李晓芳
泛著金属冷光的手术台上,躺着一只狗,它的代号是917。手术台由两块金属板构成,形成V字形夹角,917仰躺在夹角里,嘴里衔着麻醉呼吸管,逐渐陷入昏迷,只剩腹部还在微微一起一伏。和手术室一墙之隔的细胞室里,技术人员打开中间的传递窗口,递过来一个透明培养皿,里面是十余枚浸泡在培养液里的克隆胚。917腹腔被打开,技术人员用针筒大小的胚胎移植管吸取培养皿里的克隆胚,植入到它的输卵管,缝合,整个过程只花了15分钟。
接下来的时间里,917会被送到保育室,等待一个神奇的变化。克隆胚逐渐成熟,从一个细胞开始分裂发育成囊胚,并逐步移动到917的子宫内,那是新生命的开始。若无意外,两个月后,宠物狗“果汁”的克隆体就会诞生了。
不过,意外经常会发生。这已经是“果汁”的第二次克隆了,前一次,最终失败。据介绍,这种克隆手术的成功率,只有10%左右。
从1996年第一只克隆动物多利羊诞生,科学界就从未停止对这一技术的研究。狗和猫这些宠物被验证能成功克隆后,商业化运作几乎是第一时间展开,在中国克隆一只狗的费用是38万,猫是25万,尽管花费不菲,但哪里都不缺愿意为爱宠一掷千金的主人。
有人把克隆当成一剂后悔药,有人用它来抵抗宠物去世后席卷而来的巨大悲伤,也有人只想借克隆把优良基因100%传承下去。人在宠物身上投射的感情和欲望是多种多样的。在这一刻,他们选择用克隆来实现。
2018年的一天,何军赶到位于北京北五环外昌平区一座略显荒凉的工业园区里,四周都是尘土,最近的地铁站还有好几公里远。
果汁,就是在这里进行克隆的。
果汁是调良宠物学校校长何军捡到的,当时它才一个多月大。它是一只串串狗,何军都说不清楚它到底是混了多少品种诞生的。但是,果汁很聪明,外形也讨喜可爱,一岁多的时候就被选中参加电影拍摄,后来它的电影事业发展顺风顺水,果汁成了流浪犬基金会的代言狗,参与更多电影的拍摄。它成了一只明星犬,如今一天的拍摄费用在2万元左右。
果汁可以说是独一无二的,曾经有剧组发起过“寻找另一只果汁”的活动,想找一只跟它外形一样的狗做替身,没有成功。何军也几次想过拥有另一只和果汁相似的狗。
这是他来希诺谷的目的。
北京希诺谷生物科技有限公司藏身在工业园一栋小楼的三层,乍看之下像是一家普通公司,实在看不出掌握着先进生物技术的样子。在公司里拐一个弯,穿上浅蓝色的防护服进入实验区,才能看出点“技术”的味道。
工作人员提取了果汁的体内细胞后,就带到了这里。过程很简单,工作人员剃掉宠物大腿内侧一部分的毛发,碘酒消毒,用取样器取下两块直径3毫米皮肤样本——相当于一颗芝麻粒大小。希诺谷的宣传手册上形容,这个过程就像“人划破手指一样,程度比狗玩耍时不小心刮掉一小块表皮还轻微”。
这是克隆最基本的门槛——至少得存有一个完整的细胞。曾有美国客户来电咨询,自己的宠物已经去世几年,只保留一些毛发,是否可以克隆。希诺谷副总经理赵建平回复道:不能。虽然毛发、唾液、牙齿等可以提取DNA,但提取不到完整的体细胞,而且DNA链有时也不完整,生命诞生的基本条件就无法满足。
希诺谷实验区一进门就是一间液氮储藏室,墙边整齐地摆放着三个温度保持在零下196度的液氮罐,每个液氮罐能存放900份细胞,提取的动物体细胞在零下的液氮里会变成漂亮的玻璃状晶体。周围还随意地散落着十几个白色泡沫箱,这是为外地宠物主人提供的,能摆放冰块等制造细胞冷藏条件。
