(贵州省种畜禽种质测定中心,贵州 贵阳 550018)
母猪深部输精也叫子宫内授精法,输精管采用套管式设计,由内管和外管组成,先将外管插入子宫颈皱褶后,再插入细的输精内管(比普通输精管长15~20 cm),通过子宫颈皱褶进入子宫内输精。与传统子宫颈授精技术相比,深部输精技术更接近母猪卵子受精的位置,缩短精子与卵子结合的距离和时间,增加到达受精部位的有效精子数,防止精液倒流,提高受胎率[1]。本文根据理论和生产实际,对深部输精的操作方法、注意事项等关键技术进行介绍,供参考。
根据母猪的发情征状准确判断发情阶段。母猪发情特征:爬跨其他母猪,食欲减退,烦躁不安;当其他母猪休息时,却表现出“找公猪”的行为;有渴望的表情,眼睛失去注意力;耳朵向上竖起,身体颤抖;接受背部按压时站立不动,尾巴上下摇摆;阴户红肿,阴道有黏液流出;把手指放在阴唇间有潮湿、温暖的感觉。发情前期:采食量下降,烦躁不安,频频排尿,爬跨其他母猪;阴门红肿呈鲜红色,有少量分泌物,此现象持续时间1~2天。发情期:按压背部时表现安静,耳朵直立,接受爬跨;外阴粉红,肿胀减轻,有黏稠状分泌物流出,此现象持续时间2~2.5天。发情后期:阴门苍白,无分泌物和肿胀,此现象持续1天。输精最好选在母猪发情期,此时效果最好。
人工授精通常采用常温精液或冷冻精液进行配种。(1)常温精液:采取公猪精液后,立即按照《种猪常温精液》(GB 23238—2009)对外观、剂量、精子密度、精子活力、精子畸形率、直线前进运动精子数进行检测。正常精液外观为乳白色,无脓性分泌物,无皮毛等异物;采精量≥100 mL;精子密度≥1亿个/mL;精子活力≥70%;精子畸形率≤20%。采集的精液符合标准后进行常温精液制作,地方品种剂量要求达到40~50 mL,其他品种80~100 mL;精子活力≥60%;每剂量中直线前进运动精子数为:地方品种≥10亿个,其他品种≥25亿个;精子畸形率≤20%。符合检测标准的公猪精液分装保存备用。(2)冷冻精液:根据输配母猪的数量进行冻精解冻,每瓶输精瓶需要0.5 mL细管冻精8~10管,通常采用50 ℃水浴锅解冻15~16秒后取出,按照10倍的稀释量加入解冻液,将解冻稀释好的精液置于30 ℃水浴锅放置10分钟,进行精液检测后分装到输精瓶中,约40 mL/瓶,混匀30 ℃孵育20分钟后进行输配。
输精是人工授精的最后一道工序,能否将精液全部有效输入到子宫内极为重要,输精效果取决于输精技术、适用的输精器具和判断适宜的输精时间。深部输精法采用双管式输精管,是在普通输精管内部加装1支细长(长度超过外管15 cm左右)、半软的内导输精管。内管前端有小孔,后端连接精液瓶[2]。
3.1 外阴清洗消毒输精前对待配母猪进行阴部清洗消毒,通常用0.1%高锰酸钾溶液洗净并用干燥毛巾或纸巾擦拭干净,保证外阴及外阴周围擦干无残留溶液。
3.2 插入输精管输精时先用手抚摸母猪外阴部,左手拇指和食指轻轻扳开母猪阴唇,右手持输精管,按照常规输精的操作方式将带有海绵头的输精管倾斜向上45°角逆时针旋转插入阴道内,当向前插不动向后拽有阻力时,即达到子宫颈皱褶处。向前缓慢推送内管,如果遇到阻力时可等待20~30秒再继续向前推送(子宫颈未完全松弛时会遇到阻力),通过3~5个皱褶,感觉前方空旷即可。内管插入深度:经产母猪10~15 cm,初产母猪10~12 cm。见图1。
