生殖器疱疹高危人群两种血清学检测方法阳性率的比较

展帮乐 阮建波 朱和玲

摘要：目的  了解生殖器疱疹（GH）高危人群两种血清学检测方法的阳性率。方法  收集暨南大学附属东莞医院2018年1月～5月427例GH高危人群采用酶联免疫法，2018年7月～11月528例GH高危人群采用化学发光免疫法，比较两种检测方法检测单纯疱疹病毒（HSV）IgM阳性结果。结果  化学发光免疫法检测的528例GH高危人群中HSV IgM阳性94例，阳性率17.80%，其中1型IgM阳性42例，阳性率7.95%，2型IgM阳性52例，阳性率9.85%;酶联免疫方法检测的427例GH高危人群中HSV IgM阳性24例，阳性率5.62%，其中1型IgM阳性12例，阳性率2.81%，2型IgM阳性12例，阳性率2.81%。化学发光免疫法阳性率检测高于酶联免疫法，差异有统计学意义（P<0.05）。结论  化学发光免疫法检测高危GH人群HSV IgM的阳性率高于酶联免疫法，且操作简单，检测时间周期短。

关键词：生殖器疱疹;单纯疱疹病毒;化学发光免疫法;酶联免疫法

Abstract：Objective  To understand the positive rates of two serological tests for high-risk population of genital herpes（GH）.Methods  Collecting Dongguan Hospital Affiliated to Jinan University from January to May 2018， 427 high-risk population of GH were enrolled in enzyme-linked immunosorbent assay. 528 high-risk population of GH from July to November 2018 were chemiluminescence immunoassay. Two methods were used to detect IgM positive result of herpes simplex virus （HSV）. Results  528  high-risk population of GH cases were detected by chemiluminescence immunoassay， with 94 cases of HSV IgM， the positive rate was 17.80%， including 42 cases of type I IgM positive， the positive rate was 7.95%; 52 cases of type 2 IgM positive， the positive rate was 9.85%; 427 high-risk population of GH cases were detected by enzyme-linked immunosorbent assay methods， with 24 cases of herpes simplex IgM， the positive rate was 5.62%， including 12 cases of type I IgM positive， the positive rate was 2.81%; 12 cases of type 2 IgM positive， the positive rate was 2.81%. The positive rate of chemiluminescence immunoassay was higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）， the difference was statistically significant （P<0.05）. Conclusion  The positive rate of herpes simplex virus IgM in high-risk genital herpes is higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the operation is simple and the results are rapid.

Key words：Genital herpes;Herpes simplex virus;Chemiluminescence immunoassay;Enzyme-linked immunosorbent assay

單纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV）在皮肤黏膜的角质形成细胞内复制，并蔓延到周围的细胞中，感染细胞周围出现多形核细胞和淋巴细胞浸润，从而引起表皮局灶性炎症和坏死，出现原发感染的症状。生殖器疱疹（genital herpes，GH）是临床上常见的一种慢性病程较长而又无法根治的性传播疾病，超过80%的原发性GH会反复发作，其与免疫功能密切相关，当机体受到创伤、情绪紧张、病毒感染及抵抗力下降时，潜伏病毒易被激活。近40%～60%的早期感染HSV患者无临床症状或症状不显著，隐性患者及无症状者是该病的主要传染源，及时发现并且采取措施是预防该病传播和及时治疗的关键环节[1]。临床上常采用血清学检测进行诊断或筛查。目前国内有多种HSV抗体检测试剂盒，暨南大学附属东莞医院2018年1～5月采用酶联免疫法检测，7～11月改用化学发光免疫法检测，现将两种检测方法结果进行统计分析，结果报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料  选取2018年1月～5月、7月～11月暨南大学附属东莞医院门诊GH高危人群（近1个月有不洁性交史;父母有外GH感染史，患儿外生殖器有皮损）955例为研究对象，其中1月～5月427例，7月～11月528例，年龄9个月～71岁，平均年龄（33.85±9.93）岁。2018年5月之前，该院检验科一直采用酶联免疫法检测HSV，2018年7月之后改用化学发光免疫法检测。

1.2仪器与试剂  采用的检测仪器为深圳爱康URANUSAE120全自动酶免仪，HSV IgM检测采用爱尔兰Trinity公司HSV-1 IgM、HSV-2 IgM检测试剂盒;化学发光免疫法检测仪器为深圳亚辉龙生物科技iFlash 3000化学发光测定仪及配套HSV IgM检测试剂盒。

