浅谈兽医实验室技能竞赛血凝抑制试验技能培训

文│达剑森（江苏省扬州市邗江区畜牧兽医站）

鸡新城疫抗体水平检测既是常规检测技术，又是一项具有典型代表性的试验技能，常作为一个固定项目在兽医实验室技能比武中出现。笔者曾数次参加和指导省、市级兽医实验室检测技能比武，对县、市、省级竞赛的培训工作总结如下。

一、培训的组织

1.积极争取主管部门支持。各市级、县级农业主管部门都积极推进兽医实验室检测人员参加各级兽医实验室检测技能竞赛，进一步形成“自上而下倡导、自下而上争取”的双促双升良好局面。一方面，以竞赛为手段培养兽医实验室人员操作技能；另一方面，在省级竞赛乃至国家级竞赛中拿到相应的名次和奖项，既是该地区兽医实验室水平和人才储备实力的充分体现，同时所取得的荣誉对实验室人员个人职称的晋升也有重要的帮助。

2.严格按照技能操作标准。血凝抑制试验（新城疫抗体水平检测）以国家职业标准《动物疫病防治员》(三级)技能要求为基础，依据《新城疫诊断技术》( GB/T16550—2008) 标准，确定技能竞赛操作标准和规程。要求兽医实验室检测人员在日常操作中严格按照竞赛操作标准规范操作。

3.认真研读竞赛评分标准。指导教练需要逐项研究上级竞赛承办方下发的竞赛评分标准，沟通咨询承办单位，搜集各项竞赛权威解释，并整理归纳近几年的参赛真题资料中的考点分布及重点。一方面，由于国标方法中不可能对竞赛评分标准中每一个操作细节进行具体说明；另一方面，各个地区的操作流程也各有侧重。所以，竞赛提供的评分标准需要专业解读，如“配制适量的红细胞悬液”，实际操作中多少容积算为“适量”各方有各自的理解，所以每个地区有各地区相应的竞赛标准。所谓“仁者见仁智者见智”，笔者曾作为选手多次参加近年江苏省兽医实验室技能竞赛及比对活动，在竞赛和培训过程中将自己的感受作一积累，每项操作中注重强调细节以及容易失分的关键点，都需要在培训中给选手进行针对性的解读，从而使参赛选手在的重点环节有重点发挥。

4.全面考虑竞赛选手选拔。选拔参赛选手时注重细心认真、操作熟练，更重要的是要有较好的心理素质。培训时可每两人一组，选手间资源共享、独立完成，并能应对突发情况随机应变。首先进行理论培训和考核，并在该轮次中筛选出理论功底扎实、应试能力较强的兽医实验室人员作为种子选手。该轮培训一般由各县市区兽医站推荐1～2名选手参加培训，在选拔过程中我们发现：一方面，新进人员刚走出校园，思维敏捷，理论基础和理解能力都优于年长同志，选手大多理论基础较好，但动手能力较差，因为学校缺乏相关课程设置或实践动手机会较少，需要经过较长一段时间的实践和摸索才能成功采集鸡血；另一方面，长期从事兽医实验室工作的同志，技术熟练，统筹安排能力较强，但存在知识更新速度慢，对于实际问题的机理理解和解决较慢等问题。因此，如何在现有的动物防疫队伍中选择合适年龄段的选手是个关键。在态度方面，对于参加培训不积极主动，试验操作中缺乏维护实验台面卫生意识，欠缺生物安全意识的选手应尽早让其退出。对筛选留下的选手，严格按照竞赛规程和评分标准，开展区域内技能竞赛，让真正优秀的选手脱颖而出，选拔心理素质过硬、勇于担当、现场表现最稳定的选手参加上一级竞赛。

二、培训的过程

1.试验材料准备。竞赛时应按照规范为每组选手配备齐全仪器设备、实验试剂和采集红细胞的公鸡（一般需三只以上）。仪器设备是竞赛的前提保障，如果仪器设备陈旧、操作器械使用不顺手、红细胞悬液品质不佳等，都会严重影响选手试验操作及竞赛结果。因此，只有保证试验操作台和仪器设备齐备，才能够满足多组选手同时进行试验以及举行地区内技能竞赛，让更多选手感受到技能竞赛的氛围，从而促进日常检测工作。