杨冬杰遇到过很多来找希望的主人,她是希诺谷的线上推广人员,负责客户的第一道咨询程序。电话那头情绪明显激动、伤感的,大多是因为狗突然死亡,比如生急病、出车祸了,他们一时间很难接受现实,下意识地寻找各种挽救方法。
也是在2018年,上海85后女孩张玥演得知宠物狗妮妮病重,无力回天。妮妮已经陪她17年,在她心里,妮妮已经成了家庭成员之一。她打电话给希诺谷,让他们保存妮妮的体细胞,准备克隆一只新的妮妮,填补它去世留下的空白。
何军最早是从自己的两个学生那里知道“宠物克隆”的。他们是一对夫妻,没有后代,养了三只狗,把它们当成自己的孩子。有一次,他们带着狗去宠物会所,会所老板强迫其中一只大狗下水游泳,结果,它再没上来。两人悲痛不已,当时国内还没有克隆宠物机构,为了对抗巨大的悲伤,他们选择远赴韩国克隆爱犬。韩国的克隆费用更高。一位2017年到韩国克隆的宠物主人说,自己花了大约1亿韩元——70万左右人民币,几乎是国内价格的两倍。
虽然动物克隆技术已经诞生了20多年,但克隆犬一直进展缓慢,因为生理构造问题,犬只被公认是最难克隆的动物之一。
2001年,第一只克隆猫诞生在美国得州农机大学的实验室里。2005年4月24日,韩国克隆专家黄禹锡在首尔大学实验室培育出全球第一只克隆犬,后来还组建了韩国秀岩生命工学研究院,提供商业化克隆项目。当时黄禹锡风头一时无两,在此后的十几年里,一直没人能打破韩国的技术垄断。
尽管克隆实验有相关标准,但欧美国家一直对克隆技术商业化持谨慎态度。第一只克隆猫和克隆狗出现后,美国的基因公司曾想获得技术授权,推广克隆宠物商业项目,这遭到动物保护组织的强烈反对。因为每一次克隆,都会有大量代孕犬参与。2005年,韩国把1000个胚胎,陆续植入123只狗的体内,才最终成功克隆出一只狗。在动物保护者看来,仅仅为了满足一位用户的需求,就牺牲上百只狗的福利,是不人道的。欧美一些政治人物,对这种“残忍”的做法深感忧虑,甚至他们还担心,这些技术可能会用在人身上。
但在亚洲国家,这些问题并不那么大。
2015年,希诺谷创始团队有了做克隆狗的念头。2012年中国养犬政策放松后,宠物市场增长异常明显,根据青桐资本数据,2015年宠物行业市场规模已经接近1000亿元,当时团队认为克隆宠物是有市场基础的。他们在宠物医院做市场调研,分发了600份左右的调查问卷,其中问道,如果不考虑价格因素,是否能接受克隆宠物,20%的受访者表示可以接受。这个比例超出了团队的预期。
何军
另一份报告来自胡润研究院。该机构的《中国高净值人群消费需求白皮书》显示,资产过千万的养犬家庭预计超过30万。希诺谷团队预计,如果其中1%的家庭有克隆宠物的需求,每年宠物克隆数量就能超过3000只。以每只38万元计算,宠物克隆总市场规模将达11.4亿元。
工作人员把克隆胚胎植入代孕狗体内
希诺谷团队决定做克隆犬项目。2016年3月,在昌平那处荒凉的工业园区内,实验团队组建起来,用了近15个月时间,第一只克隆犬“龙龙”正式诞生了。它的编号是217,这意味着在它前面,有216次克隆实验没能成功。
不同物种间的克隆步骤没有什么不同。一个大致的程序是,先提取要克隆动物的体细胞,再从实验动物身上收集未受精的卵母细胞,抽走其细胞核,然后将体细胞植入卵母细胞中,使用电击或化学手段让它们融合、激活,培养到一定程度时移植到代孕动物体内等待细胞发育成胚胎,直至最后生产。