图1 输精管插入部位
3.3 输精输精前需要把精液瓶轻轻摇晃,使精子在精液瓶内分布均匀。将精液瓶接到输精管上,一只手推住外管,另一只手轻轻挤压输精瓶,使精液填充内管道。精液可以靠母猪子宫收缩自动吸收或直接把精液挤入子宫。在输精过程中要检查有无回流现象,如无回流,握住输精管把剩下精液继续挤压完;如发生回流,可能输精管不在正确位置,需要轻轻抽出内管重新插入。输精完毕后把内管和输精瓶一同抽出,内管抽出后需要把外管抬高30秒左右,再顺时针轻轻拔出外输精管。深部输精结束后,需要将公猪放入配种母猪前面进行刺激,保证每头母猪都能接触到公猪。公猪刺激主要是为了让母猪兴奋,让子宫收缩、蠕动,产生负压减少精液倒流。
4.1 后备母猪不建议用深部输精技术有研究表明,不是所有的母猪都适用深部输精法,后备母猪使用深部输精法容易使母猪子宫颈受损[3~5]。
4.2 卫生要求更严格,注意清洗与消毒输精前对待配母猪进行阴部清洗消毒,保证外阴及周围干净再配种,降低母猪患子宫炎症的概率。
4.3 配种母猪在配种前1小时和配种时不要接触公猪刺激配种前不要让母猪接触公猪,公猪刺激母猪后会造成母猪兴奋,子宫收缩、蠕动,造成输精管不易插入母猪生殖器官内。
4.4 给母猪插入内管时要轻柔、细心,并且要有耐心技术人员在进行深部输精的过程中动作要轻柔,动作粗鲁会伤害到母猪阴道、子宫颈、子宫体等生殖器官,整个过程中要细心观察精液是否有回流,要有耐心。
4.5 操作复杂,对操作人员要有良好的培训深部输精法与常规输精法操作上有区别,操作人员最好是经过培训。若技术不熟练,在输精时力度掌握不好,容易伤害到母猪阴道、子宫颈、子宫体等生殖器官,继而引发细菌感染使母猪患上炎症,影响以后配种[2]。
5.1 减少精液的使用量深部输精法采用内置导管的特制输精管,输精时精子能够直接到达子宫体,缩短精子和卵子结合的距离和时间,保持精子活力,减少精液损失,增加与卵子结合的机会,从而在使用较少精液量的情况下就可以达到更好的效果。研究表明,采用深部输精法20 mL和40 mL输精剂量较常规输精60 mL剂量的受胎率高[1]。与常规输精相比,深部输精法不仅能提高母猪的繁殖性能,而且还节约优质种公猪的精液,用以输配更多的母猪。
5.2 输精时间短,减少配种劳动力研究表明,在输精员操作熟练的情况下,深部输精技术整个流程所用时间为0.5~1分钟,常规人工授精需要4~8分钟。深部输精技术较常规人工授精技术减少了操作过程中诸如公猪诱情、沙袋负重、人工按摩等刺激工作,提高了配种人员的工作效率,一定程度上减轻了员工的劳动强度和工作负担[2]。
5.3 提高优质公猪的利用率常规输精一般1次使用精液80 mL,有效精子总数在40亿个/剂。而深部输精的精液只需要20~40 mL,有效精子总数在8亿~20亿个/剂。精液使用量的降低,可使规模猪场减少种公猪养殖数量,从而降低养殖成本[6,7]。
5.4 加快选种选育,提升后代猪的遗传性能深部输精法大大减少了精液的使用量,使得优良种公猪精液可以得到广泛的应用,可以促进种公猪的选择强度,加快优势基因的扩散,加快育种进程,扩大优秀公猪的使用范围,提高后代猪的遗传性能,从而带动生猪生产水平的进一步提高,提高猪场经济效益。