2.红细胞的制备。采血能否成功以及红细胞悬液能否成功制备是决定试验的进度和成败的直接因素，进而影响选手的竞赛心理。首先，规范采血前的准备工作、采血技术、采血过程中如何避免发生溶血等；其次，在洗涤鸡红细胞过程中加入生理盐水（或PBS）的体积、离心转速和时间的确定、洗涤次数等都须按规范操作；第三，根据检测样品的数量，计算试验所需1%红细胞悬液的总量，并准确熟练地配制。

3.抗原与血清。抗原应在首次开封后分装冷冻保存，以后试验按需取用，避免因反复冻融而降低抗原的血凝效价。每次试验前都必须重新测定抗原血凝价。阴性血清和阳性血清也应进行分装冷冻保存，并避免反复冻融。待检血清样品可冷冻保存，防止腐败变质。

4.血凝试验。血凝反应板使用前需保证洁净（也可使用一次性血凝反应板），并进行标记，依照规范加样、振荡、静置。按规范注意使用多道移液器、加入红细胞悬液、振荡强度和时间以及静置时封板的细节事项。对于血凝试验结果判定，首先以阴性对照成立为前提，以完全凝集红细胞悬液的病毒抗原的最大稀释度，确定为该病毒的血凝价，并以1∶nlog2形式表示试验结果。

5.单位抗原的配制。根据血凝试验血凝价来配制4单位病毒抗原。计算4单位病毒抗原的操作方法和用量都须按规范进行操作，并注意清晰标记。需要注意的是病毒配制过多，容易造成病原浪费，也存在污染的风险。

6.血凝抑制试验。首先对血凝反应板清晰标记，加样步骤、振荡、感应作用时间等都按照新城疫诊断技术规范进行。血凝抑制试验的结果判定是在病毒对照完全凝集、阴性血清对照完全不凝集的情况下，将能完全抑制红细胞凝集的血清最大稀释度确定为该血清样品的血凝抑制价。

7.报告单规范化和实验台整理。在试验过程中应及时填写HA/HI检测报告单，并在相应时间节点向评委举手示意，请评委来评判试验步骤和结果是否准确，否则视为违规或步骤缺失而被扣分。报告单中逐项填写血凝价、4单位抗原稀释度和血清样品的血凝抑制价等。

整理试验工作台面是竞赛过程的收尾环节，也是日常检测工作中的重要环节。实验废弃物和已使用工具的处理以及移液器的复位等细节都应全面规范。只有在选手熟悉整个竞赛流程后，数天进行一轮模拟竞赛，反复强化训练，积累临场经验，提高心理素质，增强应变能力，锻炼参赛选手在竞赛压力下的有序操作的能力和冷静思维。

三、培训的效果

1.专业能力。经过技能竞赛的数轮培训，进一步规范参赛选手对“新城疫抗体检测”技能操作，反复练习操作步骤，通过实践充分理解其原理，发现不足、不断改进，进而提升参赛选手的知识水平和专业技能。

2.方法能力。竞赛培训过程中，需要培训人员与参赛选手一起查找资料、搜集信息，促使选手学会从各种媒体搜集专业信息；对于每轮模拟竞赛，要求每名选手都进行总结经验、整理归纳、发现问题、优化时间安排等，提高其分析问题和解决问题的能力，提升其科学思维的能力；启发选手通过设计实验来检测实际生产中遇到的各种问题。

3.社会能力。通过规范化和标准化的操作规程，使选手深入理解操作规程背后的原因，培养选手高度的责任感、强烈的事业心以及实事求是的科学态度；通过小组讨论沟通，培养选手临场表达能力、应变能力和人际沟通能力；通过团队参赛的形式，培养选手良好的团队意识和合作精神。

四、结语

笔者曾指导选手参加过省级兽医实验室技能比武。培训过程中，选手的试验思维进一步逻辑化、缜密化，试验操作进一步规范化、标准化，切实提升血凝抑制试验检测水平，提高了日常工作效率。一定程度上讲，该项竞赛受益的不只是部分“种子选手”，还可普及到全体兽医实验室检测人员，若在地区内举行更大范围的初赛则能更好地达到团队整体提高的目的。除了地区内交流，各县市区之间也可相互学习，比学赶超。此外，建议竞赛组织者在赛前公布更为细致的评分标准，而不是作为内部资料，只对评委公布。同时，也可在赛后对竞赛做总结通报，指出选手的不足之处，让培训人员和参赛选手共同总结提高，从而提高兽医实验室检测队伍整体水平。