看起来过程很简单,实则不然。狗一年平均发情一到两次,一次排卵数量约为十枚,且卵巢排出的卵母细胞要落到输卵管才能成熟,中间的窗口期只有短短几个小時,“你要过早提取了,卵母细胞还没成熟,不能体外培养;时间晚了,卵母细胞就老化了,做不了实验”。赵建平说。
而且,犬的卵母细胞质量差,其生物特性导致厚厚的一层脂肪严密地包裹着子宫、卵巢、输卵管,输卵管来回盘绕着穿插在脂肪里,和脂肪一样是白色的,完全分不清楚。
克隆犬“龙龙
犬类的卵母细胞脂肪含量极高,“放在显微镜下是一团黑,什么都看不见”。赵建平说。
没有任何捷径,只有不断地试错积累经验,光发情鉴定、判断卵母细胞成熟时间并提取成熟卵母细胞这一步骤,他们就试验了近半年时间,仅在冲卵环节(从输卵管冲取卵子),试验次数就超过一千多次。去除细胞核、将本体的体细胞移植进已经去核的卵子里,将它们融合激活又花掉大半年时间。
整个克隆过程,保守周期是十个月,除了固定的两个月实验室克隆时间,两个月孕期,两个月哺乳期,剩下的四个月是为了留有余地,应对各种突发情况。
一只代孕犬一次会被植入十几个克隆胚胎,情况好的,十几个克隆胚胎里会有一个成功发育,用2到3只代孕犬就能生出一只克隆犬。最坏的结果是全军覆没,所有过程又得重来一次,最终会用到5-6只代孕犬。
失败会出现在任何一个环节。何军带着果汁取样后,一直到克隆细胞植入代孕犬体内都没问题,细胞也开始增殖分裂成胚胎。但代孕犬孕期到40天左右,胚胎停止发育了。希诺谷告诉何军,还得重新做一次。
一旦付费,希诺谷会保证,无论失败多少次,客户最终获得一只克隆狗。有些顾客明确只要一只克隆狗,希诺谷就一次只选一只代孕犬孕育克隆胚胎,失败了才进行下一次。有些顾客可以接受好几只克隆狗,且强烈要求尽快克隆出自己的宠物,希诺谷就会同时做两到三组,多的时候会选5只代孕犬同步进行。当然,每只多出生的克隆犬,客户要多付10万元。
如果按移植胚胎数量与最终成功的数量来对比,“成功率还到不了10%”。赵建平说,“克隆为什么成本高啊,因为克隆效率本身还是比较低的。”
为了能够成功克隆陪伴了自己17年的妮妮,张玥演抛售了约20万元的股票,加上刷信用卡凑齐了38万。
和很多人想象中的情况不太一样,克隆宠物的,并非都是富人。据赵建平介绍,他们公司的很多客户,最大的共同点是热爱自己的宠物。他们当中,女性居多。不一定都是有钱人,有许多中等收入人群,甚至有过一位月薪六七千的女士花38万克隆了自己收养的一只流浪狗。
除了普通宠物主人,赵建平说,也有10%-20%的客户是商业犬舍,他们选择克隆更多是为了商业收益,希望能实现更优良的繁育。一只基因优秀的纯种犬,再给它配另一只同样优秀的纯种犬,“理论上获得优良后代的概率较大”,赵建平说,但现实中,精子与卵子结合,基因重组是随机的,不确定性是存在的。只有通过克隆,才会“把优良基因百分之百地保留下来”。
同样在2015年前后,世界基因编辑产业迎来风口。2016年,3家基于第三代基因编辑技术的公司先后上市,总市值近40亿美元。在巨大的商业化前景下,希诺谷在2016年正式开展克隆犬项目的同时,也增加了基因编辑方向的技术应用。也就是说,人们不仅可以克隆一只狗,还可以选择改变它的基因,让它更优秀。
希诺谷最早用基因编辑技术,造出了容易患动脉粥样硬化病变的犬。他们敲掉了受精卵中的APOE基因,日后这只狗的血浆胆固醇将升高,血脂、血糖会比正常高出3倍。之所以如此,是为了让这只狗及其后来的克隆犬,能够用于医疗研究,因为狗生理构造更贴近人类疾病模型。