1.3方法

1.3.1标本采集  采集研究对象空腹静脉血3～5 ml，3000 r/min，离心10 min，分离后血清样本放于2～8℃环境下贮存，在48 h内检测。

1.3.2 HSV抗体测定  实验操作完全按试剂说明书和仪器操作规程进行。酶联免疫法检测时间2 h，化学发光免疫法40 min。

1.4观察指标  比较两种方法检测HSV-1 IgM、HSV-2 IgM、HSV IgM的阳性率。化学发光免疫法HSV-1 IgM或HSV-2 IgM值>0.9 COI为阳性。

1.5统计学处理  采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，计数资料采用（n，%）表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

化学发光免疫法检测HSV-1 IgM、HSV-2 IgM、HSV IgM的阳性率均高于酶联免疫方法，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

3讨论

GH是一种慢性、反复发作、病程较长而又无法根治的生殖器部位病毒感染疾病，其复发与患者的免疫功能有关[1，2]。引起GH的HSV包括HSV-1和HSV-2两种血清型。HSV-1主要感染眼、口、唇等腰以上的皮肤和黏膜以及中枢神经系统，偶见于外生殖器;HSV-2主要引起生殖器和腰以下的皮肤、黏膜以及新生儿感染，并与女性外阴癌和宫颈癌的发生相关。HSV感染若发生在怀孕和分娩过程中，可能会造成胎儿多器官系统性感染和疱疹脑炎，继而导致流产、早产、死胎、畸形等[3]。

临床大多数GH患者症状不典型，需要通过实验室检测确诊，并根据病毒学或血清学检测结果为性传播疾病患者或高危患者制定治疗方案。病毒学检测包括细胞学、抗原检测和细胞培养。细胞涂片敏感性和特异性均低，PCR抗原检测敏感性高但收费高，细胞培养特异性强但敏感性低，由于感染患者排毒为间歇性[4]，培养或PCR检测阴性并不一定代表不再存在感染，故临床上不做首选。2017年版中华人民共和国卫生行业标准正式将血清抗体检测纳入GH诊断标准。IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，感染HSV后3～5 d可在血清中检测到特异性IgM抗体，它是HSV初次感染的确诊标志。血清样本中，IgM阳性提示近期感染，对于防止性伴侣间和母婴间HSV传播有着重要意义[3]。

酶联免疫法和化学发光免疫法是临床常用的抗体免疫学检测技术。酶联免疫法是一种结合抗原抗体反应的特异性和酶高效催化反應的专一性的免疫技术;化学发光免疫法包括化学反应系统和免疫反应系统，即在抗原-抗体特异性反应过程中，伴随化学反应过程而产生光的反射现象。化学发光系统是利用在化学反应中释放大量自由能产生激发态中间体，当其回到稳定的基态时，同时也发射出光子，利用发光信号测量仪对所发出的光量子进行定量测定。酶联免疫法价格较化学发光免疫法低，但多为定性结果，时间需2 h，且厂家不同，其试剂灵敏度也不同。化学发光免疫法试剂与仪器配套，避免因不同厂家试剂操作不同和灵敏度差异产生误差，精确度高，不仅能定性分析，还可定量分析，检测时间周期短，仅40 min。

本次研究两种检测来自不同人群，但样本均来自同一医院，收集时间超过5个月，且样本数量足够，对两种检测结果统计分析影响较小。本研究结果显示：化学发光免疫法HSV-1 IgM阳性检测率（7.95%）、HSV-2 IgM阳性检测率（9.84%）和总HSV IgM阳性检测率（17.80%），与何卫东等[5]报道的结果相近;且高于酶联免疫法HSV-1 IgM阳性检测率（2.81%）、HSV-2 IgM阳性检测率（2.81%）和总HSV IgM阳性检测率（5.62%），差异具有统计学意义（P<0.05）。

综上所述，GH高危人群HSV血清学检测化学发光免疫法阳性率高于酶联免疫法，且操作简单，检测时间周期短。

参考文献：

[1]樊建勇，赵阳，杨慧兰.单纯疱疹病毒的生物学特点及其潜伏复发机制研究进展[J].皮肤性病诊疗学杂志，2015，22（1）：82-85.

[2]钟道清，周天恩.肥大细胞在HSV-2感染所致生殖器疱疹中的作用[J].皮肤性病诊疗学杂志，2018，25（3）：128-131.

[3]柯吴坚，杨斌.2015年美国CDC生殖器疱疹治疗指南解读[J].中国皮肤性病学杂志，2016，30（5）：530-533.

[4]邹先彪.《2014英国生殖器疱疹指南》解读[J].中国临床医生杂志，2016，44（1）：14-15.

[5]何卫东，刘明春，陈秋月，等.化学发光法检测育龄妇女单纯疱疹病毒结果分析[J].中国卫生标准管理，2018，9（16）：117-119.

收稿日期：2019-3-26;修回日期：2019-4-18

编辑/杨倩