h,连用5d);替硝唑(30mg/kg,口服,q24h,连用5d)。在使用甲硝唑治疗的同时,为了不让猫咪继续拉稀,可配合思密达同时使用。也可适当的补充益生菌,帮助肠道恢复正常的功能。切忌所有的药物一同使用,请分时段给予。(2)补液:病猫脱水严重,食欲佳,采取对症治疗方案,为了纠正水和电解质失调、维持酸碱平衡、补充营养提供热能、增强抵抗力,补液处方为:5%葡萄糖生理盐水注射液10ml,ATP注射液0.5ml,维生素C注射液1ml,乙酰辅酶A针剂50IU,混合后静脉滴注;早晚各1次,连续使用3~5d,观察病猫脱水恢复情况。(3)加强营养:治疗期间停止食用罐头和一些稀湿的食物,以干粮为主,为了不让病猫继续拉稀,采用一些易消化或高纤维饮食,可改善大便性状,帮助肠道恢复正常功能。一项对104只感染三毛滴虫的猫进行的回顾性研究,有64%的猫对罗硝唑治疗有很好的反应,而约36%的猫在治疗后反应不佳或复发。重要的是罗硝唑的剂量是根据每只猫的体重准确地计算出来的。没有证据表明更高剂量的罗硝唑更有效,而且可能会增加神经毒性的风险。神经毒性的临床症状包括嗜睡、食欲不振、共济失调和癫痫发作。这些症状通常在药物治疗停止后消退,但可持续1到2周。如果观察到神经毒性迹象,必须立即停药。病情监测:停药的1~2周后重复检查粪便。建议同时给予益生菌等,使用4周。
5.2 预防 搞好清洁卫生,提供干净的猫砂,猫砂一定要每日清洁,每周换2到3次,除了更换清洁砂盆外,猫咪的食盆、水盆也每天都用开水烫一下为好,猫咪经常睡觉、趴卧的垫子也要及时清洗;提供干净卫生的食物和水;定期预防性的驱虫:为了宠物猫的健康,宠物主人要定期给猫做体内外驱虫,8周龄至6月龄的猫每个月驱虫1次,6~24月龄每个季度驱虫1次,24月龄以上每半年驱虫1次。体内驱虫药注意与疫苗间隔1周使用,如果在没确定有虫体的前提下,最好在胃肠道正常下使用;尽可能减少应激和降低居住环境的种群密度;考虑到滴虫的顽固性,一旦感染,请考虑与其他宠物隔离;不建议将接受过治疗的猫再次引进猫舍;加强宣传教育,使主人了解毛滴虫的传播途径及发病症状和危害。
经过连续5d治疗,点点精神状态良好,食欲正常,排便稍软。点点出院回家治疗,出院之后每天口服罗硝唑和益生菌,腹泻通常会随时间推移而消退。一些猫咪对罗硝唑耐药,易复发。若出现复发,排除其他潜在病原,给予益生菌,需加量罗硝唑剂量治疗。一周后复查,大便未见异常,临床症状消失,镜检未见滋养体,确定痊愈。
(1)为预防人的感染,建议与感染猫接触的人注意基本的卫生预防措施,以避免感染寄生虫。这些预防措施也有助于防止感染扩散到其他猫身上,防止人类感染猫可能携带的其他感染。(2)适当的卫生预防措施包括:处理猫粪后彻底洗手;清洁猫砂盘后彻底洗手,不管猫是否腹泻;猫的抓伤或咬伤应立即用肥皂和水清洗,如果出现感染的迹象,如红肿、疼痛或肿胀,应尽快就医;免疫系统弱的人不应处理猫的粪便或猫砂盒;若您的猫出现腹泻,应充分地检查,如发现感染三毛滴虫应积极治疗,且重复多次便检确定是否还有虫体,以决定继续治疗或暂时观察。
猫的毛滴虫病可能误诊,也可能未被诊断。粪便中毛滴虫数量经常发生波动。因此,数量正在下降时,观察不到毛滴虫。另外,毛滴虫通常被误认为是贾第鞭毛虫,因为其结构有很大的相似性。贾第鞭毛虫的运动轨迹类似于“下降的落叶”,而胎儿三毛滴虫的运动是快速和不稳定的。
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(2019–07–19)
S858.293
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1007-1733(2019)10-0028-03