人类的欲望可以无限叠加。保存了百分之百优良基因,还是会有人问能不能更好?有些客户知道希诺谷还有基因编辑这项业务,会提出一些附加请求,希诺谷董事长米继东在采访里提到,有主人提出想通过基因编辑让宠物性格更好,或是让金毛犬不掉毛,改掉了这些缺陷后再做克隆。还有一些犬舍希望能让克隆犬的毛色更漂亮,性能更优良,或是更有利于人类驯养。
人类对基因编辑技术的担心,在克隆宠物问题上,展现得淋漓尽致。不过,这种技术并没有发展到想怎么编辑基因就怎么编辑的水平,所以大部分人的请求并没有办法满足。可以被满足的,也因为价格太高,最终没有成功商业化的案例。
对普通宠物主人,这种考虑相对较少。他们最大的需求是感情延续,所以基本要求是原样克隆。“提出基因编辑的一般是希望修复基因疾病。”赵建平说,有一位客户的宠物是因为先天性心脏病去世的,他来做克隆时就提出希望能在细胞阶段就把这一基因缺陷修复了。
对宠物主来说,克隆宠物不只是一笔经济账。当得知妮妮的克隆体成功培育出来,接到新妮妮那一刻,张玥演觉得花的钱都值。
何军也终于接到通知,第二次代孕成功了。小果汁一个月大的时候,何军把它接回公司。大小果汁放一起对比,他觉得不太像。小果汁毛色更深。不过,何军也不太确定。
“毕竟果汁更小的时候我也没看过”。但随着相处加深,何军发现兩只狗小便时都喜欢这里尿一点那里尿一点,“这个年龄段的狗不应该出现这样的行为表现,因为它更多的是一种传递信息的方式。这就跟大果汁很像。”
每只克隆犬出生后,希诺谷会收集本体、克隆体和代孕犬的基因样本,冷链保存快递到公安部南昌警犬基地做遗传关系鉴定,以此证明交付的犬只确实是克隆出来的,两者基因一致。
但克隆并不能保证两只宠物一模一样。“真正的克隆,DNA是99.99%一致,并不能保证百分之百。”赵建平表示,由DNA决定的性格特征、骨骼架构、生理基本功能都能做到相似,但毛色、斑点位置等并不完全由细胞核遗传基因决定,还会受细胞质中的线粒体影响。而卵母细胞去除了细胞核,却还有细胞质。这些因素都会造成微小的遗传差别。
后天的抚养环境也会造成差异。张玥演发现妮妮的性格更加活泼,可能是因为家里人都知道它贵,对它更娇惯了。
两个果汁也是如此。8岁的大果汁更胖一些,毛色更浅也更蓬松;9个月的小果汁还在成长阶段,体型明显小一点,毛发耷拉着,颜色偏深棕。小果汁更活泼,一来客人就会热情地扑上来,大果汁则相对稳重地落在后面。
这是对宠物克隆最大的质疑。虽然看起来很像,但克隆无法“复制灵魂”,批评者认为这是一场自欺欺人的骗局。中国社会科学院哲学研究所研究员邱仁宗认为,应该“禁止将科研资金浪费在实际上不可复制的、死去宠物的行为上”。
对此,赵建平有自己的解释:“克隆出来的宠物,主人也是重新跟它建立认识和互动过程,这个过程中它表现出的很多细节、动作跟原来的狗是一样的。对于主人来说,他的感受是,这就是我原来的那只狗。它跟你新买一只狗表现出来的东西是完全不一样的,因为新买的狗的DNA不一样。基因还是很奥妙的一个东西。”
24 天大的“果汁”克隆体“汁汁”
大果汁当然不懂未来小果汁会替代自己这个概念,它们的关系很好,一起玩耍一起吃饭。何军有点惊讶,过去大果汁是不能接受有其它狗在自己身边的,然而有一次,他开车运输它们俩,大果汁温顺地趴着,小果汁靠过来,躺在它身上,它没有表示任何异议,就那么让小果汁躺在自己身上睡着了。