马起梅,邓纲,郭曦隆,彭定祥,刘立军*
(1.华中农业大学植物科学技术学院,湖北武汉430070;2.云南大学农学院,云南昆明650500)
苎麻(Boehmeria niveaL.)是多年生宿根性草本纤维作物,既能种子繁殖,又能无性繁殖。但由于苎麻是杂合体,种子繁殖后代间有差异,为保持亲本优良品种特性,一般以无性繁殖为主[1-2]。苎麻无性繁殖是保持品种纯度与良种特性的有效方法,在新品种选育和优质高产栽培中具有十分重要的意义[3-6]。苎麻的无性繁殖方法主要有:利用地下茎进行分蔸和细切种根繁殖,利用地上茎进行分株繁殖、压条繁殖、扦插繁殖和组织培养繁殖等。扦插繁殖因具有繁殖系数高、操作简便等优点而被广泛应用,其中水培扦插繁殖效果较好,周期短、操作简单、省时省力、节约开支[7]。
苎麻新麻由于有效株数少、高位分枝多、纤维品质差、原麻产量低,制约了苎麻优良品种的快速繁育推广。沈金权等[8]研究表明,苎麻幼苗打顶可消除顶端优势,促进苎麻基部腋芽萌发而快速生长,提高新麻产量与品质;贺再新等[9]提出了在扦插时打顶或插条长出根系时打顶的技术,破除插条顶端优势,促进腋芽萌发成分枝,培育低位分枝扦插苗,提高了新麻的经济产量与纤维品质,麻单产达600 kg/hm2左右,纤维细度明显提高。
高锰酸钾(KMnO4)是园艺作物扦插繁殖常用的消毒剂[10-12],适宜的KMnO4浓度及其处理方式对插穗生根具有促进作用。陈小桦[10]采用KMnO4处理丹桂扦插苗,以3‰浓度浸泡12 h,生根率达到94.3%,较对照提高62.6%,显著提高了生根条数、平均根长等。曹巧凤[11]研究发现KMnO4处理显著提高了白杨插条生根率、生根量,使愈伤和不定根形成时期提前,降低了腐烂率(仅3%)。相关学者在胡枝子[12]、枣[13]、忍冬[14]、薄荷[15]、色木槭[16]、罗布麻[17]、藤本植物[18]、水蜡[19]、茶树[20]和山核桃[21]等植物中对嫩枝扦插生根特性也进行了研究。
本研究拟开展苎麻水培扦插生根试验,分析KMnO4处理方式对扦插生根特性的影响,以期获得长势良好的无性繁殖系,为苎麻水培扦插繁殖育苗提供理论依据。
苎麻打顶后选择生长健壮、无病虫害的植株,采穗母本为“华苎5号”头麻。插穗选取直径0.4~0.5 cm,长度12~14 cm,剪除叶片至只带3~4片顶端完全叶,下切口剪成平口,避免损伤其他部位,随即将下切口浸泡在水中,时长1 h,以免萎蔫。1 h之内对插穗基部进行消毒处理,准备扦插。
试验采用1‰ KMnO4浸泡插穗基部消毒,设置2个处理,D1:浸泡深度0.5 cm,时长5 h;D2:浸泡深度3 cm,时长5 h;对照(CK)采用本实验室常规处理:0.1‰ KMnO4浸泡深度5 cm,时长72 h,保证处理与对照同一时间开始。每个处理3次重复,每重复扦插30株,水培25 d。水培室温度25~28℃,空气湿度75%~85%,日光灯光源,光暗周期为16 h/8 h。消毒处理完成后,转至250mL三角瓶中,进行水培生根,培养基质为凉白开水[22],添加水量为200 mL。
水培期间,定期随机取样调查插穗的生根率、生根量、平均根长和最大根长等。水培结束后用根系扫描仪(EPSON Perfection V800 photo)扫描,采用根系分析系统(RHIZO 2009)对测定的总根长、总根体积、总根表面积、平均直径、总根尖数、总分枝数进行分析。插穗鲜重、根重用精度为千分之一的电子天平测定。
采用SPSS 19.0软件对试验数据进行方差分析,Origin 2017软件进行绘图。
由图1可知,D1与D2、CK与D2处理间生根效果差异明显。D1处理的苎麻插穗根系一级根、二级根根量多,根长较长,根毛较D2处理明显增多,CK处理苎麻插穗根系较D1的根量较少、根长较短。CK处理苎麻插穗生根部位会出现高位不定根、基部腐烂的迹象;D1、D2处理的插穗生根部位皮部颜色正常,但D2处理根系生长缓慢,根系分布不均匀,随水培时间延长,D2处理叶片颜色变黄。综合可知,D1处理苎麻扦插生根效果最佳,D2处理效果最差。
图1 KMnO4处理后苎麻嫩枝扦插25 d生根效果Fig.1 Effect of different KMnO4 treatment for 25 days on the rooting of ramie cuttings
由表1可知,3个处理其根干重、鲜重大小为 D1>CK>D2,茎干重、鲜重大小为CK>D1>D2,叶干重、鲜重大小为D1>CK>D2。CK、D1处理苎麻插穗根鲜重平均值超过1 g,而D2处理根鲜重小于1 g,插穗根系重量D1>CK>D2,但茎鲜重、叶鲜重差异不显著(p>0.05)。茎干重、叶干重差异亦不显著(p>0.05),与 CK、D2组相比,D1组叶干重分别增加 18.69%、22.32%;与 CK组相比,D1组根干重增加17.39%,D2组减少29.35%。D1处理对插穗生根有促进作用,苎麻插穗根重、叶量增多,而D2处理对苎麻扦插生根有抑制作用。
表1 KMnO4处理对苎麻插穗重量的影响Table 1 Effect of different KMnO4 treatments on the weight of ramie cuttingsg
由图2、3可知,50%以上的样本重量值分布集中,根和茎的重量在中位线和均值附近,而叶片重量值比较离散。CK处理生根效果较好,根系重量在0.569~2.153 g,但随水培时间延长,基部易出现腐烂和根系脱落等现象导致死苗;D1处理根系生长良好,生根量多,根长较长,根系重量在0.859~2.192 g;D2处理根系生长缓慢、不均匀、根量少,其根系重量范围在0.855~2.683 g。因此,KMnO4溶液浸泡插穗基部深度为0.5 cm为最佳。
图2 KMnO4处理对苎麻插穗重量的影响Fig.2 Effect of different KMnO4 treatments on the weight of ramie cuttings
图3 KMnO4处理苎麻插穗根系扫描图Fig.3 Different KMnO4 treatment of ramie root cuttings
由表2可知,直径0.0~0.5 mm水培根系根长最长,D1与D2差异显著(D1>CK>D2);根尖数最多(D1>CK>D2),处理间无显著差异。直径0.5~1.0mm水培根系根长次之,CK与D2、D1与D2差异显著(D1>CK>D2);CK、D1、D2根尖数分别为 33.8、34.4、45.8个,D2处理根尖数较 CK、D1显著增加;直径0.5~1.0 mm根系表面积及根系体积最大(D1>CK>D2),CK与 D2、D1与 D2差异显著。直径1.5~2.0 mm根长等性状值最小,处理间差异不显著。
表2 KMnO4处理对苎麻插穗不同直径再生根长、根表面积、总根体积和根尖数的影响Table 2 Effects of KMnO4 treatment on root length,surface area,total volume and tip number of ramie cuttings with different diameters
由图4可知,KMnO4处理对苎麻插穗生根量(从插穗基部发出的一级根)的动态变化有影响,从水培开始到第5天,CK、D1处理苎麻插穗开始形成不定根,而D2处理从第6天开始产生不定根,从第5天到第10天根系生长速率最快(D1>CK>D2),第10天插穗生根量增速减缓,第15天时一级根系数量达到最大。苎麻水培插穗的不定根生长发育期,一般是第5天开始生根,第5~10天生根速率最高,第15天生根量达到最大。水培期间第10天不断产生二级根和大量的根毛,之后一级根数量也有生长,虽有愈伤组织,但很难形成不定根。
图4 KMnO4处理对苎麻插穗生根条数(a)和平均根长(b)的影响Fig.4 Effect of KMnO4 treatment on rooting number(a)and average root length(b)of ramie cuttings
扦插是植物营养繁殖的常用方法,水培法用水作为培养基质,其优点是能够肉眼直接观察根系生长发育形态和动态变化的过程[23]。扦插繁殖常使用的消毒剂主要有高锰酸钾、酒精、硝酸银、次氯酸钙、抗生素、次氯酸钠、升汞、氯气等,不同消毒剂的使用均能达到杀菌消毒的目的,但其均对试验材料存在一定的毒性,故把握消毒剂的作用时间至关重要。
在本试验中,使用1‰KMnO4浸泡苎麻插穗基部深0.5 cm的生根特性较同一浓度浸泡插穗基部深3 cm的差异显著,原因可能是苎麻插穗为半木质化,不同浸泡深度插穗基部与KMnO4接触面积不同,浸泡插穗基部越深,接触面积越大,被氧化的面积也越大,从而造成插穗基部生根部位氧化过度而受损。
消毒效果影响后续不定根的形成发育,消毒时间过短或消毒浓度太低均会导致消毒不彻底,而消毒时间过长或消毒剂浓度太高,会造成氧化过度和毒害作用[23]。传统方法采用0.1‰KMnO4溶液消毒浓度低,浸泡插穗基部深5 cm,时间达72 h,插穗与KMnO4接触面积大、消毒时间过长,导致插穗基部出现高位不定根,生根部位表皮和基部出现腐烂迹象,水培第10天在生根部位出现黑色斑点。而本试验采用1‰ KMnO4溶液,浓度是传统方法的10倍,但仅需浸泡插穗基部0.5 cm深,浸泡时间5 h,结果发现其插穗生根部位皮部色泽正常,不会出现高位不定根。生产上利用高浓度低深度浸泡插穗的方法,生根性状良好,基部不易腐烂并缩短了育苗时间。
综合评价,1‰KMnO4处理插穗基部,浸泡0.5 cm深,时长5 h,生根效果最佳。